Traducido del inglés al español - www.onlinedoctranslator.com alimentos Artículo Impacto de los métodos de procesamiento en laIn VitroDigestibilidad de proteínas y DIAAS de diversos alimentos producidos a partir de mijo, cebada de las tierras altas y trigo sarraceno Lulu Fu, Song Gao y Bo Li* Laboratorio de Calidad y Seguridad Alimentaria de Beijing, Facultad de Ciencias de la Alimentación e Ingeniería Nutricional, Universidad Agrícola de China, N.º 17, Qinghua East Road, Distrito de Haidian, Beijing 100083, China * Correspondencia: [email protected] ; Tel./Fax: +86-10-62737669 Abstracto:Los cereales son fuentes ricas de proteína dietética, cuyas evaluaciones nutricionales a menudo se realizan en granos crudos o aislados de proteína. Sin embargo, el procesamiento y la digestión gastrointestinal pueden afectar las composiciones de aminoácidos (AA) y luego cambiar la calidad de la proteína. En este estudio, determinamos la digestibilidad y las composiciones de AA de varios alimentos producidos por granos integrales (PG) o harina (PF) de tres cereales (mijo, cebada de las tierras altas y trigo sarraceno) y analizamos el impacto de los métodos de procesamiento en el puntaje de aminoácidos indispensables digestibles (DIAAS) utilizando el protocolo INFOGEST.in vitroLa digestibilidad de las proteínas de los alimentos a base de cereales fue menor que la de los granos crudos, y el PF mostró una mejor propiedad de digestión que el PG. La digestibilidad intestinal de los AA individuales dentro de un alimento varió ampliamente, y la digestibilidad de Cys e Ile fue la más baja entre todos los AA. Los valores de DIAAS de PG fueron menores que los de PF en cada tipo de cereal, y el PF del trigo sarraceno tuvo el valor de DIAAS más alto, seguido de la cebada de las tierras altas. El primer AA limitante fue todavía Lys para el mijo y la cebada de las tierras altas en comparación con los granos crudos; sin embargo, para el trigo sarraceno fue Leu. Este estudio proporcionó información nutricional sobre los productos de cereales y ayudó a guiar la colocación de diferentes alimentos en las dietas. Palabras clave:digestión humana simulada; procesamiento térmico; alimentos a base de cereales; calidad de las proteínas; mijo; cebada de las tierras altas; trigo sarraceno Citación:Fu, L.; Gao, S.; Li, B. Impacto de los métodos de procesamiento en laIn Vitro Digestibilidad de proteínas y DIAAS de varios alimentos producidos a partir de mijo, 1. Introducción El mijo es un cultivo alimentario importante de las zonas áridas y semiáridas de África y Asia, que se cebada de las tierras altas y trigo sarraceno. remonta a 7000 años atrás.1]. El trigo sarraceno se consume como alimento básico en la mayoría de las zonas Alimentos2023,12, 1714. https://doi.org/ de Asia y América del Norte.2]. La cebada de las tierras altas se cultiva principalmente en la zona del Tíbet, 10.3390/foods12081714 también conocida como “Qingke” en chino [3]. Los cereales se consumen como alimento básico de la dieta Editor académico: Conrad O. Perera humana y aportan la mayor parte de las proteínas de la dieta de los seres humanos, especialmente en los países en desarrollo [4,5]. Recibido: 6 de marzo de 2023 Revisado: 4 de abril de 2023 Aceptado: 17 de abril de 2023 Publicado: 20 de abril de 2023 Por lo tanto, es necesario evaluar con precisión la calidad nutricional de las proteínas de los alimentos a base de cereales. Los cereales se cocinan generalmente utilizando granos o harina para elaborar diversos alimentos, como arroz, bollos al vapor y fideos. La cocción puede afectar las propiedades nutricionales y fisicoquímicas de las proteínas de los alimentos como consecuencia de la oxidación, isomerización y reacciones de los AA con azúcares reductores, polifenoles y taninos [6–8]. Además, los alimentos a base de cereales deben pasar por una digestión gastrointestinal (GI) antes de la Derechos de autor:© 2023 de los absorción de nutrientes. La disponibilidad metabólica de un AA individual puede variar ampliamente dentro de autores. Licenciatario MDPI, Basilea, un alimento, y la disponibilidad del AA limitante determina el nivel de todos los AA utilizados en la síntesis de Suiza. Este artículo es de acceso proteínas y otras actividades metabólicas [9]. abierto y se distribuye bajo los términos y condiciones de la licencia Sin embargo, determinar directamente la digestibilidad de las proteínas y los AA en la dieta de los seres humanos suele plantear cuestiones éticas espinosas. La FAO ha recomendado los AA en la dieta como un Creative Commons Attribution (CC BY) nutriente individual y una puntuación de AA indispensable digestible utilizada (DIAAS) como indicador de la (https://creativecommons.org/ calidad de las proteínas, que incluye la medición de la digestibilidad ileal [10]. Sin embargo, estos licenses/by/ 4.0/). Alimentos 2023,12, 1714. https://doi.org/10.3390/foods12081714 https://www.mdpi.com/journal/foods 2 de 15 Alimentos2023,12, 1714 Los experimentos realizados con animales son difíciles, costosos, consumen mucho tiempo y plantean graves problemas éticos [11,12]. Por lo tanto, una armonizaciónin vitroEl protocolo de digestión fue desarrollado por la acción COST (Cooperación Europea en Ciencia y Tecnología) INFOGEST (una red internacional de excelencia sobre el destino de los alimentos en el tracto gastrointestinal), con el objetivo de imitar de cerca los procesos de digestión en humanos [13,14]. El protocolo estático INFOGEST fue validado por su relevancia biológica sobre las proteínas de la leche utilizando cerdos como modelo animal [15], y en comparación con los digestos humanos [16]. Además, se validó el modelo estático INFOGEST para el análisis cuantitativo de la digestibilidad de proteínas y AA individuales y la posterior determinación de DIAAS en diferentes fuentes de proteína (frijol negro, cereal de salvado de trigo, guandú, et al.) utilizando cerdos como modelo animal [17] y utilizando resúmenes humanos como comparación [18]. En este estudio, determinamos la digestibilidad de proteínas y la composición de AA de varios alimentos producidos a partir de granos integrales (PG) o harina (PF) de tres cereales (mijo, cebada de las tierras altas y trigo sarraceno) y analizamos el impacto de los métodos de procesamiento en el puntaje de aminoácidos digestibles (DIAAS) utilizando el protocolo INFOGEST. Este estudio ayudó a guiar la colocación de diferentes alimentos en las dietas para mejorar la disponibilidad de proteínas y AA. 2. Materiales y métodos 2.1. Material vegetal La cebada de las tierras altas (variedad Beiqing 3), el mijo (variedad Eastlight) y el trigo sarraceno (variedad Largetrigon) se adquirieron de Dongfangliang agri-foods Co., Ltd. (Datong, China). 