PRACTICA DE BIOQUIMICA
1¿Cuál de las siguientes gráficas muestra los resultados de la velocidad de una reacción frente a la
concentración de sustrato para una enzima no-alostérica, en ausencia y en presencia de un inhibidor no
competitivo (los inhibidores no competitivos se unen a la enzima en un lugar diferente del centro activo)?
A. 1
B. 2
C. 3
D. 4
2- Esta gráfica representa la variación de la velocidad de reacción frente a la concentración del sustrato; la
razón por la que la curva alcanza una meseta y la velocidad no sigue aumentando para mayores
concentraciones de sustrato es porque:
3-
4ABCDE-
El centro activo del enzima está saturado de sustrato.
Hay un inhibidor competitivo presente
Hay un inhibidor no competitivo presente
La enzima alostérica está bloqueada en una conformación inactiva
Todo el sustrato ha sido convertido en producto
3- En la presencia de alcohol deshidrogenasa, la velocidad de reducción del acetaldehido a etanol
aumenta a medida que lo hace la concentración de acetaldehido. Eventualmente la velocidad de
reacción alcanza un máximo, donde posteriores aumentos de la concentración de acetaldehido no
tienen efecto. ¿Por qué?
ABCD-
Todas las moléculas de alcohol deshidrogenasa están unidas a moléculas de acetaldehido.
A altas concentraciones de acetaldehido, la energía de activación de la reacción desciende
La enzima ya no es específica para el acetaldehido
Para altas concentraciones de acetaldehido, el cambio en energía libre de la reacción disminuye.
4- Para estudiar la dependencia de la v frente a [S] de una reacción catalizada enzimáticamente, una
cantidad constante de enzima se adiciona a una serie de medios de reacción de 10 ml de volumen
conteniendo diferente [S]. Las velocidades iniciales de reacción se han determinado midiendo el
número de moles de producto formado por minuto, obteniéndose los siguientes resultados:
[S](moles/litro) 5 x 10-2
v0(µmoles/min.) 0,25
5 x 10-3
0,25
5 x 10-4
0,25
5 x 10-5
0,20
5 x 10-6
0,071
5 x 10-7
0,0096
Empléese el cálculo numérico para responder a las siguientes cuestiones:
a) ¿Cuál es la Vmax. para esta [E]?.
b) ¿Cuál es la Km de ésta enzima?.
5- La cinética de una enzima viene medida como función de la [S] en ausencia y presencia del inhibidor a
una [I]=10-4 M. A partir de los siguientes resultados:
[S]x10-5 M
v0 (µmoles/min.) sin I
v0 (µmoles/min.) con I
0,3
10,4
2,1
0,5
14,5
2,9
1
22,5
4,5
3
33,8
6,8
9
40,5
8,1
a) Representar 1/V0 frente a 1/[S].
b) Calcular Vmax. y Km en ausencia y presencia de inhibidor.
c) ¿Qué tipo de inhibición es esta?
6- ¿Qué información puede obtenerse a partir de una representación de Lineweaver-Burk cuando la recta
corta al eje X en –40 (mol/l)-1?
7- Calcular la Km y la Vmax sabiendo que la recta obtenida en una representación Lineweaver-Burk corta
al eje de ordenadas en 1/V = 5x103 (mol/min)-1 y la pendiente de la recta es 120 min/L.
8- Se han obtenido los siguientes resultados al estudiar los efectos del pH sobre la actividad de la
fosfatasa alcalina procedente de una muestra de hueso. Determinar a qué pH tiene la enzima una
afinidad mayor por el sustrato.
9- Al representar por el método de los dobles inversos la cinética de la enzima fosfatasa alcalina (en una
suspensión de 8 µg/ml) y en presencia de p-nitrofenil fosfato, se obtiene una recta que corta el eje de
ordenadas en 1/300 min/µmol, y una pendiente de 0,05 min/L.
Calcular:
a) Vmax;
b) Km
10- La actividad de una lipasa es inhibida por un ácido. Los resultados de velocidades para diferentes
concentraciones de sustrato en ausencia y presencia del ácido se muestran en la tabla. ¿Qué tipo de
inhibidor es? Calcular los parámetros cinéticos Km y Vmax.
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