2.2 Extracción de proteínas Los granos secos se molieron utilizando un molinillo JYL-C91T (Joyoung Co., LTD, Jinan, Shandong, China) con tamices de malla 60 para hacer harina integral. La harina se mezcló con hexano (1:10,el/en) durante 4 h a 37◦C para eliminar los lípidos. El precipitado se recogió y se secó al aire para obtener harina integral desgrasada. La harina de mijo desgrasada se mezcló con agua desionizada (1:7,el/en) y se agregaron tres enzimas (amilasa, glucoamilasa y celulosa) a pH 5,0 para hidrolizar el almidón y la celulosa [19]. Después de la centrifugación (9000 rpm durante 15 minutos), se recogió el precipitado y se liofilizó como aislamiento de proteína de mijo. Los aislados de proteína de harina de cebada de tierras altas desgrasada se prepararon mediante precipitación isoeléctrica [20]. Brevemente, la harina se mezcló con agua desionizada (1:10,el/en) y se agitó continuamente durante 30 min (pH 9,5, 45◦C) La mezcla se centrifugó durante 10 min a 4500 rpm. Después de la centrifugación (4500 rpm durante 10 min), se recogieron los sobrenadantes y se ajustaron a pH 4,0. Los sobrenadantes se eliminaron al final de la centrifugación, seguido de un lavado dos veces con agua destilada. El precipitado se neutralizó utilizando NaOH 2 M y se liofilizó como aislados de proteína de cebada de las tierras altas. La extracción de aislados de proteínas de harina de trigo sarraceno desgrasada siguió el protocolo de Kayashita et al. [21] con varias adaptaciones. Brevemente, la harina se mezcló con agua desionizada (1:10,el/en) y se agitó durante 30 min (pH 8,0, 40◦C) Después de la centrifugación, se recogieron los sobrenadantes y se ajustaron a pH 4,5. El precipitado se recogió al final de la centrifugación y se lavó dos veces con agua destilada. El precipitado se neutralizó a pH 7,0 utilizando NaOH 2 M y se liofilizó como aislados de proteína de trigo sarraceno. 2.3 Procesamiento de alimentos PG significaba granos cocidos preparados utilizando una olla disponible comercialmente (que pasaba 100◦ C vapor), según el método establecido por Liu et al. [22] con algunas modificaciones. En el caso del mijo, los granos se remojaron durante 30 minutos a 25◦C y cocido en agua (1:1,5,el/en) durante 25 minutos. Para la cebada de las tierras altas, los granos se remojaron durante 30 minutos a 25◦C y cocido en agua (1:2,el/en) durante 35 min. En el caso del trigo sarraceno, los granos se remojaron durante 30 min a 25◦C y cocido en agua (1:2,el/en) durante 30 minutos. 3 de 15 Alimentos2023,12, 1714 El PF incluía bollos de mijo al vapor, fideos de cebada de las tierras altas y fideos de trigo sarraceno. Los granos secos se molieron utilizando un molinillo JYL-C91T (Joyoung Co., LTD, Jinan, Shandong, China) con tamices de malla 60 para hacer harina. La preparación de bollos de mijo al vapor fue la siguiente: por cada 100 g de harina de mijo, se agregaron 48 ml de agua desionizada y 1,0 g de levadura. La mezcla se amasó manualmente para hacer una masa y se dejó reposar durante 20 minutos a 38◦C. Luego se amasó manualmente la masa hasta formar una bola y se cocinó al vapor durante 20 minutos a 100◦C. La preparación de los fideos de cebada de las tierras altas fue la siguiente: por cada 100 g de harina de cebada de las tierras altas, se agregaron 2,0 g de sal y 70 ml de agua destilada. La mezcla se amasó manualmente para hacer una masa y se dejó reposar durante 20 minutos a 38◦C. Después de esto, la masa se laminó y se cortó en tiras de 2,0 mm de ancho y 2,0 mm de espesor y se cocinó al vapor durante 17 minutos a 100◦C, que se denominaba fideos de cebada de las tierras altas. La preparación de los fideos de trigo sarraceno coincidía básicamente con la de los fideos de cebada de las tierras altas, pero variaba en la adición de agua (por cada 100 g de harina de trigo sarraceno, se añadían 55 ml de agua destilada). Después del procesamiento, todos los alimentos a base de cereales se enfriaron a 40◦C y sometido a in vitrodigestión. 2.4. Digestión in vitro In vitroLos métodos de digestión se realizaron según el protocolo estático INFOGEST [13 ], con algunas modificaciones para la concentración de bilis según los protocolos de Zhang et al. [23] y Ding et al. [24]. 2.4.1. Preparación de fluidos de digestión simulada Las soluciones madre de electrolitos de los fluidos de digestión simulada incluyeron fluido salival simulado (SSF), fluido gástrico simulado (SGF) y fluido intestinal simulado (SIF). (i) La preparación de la solución madre de electrolitos de SSF fue la siguiente: 15,1 mL de 0,5 M KCl, 3,7 ml de 0,5 M KH2correos4, 6,8 ml de NaHCO3 1M3, 0,5 mL de MgCl 0,15 M2(H2O)6 y 0,06 mL de 0,5 M (NH4)2CO3Se mezclaron y diluyeron con agua ultrapura hasta 400 mL. El pH se ajustó a 7,0 con HCl 6 M; (ii) La preparación de la solución madre de electrolitos de SGF fue la siguiente: 6,9 mL de 0,5 M KCl, 0,9 ml de 0,5 M KH2correos4, 12,5 ml de NaHCO3 1M3, 11,8 mL de NaCl 2 M, 0,4 mL de MgCl 0,15 M2(H2O)6y 0,5 mL de 0,5 M (NH4)2CO3Se mezclaron y diluyeron con agua ultrapura hasta 400 mL. El pH se ajustó a 3,0 con HCl 6 M; (iii) La preparación de la solución madre de electrolitos de SIF fue la siguiente: 6,8 mL de 0,5 M KCl, 0,8 ml de 0,5 M KH2correos4, 42,5 ml de NaHCO3 1M3, 9,6 mL de NaCl 2 M y 1,1 mL de MgCl 0,15 M2(H2O)6Se mezclaron y diluyeron con agua ultrapura hasta 400 mL. El pH se ajustó a 7,0 con NaOH 1 M. 2.4.2.In VitroDigestión In vitroLa digestión comprendió la digestión oral simulada, la digestión gástrica simulada y la digestión intestinal simulada. Las actividades enzimáticas se midieron según el protocolo estático INFOGEST [13], con una actividad de amilasa de 13 U/mg, una actividad de pepsina de 500 U/mg y una actividad de tripsina en pancreatina de 6,5 U/mg. Toda la digestión se realizó en tubos de centrífuga de 50 mL, agitados a 37◦C y 100 rpm. Se realizaron experimentos de control con agua ultrapura. Digestión oral simulada: cada muestra se trituró con una picadora eléctrica JYL-C93T (Joyoung Co., LTD, Jinan, Shandong, China). La solución de sustrato se mezcló con SSF en proporción 1:1 (en/ en), que contiene 75 U/mL de α-amilasa y 1,5 mM de CaCl2El procedimiento fue el siguiente: se mezclaron 5 mL de la solución de sustrato (0,15 g de proteína) con 3,5 mL de la solución madre de electrolito SSF. Se añadió una cantidad de 0,5 mL de la solución de a-amilasa (1500 U/mL, preparada en una solución madre de electrolito SSF), 25µL de 0,3 M CaCl2y 975µSe añadieron 100 L de agua ultrapura y se incubó la mezcla a 37ºC.◦C con agitación durante 2 min. Digestión gástrica simulada: el digesto oral se mezcló con SGF a 1:1 (en/en) proporción que contiene 2000 U/mL de pepsina y 0,15 mM de CaCl2El procedimiento fue el siguiente: se mezclaron 10 ml de digestión oral con 7,5 ml de la solución madre de electrolitos de SGF. 4 de 15 Alimentos2023,12, 1714 1,6 mL de solución de pepsina (25 000 U/mL, preparada en una solución madre de electrolitos SGF), 5µL de 0,3 M CaCl2, 200µL de 1 M HCl y 695µSe añadieron 100 L de agua ultrapura y se ajustó el pH a 3,0 con HCl 1 M. Posteriormente, la mezcla se incubó a 37◦C con agitación durante 2 h. Digestión intestinal simulada: El digesto gástrico se mezcló con SIF en una proporción de 1:1 (en/en ) proporción que contiene pancreatina (basada en la actividad de tripsina a 100 U/mL) y 0,24% (Virginia Occidental) bilis. El procedimiento fue el siguiente: se mezclaron 20 mL de digestión gástrica con 11 mL de la solución madre de electrolitos SIF. Se añadió una cantidad de 5,0 mL de una solución de pancreatina (800 U/mL en función de la actividad de tripsina, preparada en una solución madre de electrolitos SGF), 2,5 mL de solución de bilis (38,4 mg/mL), 40µL de 0,3 M CaCl2, 150µSe añadieron 1 L de NaOH 1 M y 1,31 mL de agua ultrapura. Se ajustó el pH a 7,0 con NaOH 1 M. Posteriormente, la mezcla se incubó a 37◦C con agitación durante 2 h. La digestión gástrica o gastrointestinal simulada se detuvo inmediatamente calentándola en un baño de agua hirviendo durante 10 minutos [14]. Después de la precipitación de las fracciones de proteína solubles pero no digeribles con ácido tricloroacético (5% (en/en), la concentración final a 4◦C durante 1 h [25–27] y centrifugación (9000 rpm a 4◦C durante 15 min), los sobrenadantes (fracciones digestibles) se almacenaron inmediatamente a−80◦C hasta nuevo análisis. 2.5. Análisis de proteína cruda (PC) y aminoácidos (AA) Los contenidos de CP se determinaron siguiendo el método Kjeldahl (AOAC, 2010) utilizando un sistema Foss Tecator (Höganäs, Suecia) con un factor de conversión de 6,25 [28]. Los contenidos de AA se determinaron en 5 mL de líquido digestivo (0,2 g de harina) después de la hidrólisis en 5 mL de HCl 6 N que contenía 0,1 % de fenol durante 24 h a 110±1◦C en un tubo de hidrólisis [29]. Después de enfriar y filtrar, el hidrolizado se evaporó en un baño de agua a temperatura constante a 55–65◦C. El residuo seco se diluyó a 0,4 g/L (concentraciones totales de AA) en HCl 0,1 N. El análisis AA se realizó después de la derivatización previa a la columna utilizando isotiocianato de fenilo como compuesto derivatizante (reactivo bioquímico Macklin, Shanghái, China). La separación cromatográfica se logró utilizando una columna AAA Agilent Advance Bio (4,6 ×100 milímetros, 2,7µm) en un sistema Shimadzu LC-15C. La detección se llevó a cabo utilizando un detector de doble longitud de onda UV (SPD-15C) con una longitud de onda de absorbancia de 254 nm y el tiempo de análisis fue de 18 min. El AA se separó utilizando una fase móvil en gradiente que consistía en el eluyente A (10 mM Na2OHP4y 10 mM de Na2B4Oh7en agua; pH 8,2) y eluyente B (ACN/MeOH/H2O = 45:45:10). El gradiente utilizado fue el siguiente: 0–0,35 min, 2%B; 0,35–6,9 min, 2%–22%B; 6,9–13,4 min, 22%–56%B; 13,4–13,5 min, 56%–100%B; 13,5–15,7 min, 100%B; 15,7–15,8 min, 100%–2%B y 15,8–18 min, 2%B. El caudal se fijó en 1,0 mL/min y el volumen de inyección fue de 10,0µNo se pudo identificar L. Trp debido a su inestabilidad en condiciones de hidrólisis ácida. Por la misma razón, se cuantificarán Gln y Asn en sus formas ácidas. Para evaluar la linealidad de la curva de calibración, se utilizaron 5 concentraciones diferentes (que van desde 0,125 a 2µmol/µL) de una mezcla estándar de AA se analizaron por triplicado mediante HPLC. El tiempo de retención de AA en las muestras de prueba fue similar al de una mezcla estándar de AA. El coeficiente de regresión lineal (R2) fue superior a 0,99 para cada AA estándar en el rango de concentración de 0,125–2µmol/µL, lo que implica una buena correlación entre las concentraciones de AA y las áreas de pico dentro de los límites de prueba (Tabla1). Tabla 1.Datos de calibración de 17 aminoácidos (AA). N.º S. 1 2 3 4 5 6 Aminoácido Tiempo de retención Regresión lineal (R2) Curva de calibración Áspid 2.584 3.371 6.794 7.166 8.237 8.567 0,9993 0,9997 0,9999 0,9999 0,9998 0,9996 y = 1.410.214,67x y = 1.626.141,02x y = 4.327.388,94x y = 4.420.685,42x y = 4.552.605,19x y = 4.531.925,27x pegamento Ser Gly Su El 5 de 15 Alimentos2023,12, 1714 Tabla 1.Continuar. N.º S. 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Aminoácido Argento Ala Pro Tiro Val Conocí Cis Isla Leu fen Lis Tiempo de retención Regresión lineal (R2) Curva de calibración 8.905 9.204 9.603 12.359 12.950 13.366 13.976 14.498 14.619 15.307 15.792 0,9994 0,9998 0,9999 0,9999 0,9996 0,9997 0,9973 0,9989 0,9998 0,9999 0,9997 y = 4.325.442,78x y = 4.710.639,21x y = 4.792.423,45x y = 5.017.018,42x y = 5.027.540,16x y = 5.259.886,56x y = 3.948.177,56x y = 4.148.934,21x y = 5.319.782,40x y = 5.104.462,37x y = 8.961.547,43x 2.6. Digestibilidad in vitro de proteínas y AA individuales El contenido de nitrógeno se determinó mediante el método Kjeldahl (AOAC, 2010) utilizando un sistema Foss Tecator (Höganäs, Suecia). El contenido de proteína se calculó utilizando los factores de conversión de 6,25 [28]. Elin vitroLa digestibilidad de las proteínas se calculó de la siguiente manera:30]: In vitrodigestibilidad de la proteína % = (Ns−No)×6.25×V Nuevo Testamento×6.25×Yo ×100% (1) Ns es %N en los sobrenadantes después de la digestión; No es %N en los blancos; V es el volumen de los sobrenadantes después de la digestión; Nt es %N en alimentos a base de cereales antes de la digestión; y W es el peso de las muestras de cereales antes de la digestión. Elin vitroLa digestibilidad de AA se calculó dividiendo el contenido de AA de las fracciones digestibles (sobrenadantes) de las muestras por el de las materias primas, utilizando la siguiente fórmula: In vitroDigestibilidad AA (%) = Fs−Para Pie ×100% (2) Fs es el contenido de AA individual en los sobrenadantes después de la digestión; Fo es el contenido de AA individual en los blancos; y Ft es el contenido de AA individual en los cereales. 2.7 Cálculo del índice AA indispensable digestible (DIAAS) La relación de referencia DIAA de los alimentos a base de cereales se calculó utilizando la siguiente ecuación [31]: Relación de referencia DIAA = mg de AA indispensables digeribles en 1 g de proteína alimentaria mg de AA indispensables en 1 g de proteína de referencia (3) donde los perfiles proteicos de referencia fueron 2 grupos de edad: niños de 6 meses a 3 años y niños mayores, adolescentes y adultos [10]. Los valores DIAAS también se calcularon para estos dos grupos de edad utilizando la siguiente ecuación [31]: DIAAS (%) = 100×valor más bajo de DIAAR (4) 2.8. Análisis estadístico El análisis estadístico se realizó con el paquete de software IBM SPSS 26.0. Todos los resultados se expresaron como medias.±Las DE y se compararon con un análisis de varianza unidireccional (ANOVA) con un intervalo de confianza del 95%. 3. Resultados 3.1. Comparaciones de los contenidos de proteína cruda (PC) y composiciones de AA entre granos crudos y aislados de proteína de tres cereales En la Tabla 1 se presentan los contenidos de PC y AA en los granos crudos y aislados de proteínas de tres cereales (mijo, cebada de montaña y trigo sarraceno).2. El contenido del CP 6 de 15 Alimentos2023,12, 1714 Los tres granos de cereales tenían un contenido de proteína de suero de leche de 11,7%, 9,3% y 12,1% de trigo sarraceno, respectivamente. Los contenidos de proteína de suero de leche de sus aislados proteicos fueron de 43,8%, 93,2% y 89,5%, respectivamente, y los aislados proteicos de mijo tenían el contenido de proteína de suero de leche más bajo. Debido a la alta hidrofobicidad y los enlaces disulfuro intermoleculares de la proteína, los métodos tradicionales como el método de precipitación isoeléctrica podrían dar resultados limitados en la tasa de extracción de proteína [32,33]. Para superar esto, se aplicó el método de hidrólisis enzimática a la extracción de proteínas de mijo; sin embargo, la interacción fisicoquímica compleja entre los componentes proteicos y no proteicos podría contribuir al bajo contenido proteico de los aislados proteicos [34–37]. Tabla 2.Contenidos de proteína cruda (CP) y composiciones de aminoácidos (AA) de granos crudos, aislados de proteína (PI) y digesto de alimentos a base de cereales producidos por granos (DPG) o harinas (DPF) de mijo, cebada de tierras altas y trigo sarraceno (mg/g de peso seco). Mijo Crudo PI DPG 116,76± 1.88a 437,84± 84,78± 3,79b 107,74± 0,62a 92,89± 0,99b 2.40± 0,09a 3,94± 0,10a 4.27± 0,11b 5.71± 0,07a 3.09± 0,11a 2.23± 0,09a 5.66± 0,38a 11.40± 0,59a 6.20± 0,13a 2.19± 5.67± 2.06± 0,06b 3.71± 0,13a 4.20± 0,08b 4.02± 1.93± 0,05b 3.87± 0,15a 4.86± 0,07a 4.64± 0,02b 2,79± 0,03b 1.12± 0,04b 3.10± 0,07b 7.41± 0,15b 4.91± 0,13b 4.46± 0,03a 39.10± 0,45b 1.62± 0,12b 2.69± 0,13b 3.74± 0,14b 4.24± 0,16a 1.64± 0,12b 2.46± 0,14a 3,99± 0,06a 5.83± 0,02b 4.37± 0,08a 2,98± Granos CP1 Su El Tiro Val Conocí Cis Isla Leu fen Lis Total2 Áspid pegamento Ser Gly Argento Ala Pro Total3 TAA4 0,02do 47.10± 0,93a 7.64± 0,30b 21.31± 1.12a 5.17± 0,11a 2,78± 0,07do 6.57± 0,28a 8.83± 0,09a 7.63± 0,04a 59,94± 0,96a 107.03± 0,32a 3.32 0,17 13.27± 0,24 18,95± 0,95 20.20± 0,34 7.64± 0,12 3,55± 0,44 20.64± 0,58 41,52± 1.63 23.09± 1.02 6.86± 0,18 161.39± 2.07 32,89± 0,69 87,74± 0,73 18.13± 0,69 8.85± 0,23 29,87± 0,28 32,59± 0,42 30.20± 0,21 240.27± 2.19 401,66± 3.34 Alforfón Cebada de las tierras altas Crudo 0,09do 2.10± 0,07do 0,96± 0,05do 2,75± 0,07b 6.13± 0,08do 4.04± 0,07do 3,75± 0,07b 33,73± 0,22do 7.40± 0,19b 13,76± 0,35do 4.29± 0,12do 4.74± 0,06b 4.56± 0,28do 5.19± 0,25do 5.51± 0,06do 45,45± 0,51b 79,18± 0,71do Filtro de partículas diésel Granos 15,72± 0,25a 16.64± 0,62b 4.85± 0,12b 5.43± 0,05a 5.64± 0,05b 6.33± 0,11b 6.26± 0,05b 60,87± 0,60a 99,97± 0,72b PI DPG 932.14± 101.22± 5.51a 2.65 AA indispensable 16.81± 1,73± 1.07 0,03b 28.05± 4.08± 0,85 0,03a 45,89± 5.05± 0,64 0,09a 41.26± 4.67± 0,41 0,25a 11.28± 2.27± 0,51 0,03a 9.66± 0,70± 1.35 0,05b 38,82± 3.64± 0,78 0,08b 55,17± 6.25± 2.00 0,11a 46,55± 4.59± 0,58 0,19a 24.13± 4,78± 0,06do 0,38 0,06a 33,55± 317,62± 37,77± 0,86do 1.81 0,55a 6.32± 0,27b 22.02± 0,55a 3,50± 0,14do 3.09± 0,13do 5.31± 0,53desde 3.14± 0,12do 8.44± 0,41b 51,83± 0,08b 85.37± 0,92b AA prescindibles 66.22± 1.03 238,62± 6,74 36,56± 0,16 29,48± 0,39 56,69± 2.61 30,80± 0,70 94,97± 0,99 553.33± 8.62 870,95± 8.62 8.28± 0,39a 21.10± 1.22a 5.26± 0,15a 5.81± 0,28a 6.19± 0,30a 4.51± 0,09a 9.43± 0,30a 60,59± 2.53a 98.37± 2,77a Filtro de partículas diésel Crudo Granos PI DPG Filtro de partículas diésel 88.00± 121,19± 0,13a 895.21± 100,25± 0,79b 116,90± 0,64a 2.14± 0,11a 4.15± 0,20a 4.71± 0,26a 4.48± 0,25a 2.31± 0,01a 0,60± 0,03b 2,78± 2.68± 17.35± 2.18± 0,10b 4.38± 3.10± 0,17a 6.05± 0,15a 4.87± 0,10a 5.29± 0,31b 3,50± 0,13a 0,61± 0,05b 3.65± 0,05b 6.68± 0,19b 5,85± 0,21a 7.15± 0,21a 46,74± 0,51b 2,90do 0,15do 5.86± 0,21b 4.46± 0,03a 4.04± 0,06b 35,54± 0,84b 5.64± 0,12b 4.16± 0,13b 5.86± 0,03a 2.80± 0,17b 2.54± 0,20a 5.26± 0,12a 7.87± 0,12a 5.41± 0,18b 6.01± 0,07b 48.23± 0,87a 5.67± 0,29b 12.56± 0,56b 4.16± 0,15b 4.10± 0,08b 4,79± 0,26b 3.68± 0,18b 9.09± 14.10± 0,10a 23.08± 0,39a 5,79± 0,31b 6.16± 0,20a 7.91± 0,08b 4.88± 0,08a 3.92± 0,07do 0,13desde 44.06± 1.03do 79,60± 1,80do 1El CP se basó en un factor de conversión de N a proteína de 6,25. 0,37do 65,83± 0,16a 114.06± 0,98a 1.38 1,77 41,55± 1.63 33,74± 0,88 41,58± 1,80 10.33± 0,96 12.10± 0,93 42,42± 1.47 55,43± 1,95 44,83± 0,74 42,99± 0,74 342.32± 5.56 85.03± 3.58 190,63± 7.25 43,47± 1.44 40,96± 2.24 71,17± 2.86 30.22± 1.48 32,65± 1.06 494.12± 12.60 836,44± 14.27 0,22do 3,97± 0,25b 3,90± 0,02do 2.33± 0,04do 0,30± 0,02do 3.53± 0,12b 4.23± 0,13do 4.32± 0,05do 5.37± 0,03do 34,51± 0,25do 10,97± 0,90b 20,69± 1.38desde 5.35± 0,26b 6.42± 0,16a 7.27± 0,17do 3.51± 0,11b 4.61± 0,12b 58,81± 2.49b 93.32± 2.28do 10.23± 0,63b 20.27± 0,99b 6.86± 0,10a 6.67± 0,45a 8.47± 0,12a 4.30± 0,46a 5.58± 0,26a 62.38± 2.41desde 109.12± 2.29b 2Total, total combinado de AA indispensables, incluyendo histidina, treonina, tirosina, valina, metionina, cisteína, isoleucina, leucina, fenilalanina y lisina.3Total, total combinado de AA prescindibles, incluidos ácido aspártico, ácido glutámico, serina, glicina, arginina, alanina y prolina.4 TAA, total combinado de AA.C.AAA dentro de una fila en cada tipo de cereal con diferentes letras superíndices fue significativamente diferente (pag<0,05). Los valores de AA fueron medias.±SD (norte=3); los valores de CP fueron medias ±SD (norte=2). Como se presenta en la Tabla S1, el ácido glutámico fue el AA más abundante en los tres granos de cereales, con un contenido que osciló entre 18,3 y 23,7 g/100 g de proteína, mientras que los contenidos de His, Met y Cys fueron mínimos (por debajo de 2,9 g/100 g de proteína) en todos los cereales analizados, lo que estuvo de acuerdo con el de sus aislados proteicos. 7 de 15 Alimentos2023,12, 1714 Sin embargo, las composiciones de AA de los aislados proteicos fueron generalmente diferentes de las de los granos crudos cuando todos ellos se expresaron en ag por 100 g de proteína (Tabla S1). En el caso del mijo, los contenidos de Asp, Glu, Arg y Tyr en los aislados proteicos aumentaron (pag<0,05), mientras que los contenidos de Gly, His, Val, Met y Cys disminuyeron (pag<0,05). En cuanto a la cebada de altura, los aislados proteicos presentaron los mayores contenidos de Tyr, Phe, Glu y Pro (pag<0,05) y los contenidos más bajos de Met, Cys, Leu y Lys (pag<0,05). En el trigo sarraceno, los contenidos de Glu, Arg, Ile y Phe en los aislados proteicos aumentaron (pag<0,05), mientras que los contenidos de Asp, Ala, Met y Cys disminuyeron (pag<0,05). La variación máxima se observó en los contenidos de azufre AA (SAA, Met con Cys): una disminución en Cys (mijo, 1,91% frente a 0,81%; cebada de las tierras altas, 2,64% frente a 1,04%; y trigo sarraceno, 2,10% frente a 1,35%) y Met (mijo, 2,65% frente a 1,75%; cebada de las tierras altas, 1,76% frente a 1,21%; y trigo sarraceno, 2,31% frente a 1,15%) en comparación con los granos crudos (pag<0,01). Wang y col. [38] también encontraron una disminución en las concentraciones de SAA en los aislados de proteína de arroz, lo que podría atribuirse a la oxidación durante los tratamientos térmicos o alcalinos. Aunque los aislados proteicos tenían un mayor contenido de proteínas y un menor contenido de impurezas como glucosa, ácidos grasos y cenizas, la marcada reducción en el contenido de SAA puede afectar en gran medida el análisis de AA de los cereales. Por lo tanto, el análisis de AA de cereales crudos realizado en los granos crudos fue más preciso que el realizado en los aislados proteicos. 3.2. Efecto de los métodos de procesamiento en las composiciones de AA digestibles de tres cereales Mesa2muestra los contenidos de CP y AA de los granos crudos y su digestión a partir de PG (DPG) y PF (DPF). Los contenidos de CP de la digestión de alimentos a base de cereales fueron generalmente diferentes de los de los granos crudos. El contenido de CP más alto se observó en el DPF de trigo sarraceno (muestras de 116,90 mg/g), mientras que el DPG de mijo tuvo el contenido de CP más bajo (muestras de 84,78 mg/g) entre las digestión de alimentos a base de cereales. El glutamato monosódico fue el AA predominante en la digestión de alimentos a base de cereales (muestras de 12,56 a 21,10 mg/g), mientras que el cistositol presentó el contenido más bajo (muestras de 0,30 a 1,12 mg/g), que fueron consistentes con los granos crudos pero en cantidades diferentes. Han et al. [39] también encontraron que Glu tenía la concentración más alta de digestibilidad ileal verdadera (TID), mientras que Cys tenía la concentración más baja de TID en las dos variedades de mijo y trigo sarraceno en ratas en crecimiento. Cifra1muestra las composiciones comparativas de AA indispensables de los cereales crudos y su digestión (DPG y DPF) en base a g/100 g de proteína. Las composiciones de AA indispensables de la digestión de los alimentos a base de cereales fueron generalmente diferentes de las de sus cereales crudos. En general, en comparación con los cereales crudos, se observó una disminución significativa en los contenidos de Cys e Ile en la digestión de los alimentos a base de cereales (pag<0,01), mientras que se encontró un marcado aumento en el contenido de Lys (pag<0,01). Mientras tanto, los contenidos de algunos AA indispensables, como His, Thr y Val en las muestras de DPG fueron generalmente diferentes de los de las muestras de DPF (pag<0,01), lo que significa que las composiciones de AA digestibles de los cereales se vieron significativamente afectadas por el procesamiento. 3.3. Efecto de los métodos de procesamiento sobre la digestibilidad in vitro de proteínas de tres cereales Elin vitroLa digestibilidad de las proteínas de los alimentos a base de cereales con harina cruda como control determinada por el método Kjeldahl se muestra en la Figura2. En la fase gástrica, lain vitro La digestibilidad de las proteínas del mijo fue muy baja (12,6%) para la harina cruda; después del procesamiento, la digestibilidad se mantuvo sin cambios para PG o aumentó para PF (pag<0,01). Sin embargo, la digestibilidad de los alimentos a base de cereales producidos por cebada de las tierras altas y trigo sarraceno disminuyó significativamente (pag<0,001), y la digestibilidad de PG fue menor que la de PF (pag<0,01). Generalmente, elin vitroLa digestibilidad de las proteínas de los alimentos a base de cereales fue inferior al 20% en la fase gástrica, lo que coincidió con los informes de Gulati et al. [40] para el mijo proso cocido y Nunes et al. [41] para dos variedades de sorgo cocido, respectivamente. 8 de 15 Alimentos2023,12, 1714 Figura 1.Composición de aminoácidos de granos crudos y digestos de alimentos a base de cereales de (A) mijo, (B) cebada de las tierras altas y (do) trigo sarraceno.Izquierda:Cromatografías de 17 aminoácidos. Esto incluye 1, Glu; 2, Asp; 3, Ser; 4, Gly; 5, His; 6, Thr; 7, Arg; 8, Ala; 9, Pro; 10, Tyr; 11, Val; 12, Met; 13, Cys; 14, Isla; 15, Leu; 16, Fe; y 17, Lys.Bien: Contenido de aminoácidos indispensables, g/100 g de proteína. DPG, digestión gastrointestinal simulada de PG (granos cocidos) y DPF, digestión gastrointestinal simulada de PF (bollos de mijo al vapor, fideos de cebada de las tierras altas y fideos de trigo sarraceno, respectivamente). Los valores del contenido de aminoácidos indispensables fueron medias.±SD (norte=3) *pag<0,05, **pag<0,01, *** pag<0,001 comparación entre DPG, DPF y granos crudos, respectivamente;#pag<0,05,##pag<0,01,###pag< Comparación 0,001 entre DPG y DPF. En la fase intestinal, lain vitroLa digestibilidad de las proteínas de la harina cruda osciló entre el 37,9% (mijo) y el 70,0% (trigo sarraceno), que fue superior a la de los alimentos a base de cereales (pag<0,05). En general, el procesamiento térmico disminuyó la digestibilidad, mientras que la digestibilidad de PF fue generalmente mayor que la de PG (pag<0,01), lo que significa que el tratamiento de molienda mejoró la digestibilidad. El tratamiento de molienda puede romper las estructuras internas insolubles de la pared celular fibrosa, lo que hace que la proteína sea más vulnerable al ataque enzimático [42,43]. La digestibilidad de los alimentos a base de cebada de las tierras altas y de trigo sarraceno osciló entre el 42,0% y el 58,2%, mientras que la de los alimentos a base de mijo fue bastante baja (PG, 26,4%; PF, 33,9%). Según Mertz et al. [44], 9 de 15 Alimentos2023,12, 1714 La digestibilidad de las proteínas del mijo cocido también fue menor que la de otros cereales como el trigo o el maíz. Esto podría deberse a la formación de agregados proteicos hidrófobos y un complejo polifenol-proteína durante el calentamiento en agua [40,45]. Figura 2.In vitrodigestibilidad de proteínas en (A) gástrico y (B) fases intestinales de alimentos a base de cereales elaborados con mijo, cebada de las tierras altas y trigo sarraceno. PG, alimentos a base de cereales elaborados con granos (granos cocidos); PF, alimentos a base de cereales elaborados con harina (bollos de mijo al vapor, fideos de cebada de las tierras altas y fideos de trigo sarraceno, respectivamente). Diferentes letras en la parte superior de las barras (media±DAKOTA DEL SUR, norte=3) representan significativamente diferentes (pag<0,05). 3.4. Efecto de los métodos de procesamiento sobre la digestibilidad in vitro de los AA de tres cereales Elin vitroLa digestibilidad de los AA individuales en alimentos a base de cereales producidos con granos (PG) o harina (PF) determinada por HPLC se muestra en la Tabla3La digestibilidad intestinal de los AA totales (AAT) de PF fue mayor que la de PG, que mostró una tendencia similar a la basada en el nitrógeno total. Sin embargo, la digestibilidad de los AA individuales varió ampliamente dentro de un alimento. La digestibilidad de Cys (7,4–20,7%) e Ile (20,3–42,5%) fue la más baja entre todos los AA, mientras que la digestibilidad de Lys y Gly fue relativamente alta (Lys, 56,4–84,5%; Gly, 65,8–80,8%). Han et al. [39] informaron que la TID de Lys fue del 96,0%, mientras que la de Cys e Ile fueron del 66,3% y del 78,5%, respectivamente, en granos cocidos de mijo proso en ratas en crecimiento. Rafii et al. encontraron resultados similares. [9], quien afirmó que la Lys estaba altamente disponible (97%) en el arroz blanco pulido y cocido para humanos. Tabla 3.Digestibilidad intestinal (%) de aminoácidos (AA) en alimentos a base de cereales producidos a partir de granos (PG) o harinas (PF) de mijo, cebada de montaña y trigo sarraceno. Automóvil club británico Su El Tiro Val Conocí Cis Isla Leu fen Lis Total1 Áspid pegamento Ser Mijo Cebada de las tierras altas Alforfón Página PF Página PF Página 35,83±0,95do 39,28±1.34d 41.02±0,74d 29.41±0,72do 28.37±0,89F 17,93±0,87b 20.31±0,49d 22.44±0,25F 27.19±0,46F 71,54±1.30do 29,89±0,14d 33,25±0,81do 40,68±1.62d 47,19±0,86do 33,67±0,20do 37,44±0,41mi 20,77±0,73a 22,70±0,59do 26,95±0,63mi 32,83±0,95mi 84,46±0,48a 34.41±0,50do AA indispensable 44,17±1.09b 62,65±1.24b 55,65±2.16b 45.33±1.56b 57,15±1.91do 11.80±1.04d 37,69±1.08b 44.23±0,27do 43.30±1.03d 66,16±1.02d 46,42±0,58b 75,25±4.62a 87,51±3.19a 71.27±2,98a 59,72±2.56a 80.05±1.16a 13,88±0,75do 39,49±0,65b 56,98±1.33a 57,84±0,29b 77.04±2.08b 60.03±0,70a 51,44±2.57b 49.11±2.19do 60.30±4.10b 42.03±0,37b 52,52±0,77d 7.44±0,55mi 42,46±1.60a 33,94±1.01d 50,43±0,41do 56,43±0,49mi 45.21±0,58b 40.39±1.01d 26,96±0,65d 34,63±0,92mi 85.23±1,65a 32.36±1.21do 38,83±1.01d 54.03±1.35b 39,45±1.49b 61,90±0,59do 50,82±1,98b 32.30±1.08do 67.34±2.56b AA prescindibles 49,16±3.81antes de Cristo 56,61±3,50a 58.30±2.54do PF 70,42±5.62a 65,40±0,85b 71,43±3.13a 55.11±4.83a 76.01±1,65b 14.56±0,75do 42.35±1.44a 51,72±1,55b 65,96±4.38a 72,57±4.31antes de Cristo 59.10±2.46a 45.08±3.74cd 53,47±1.27a 72,16±2.54a 10 de 15 Alimentos2023,12, 1714 Tabla 3.Continuar. Automóvil club británico Gly Argento Ala Pro Total2 TAA3 Mijo Página PF 71.05±1.01cd 28,98±1,80mi 24.53±1.15d 30.17±0,31mi 31,65±0,29d 30,88±0,22mi 80,82±0,81a 35,58±0,22d 29,73±0,60d 34.00±0,21mi 42.09±0,51do 38,71±0,41d Cebada de las tierras altas Página PF AA prescindibles 77,48±2.19desde 75,20±1.46antes de Cristo 48.08±2,98do 59,27±1.25b 46.05±1.28d 48,17±0,92b 47,48±0,61do 51.05±2.37do 66,40±4.04a 61.05±0,61do 48,15±0,61b 52,82±0,54b Alforfón Página 65,83±1.66mi 58.07±1.56b 45,54±1.69do 74.34±1,77b 56,44±2.12a 51,69±1.03b PF 65,97±4.69Delaware 65,25±1.39a 53,72±5.53b 86,77±3,99a 57,95±2.29a 58,44±1,99a 1Total, la digestibilidad intestinal de los AA indispensables totales, calculada dividiendo el contenido de AA indispensables totales de la fracción digestible de las muestras por el de las materias primas.2Total, la digestibilidad intestinal de los AA totales dispensables, calculada dividiendo el contenido de AA totales dispensables de la fracción digestible de las muestras por el de las materias primas.3TAA, digestibilidad intestinal de los AA totales, calculada dividiendo el contenido de AA totales de la fracción digestible de las muestras por el de las materias primas. a–fLa digestibilidad intestinal dentro de una fila con diferentes letras en superíndice fue significativamente diferente (pag<0,05). Los valores fueron medias.±SD (norte=3). La digestibilidad de los AA individuales en PG fue menor o igual a la de PF, lo que significó que el tratamiento de molienda mejoró la digestibilidad de la mayoría de los AA. En el mijo, la digestibilidad de la mayoría de los AA en PG fue menor que en PF (pag<0,05) excepto His, Thr, Val, Pro y Ala. Con respecto a la cebada de las tierras altas, la digestibilidad de la mayoría de los AA en PG fue menor que en PF (pag< 0,05) excepto para Ile, Asp, Arg y Gly. Asimismo, para el trigo sarraceno la digestibilidad de la mayoría de los AA en PG fue menor que en PF (pag<0,05) excepto Asp, Glu, Ile y Gly. La digestibilidad de la mayoría de los AA (20,3%–47,2%) en el mijo fue menor que la de la cebada de las tierras altas (32,3%–87,5%) y el trigo sarraceno (33,9%–86,8%) (pag<0,05). Sin embargo, la digestibilidad de Cys, Lys, Asp y Gly en PF de mijo fue la más alta entre todos los alimentos a base de cereales. Han et al. [39] informaron que el TID de la mayoría de los AA en el mijo proso era menor que en el trigo sarraceno, excepto que el TID de Lys en el mijo proso era mayor que en el trigo sarraceno. 3.5. Efecto de los métodos de procesamiento sobre la DIAAS de tres cereales En la Tabla S2 se presentan los valores de AAS de los AA indispensables en los granos crudos de tres cereales. Los granos crudos de tres cereales tenían perfiles desequilibrados y el primer AA limitante fue la lisina, excepto que el trigo sarraceno no tiene AA limitante para niños mayores, adolescentes y adultos. Para el mijo, el primer AA limitante fue la lisina con 0,33 para niños de 6 meses a 3 años y 0,39 para niños mayores, adolescentes y adultos. Kalinova y Moudry [46] también encontraron que Lys es el primer AA limitante con 0,47 para el mijo común. En cuanto a la cebada de las tierras altas, el primer AA limitante fue Lys con 0,56 para los niños y 0,67 para los adultos. Bai et al. [47] también encontraron que Lys (0,61) es el primer AA limitante para la cebada de las tierras altas. Para el trigo sarraceno, el primer AA limitante fue Lys con 0,87 para niños y ninguno para adultos. El alto contenido de Lys para el trigo sarraceno (AAS, 0,96) también fue reportado por Motta et al. [ 48]. Mesa4muestra la relación de referencia de aminoácidos indispensables digestibles (DIAA) y la DIAAS de los alimentos a base de cereales. Los resultados muestran que las relaciones de referencia DIAA de los AA indispensables disminuyeron significativamente, y la mayoría de ellos estaban muy por debajo de 1 después del procesamiento y la digestión. El primer AA limitante fue Lys para los alimentos hechos con mijo y cebada de las tierras altas; sin embargo, el primer AA limitante fue Leu para los alimentos a base de trigo sarraceno. A pesar de que los valores DIAAS fueron diferentes con un patrón de referencia diferente, los valores DIAAS de PG fueron generalmente más bajos que los de PF en tres cereales (pag<0,01), lo que significa que los métodos de procesamiento tuvieron un efecto significativo en sus valores DIAAS. El valor más alto se observó para la cebada de las tierras altas para PG, mientras que para PF el valor más alto se observó para el trigo sarraceno. Los alimentos a base de mijo tuvieron los valores más bajos, ya sea en PG o en PF. Han et al. informaron un hallazgo similar. [39], donde indicaron que los valores de DIAAS de los granos cocidos de mijo fueron los más bajos entre nueve granos de cereales cocidos en ratas en crecimiento. Esto podría deberse a que la digestibilidad de la proteína y los AA individuales en el mijo fue menor que en la cebada de las tierras altas y el trigo sarraceno. 11 de 15 Alimentos2023,12, 1714 Tabla 4.Relación de referencia de aminoácidos indispensables digestibles (DIAA) y DIAAS de alimentos a base de cereales producidos a partir de granos (PG) o harinas (PF) de mijo, cebada de montaña y trigo sarraceno. Mijo Muestra Isla Leu Lis El Val Su Azufre AA Aromático AA DIÁS (%)1 Isla Leu Lis El Val Su Azufre AA Aromático AA DIÁS (%)1 Página PF 0,31 0,34 0,24 0,41 0,34 0,38 0,41 0,58 0,34 0,39 0,27 0,43 0,38 0,34 0,50 0,65 24 (Lis)F 0,33 0,37 0,28 0,54 0,37 0,47 0,48 0,73 28 (Lis)F Alforfón Cebada de las tierras altas Página PF Página Índice de referencia DIAA (niño (6 meses a 3 años)) 27 (Lis)mi 0,51 0,43 0,38 0,59 0,49 0,39 0,50 0,84 38 (Lis)do 0,53 0,54 0,43 0,81 0,63 0,65 0,66 1.07 43 (Lis)b 0,57 0,33 0,49 0,73 0,47 0,57 0,50 0,83 33 (leu)d Índice de referencia DIAA (niño mayor, adolescente, adulto) 0,36 0,42 0,32 0,59 0,40 0,42 0,59 0,83 32 (Lis)mi 0,55 0,46 0,45 0,74 0,53 0,49 0,58 1.06 45 (Lis)do 0,56 0,58 0,51 1.01 0,68 0,81 0,77 1.36 51 (Lis)b 0,61 0,36 0,58 0,91 0,50 0,71 0,59 1.05 36 (leu)d Patrón de referencia PF (mg/g de proteína) 0,58 0,52 0,64 0,99 0,63 0,79 0,77 1.05 32 66 57 31 43 20 27 52 0,62 0,56 0,76 1.23 0,67 0,99 0,91 1.33 30 61 48 25 40 16 23 41 52 (leu)a 56 (leu)a 1El primer AA limitante se encontraba entre paréntesis. Todos los valores de DIAAS (%) >100 indicaban que no había ningún AA limitante.a–fDIAAS (%) dentro de una fila con diferentes letras superíndices fue significativamente diferente (pag<0,05). Los valores fueron medias.±SD (norte=3). 4. Discusión Los cereales son la principal fuente de energía en la mayoría de las dietas consumidas por los seres humanos y contribuyen a los requerimientos de proteínas de los seres humanos, especialmente en los países en desarrollo [4,5]. Por lo tanto, la determinación de la calidad de la proteína en alimentos a base de cereales proporciona información importante para la formulación de dietas equilibradas. Generalmente, esto incluye una evaluación nutricional realizada en granos crudos o aislados de proteína. En 2014, Cervantes-Pahm et al. [31] determinaron los valores DIAAS de granos crudos de ocho cereales en cerdos en crecimiento. En 2016, Mota et al. [49] informaron los valores del puntaje de aminoácidos corregido por digestibilidad de proteínas (PDCAAS) de granos crudos de pseudocereales (quinua y amaranto). En 2018, Abelilla et al. [50] informaron los valores PDCAAS y DIAAS del concentrado de proteína de avena en cerdos en crecimiento. Sin embargo, los cereales generalmente se procesan utilizando granos o harina antes de ser consumidos; se necesitan más estudios para estimar el impacto de la preparación o el procesamiento de los alimentos en la calidad de las proteínas. Lo ideal es que la valoración nutricional de los alimentos se determineen vivo(en humanos o animales); sin embargo, estos estudios invasivos son costosos y plantean problemas éticos. Como resultado, in vitroSe han desarrollado modelos para superar estos desafíos y proporcionar una herramienta útil para predecir la calidad de las proteínas en humanos. El uso dein vitroLos modelos fueron apoyados por la FAO/OMS [10]. Para determinar los valores DIAAS de varios alimentos, utilizamos el protocolo estático INFOGEST [13], que implicó una digestión oral, gástrica e intestinal simulada. Después de la digestión, se podrían utilizar múltiples métodos para el tratamiento de la muestra, incluida la inactivación de proteasas y la eliminación de proteínas solubles. Para inhibir la tripsina y la quimotripsina, se agregó AEBSF (clorhidrato de fluoruro de 4-(2aminoetil) bencenosulfonilo) según lo informado por Sousa et al. en 2023 [17]. El tratamiento de choque térmico también se ha utilizado en los últimos años para inactivar irreversiblemente las proteasas, cuando no se tuvo en cuenta la evaluación de la actividad biológica [14]. La proteína soluble se eliminó a través de varios métodos, como la precipitación con ácido tricloroacético, que se ha utilizado comúnmente en los últimos años [25–27]. En nuestro estudio, utilizamos un tratamiento de choque térmico para inactivar las proteasas y la precipitación con ácido tricloroacético para eliminar las proteínas solubles, que se basaron en nuestros requisitos de análisis para determinar los valores de DIAAS. 12 de 15 Alimentos2023,12, 1714 En este estudio, los valores de DIAAS obtenidos para granos cocidos (PG) de mijo y trigo sarraceno fueron diferentes de los resultados informados por Han et al. [39,51] en modelos animales. El valor DIAAS obtenido para granos cocidos de mijo fue mayor que el informado por Han et al. [51], quienes indicaron que el valor DIAAS fue de 19 para los niños en cerdos en crecimiento. Además, el valor DIAAS obtenido para granos cocidos de trigo sarraceno fue menor que el informado por Han et al. [39] para niños en ratas en crecimiento. Sin embargo, los valores de DIAAS de los granos cocidos de trigo sarraceno fueron inferiores a los del mijo, lo que fue consistente con los resultados informados por Han et al. [39] en modelos animales pero con valores diferentes. La variación en los valores de DIAAS puede ser resultado de las diferencias entre losin vitromodelo de digestión y modelo porcino, la temperatura de cocción, las variedades de cereales y las condiciones de crecimiento de los cereales. Además, el valor DIAAS obtenido para granos cocidos de cebada de altura fue de 45, que fue inferior al resultado informado por Cervantes-Pahm et al. [31], quien indicó que el valor DIAAS obtenido para granos crudos de cebada descascarada fue de 51 en cerdos en crecimiento. La disminución del valor DIAAS podría deberse a la cocción, que dañó la digestibilidad de la proteína y de los AA individuales. Según el valor de corte de la DIAAS introducido en un informe de consulta de expertos de la FAO [10], sólo la avena descascarada se considera una buena fuente de proteínas para el consumo humano con un valor DIAAS de 77. Han et al. [39] consideraron que el trigo sarraceno y el trigo sarraceno tártaro son buenas fuentes potenciales de proteínas, porque sus DIAAS fueron de 68 y 47 después de ser cocinados utilizando granos, respectivamente. En este estudio, los valores DIAAS de PF fueron 43 para la cebada de las tierras altas y 52 para el trigo sarraceno. Es posible que la cebada de las tierras altas y el trigo sarraceno sean buenas fuentes de proteínas cuando se procesan moliéndolos antes de cocinarlos. 5. Conclusiones Este estudio evaluó la calidad de las proteínas de los alimentos a base de cereales en función de las composiciones de AA digestibles. Las composiciones de AA de los aislados de proteínas fueron generalmente diferentes de las de los granos crudos; especialmente, la marcada reducción en los contenidos de SAA puede afectar en gran medida el análisis de AA de los cereales. El tratamiento de cocción disminuyó lain vitrocalidad proteica de todos los cereales investigados. Con respecto a los métodos de procesamiento, el tratamiento de molienda generalmente mejoró la digestibilidad de la proteína y los AA individuales en los alimentos. La digestibilidad intestinal de los AA individuales dentro de un alimento varió ampliamente, y la digestibilidad de Cys e Ile fue la más baja entre todos los AA. La cebada de las tierras altas y el trigo sarraceno son las posibles buenas fuentes de proteína cuando se procesan moliendo antes de cocinarlos, debido a que el PF tiene altos valores de DIAAS. El primer AA limitante en los alimentos procesados fue consistente con el de los granos crudos (Lys) para el mijo y la cebada de las tierras altas, mientras que el primer AA limitante para el trigo sarraceno se convirtió en Leu en los alimentos procesados. Este estudio comparó las composiciones de aminoácidos antes y después del procesamiento de granos y la digestión gastrointestinal y destacó el impacto de los métodos de procesamiento en la calidad proteica de tres cereales. Sin embargo, la inclusión dein vitroLos modelos de absorción o los experimentos con animales en enfoques futuros pueden ayudar a dilucidar si estos hallazgos siguen siendo válidos en un escenario más realista. Materiales complementarios:La siguiente información de apoyo se puede descargar en:https://www.mdpi.com/article/ 10.3390/foods12081714/s1; Tabla S1: Composiciones de aminoácidos (AA) de granos crudos, aislados de proteínas (PI) y digesto de alimentos a base de cereales producidos utilizando granos (DPG) o harinas (DPF) de mijo, cebada de tierras altas y trigo sarraceno (g/100 g de proteína); Tabla S2: Puntuación de aminoácidos de granos crudos de mijo, cebada de tierras altas y trigo sarraceno. Contribuciones del autor:Metodología, LF; Análisis formal, LF; Investigación, LF; Recursos, BL; Curación de datos, LF; Redacción: borrador original, LF y SG; Redacción: revisión y edición, SG y BL; Visualización, LF; Supervisión, BL; Administración del proyecto, BL; Adquisición de fondos, BL Todos los autores han leído y aceptado la versión publicada del manuscrito. Fondos:El estudio fue apoyado por el Programa Nacional de Investigación y Desarrollo Clave de China, Investigación y demostración sobre la base científica de la composición nutricional de granos básicos y secundarios y tecnologías clave de aplicación y funcionalización de alimentos básicos (2017YFD0401202). 13 de 15 Alimentos2023,12, 1714 Declaración de disponibilidad de datos:Los conjuntos de datos generados para este estudio están disponibles a solicitud del autor correspondiente. Conflictos de intereses:Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses. Abreviaturas Página PF DPG alimentos a base de cereales elaborados a partir de granos alimentos a base de cereales elaborados a partir de harina digerida de PG Compendio de PF Filtro de partículas diésel Automóvil club británico CP AEA Días aminoácido proteína cruda Aminoácido azufrado, metionina con cisteína. Puntuación de aminoácidos indispensables digestibles, la relación de referencia DIAA más baja (%) de Agradecimiento especial digestibilidad ileal verdadera TAA aminoácidos totales Referencias 1. Yousaf, L.; Hou, DZ; Liaqat, H.; Shen, Q. Mijo: una revisión de sus cambios nutricionales y funcionales durante el procesamiento.Res. Alimentaria Int.2021,142, 110197. [Referencia cruzada] [PubMed] 2. Bonafaccia, G.; Marocchini, M.; Kreft, I. Composición y propiedades tecnológicas de la harina y el salvado de trigo sarraceno común y tartar. Química alimentaria.2003,80, 9–15. [Referencia cruzada] 3. Obadi, M.; Sun, J.; Xu, B. Cebada de las tierras altas: composición química, compuestos bioactivos, efectos sobre la salud y aplicaciones.Res. Alimentaria Int. 2021,140, 110065. [Referencia cruzada] [PubMed] 4. Poutanen, KS; Karlund, AO; Gómez-Gallego, C.; Johansson, director de fotografía; Scheers, Nuevo México; Marklinder, IM; Eriksen, Alaska; Silventoinen, PC; Nordlund, E.; Sozer, N.; et al. 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