RESUMEN Esta investigación se realizó en el Centro de
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UNIVERSIDAD DE CUENCA RESUMEN Esta investigación se realizó en el Centro de Diagnóstico de la Facultad de Ciencias Médicas, donde se determinó la frecuencia del subgrupo sanguíneo A1 durante el periodo de febrero a agosto de 2011. La población en estudio estuvo constituido por todos los donantes de sangre y pacientes de los grupos sanguíneos A y AB que acudieron al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana del Cantón Cuenca en un total de 200 muestras sanguíneas, donde no se efectuó diferenciación racial ni otras variantes infrecuentes del grupo sanguíneo A. Cabe resaltar que el sistema ABO se consideró como dato adicional. Las muestras fueron recolectadas tanto de pacientes externos como de donantes en el Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana, mediante la técnica de venopunción; la cantidad requerida fue de 3 a 5 ml de sangre recogida con anticoagulante, los cuales fueron procesados en el laboratorio clínico del Centro de Diagnóstico de la Facultad de Ciencias Médicas. Para la determinación del subgrupo sanguíneo se realizaron técnicas y procedimientos establecidos, con resultados satisfactorios de tipo semicuantitativo en la prueba directa en tubo. El 67% del total de personas investigadas pertenecen al sexo masculino y el 33% al sexo femenino. De acuerdo al tipo de sangre de las personas que participaron en el estudio, se encontró que el 93% pertenecen al grupo sanguíneo A+ y el 0.5% al grupo sanguíneo AB-. En relación al subgrupo sanguíneo A1 el 81% resultó positivo y el 19% negativo, los mismos que fueron relacionados con el grupo sanguíneo. Al relacionar el tipo de sangre con el subgrupo sanguíneo A1, se observó que el mayor número de casos se encontraron en el grupo sanguíneo A+, de los cuales el 93.8% son subgrupo A1 positivo y el 89.4% son subgrupo A1 negativo (p=0.679). AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 1 UNIVERSIDAD DE CUENCA No existe ninguna relación significativa entre sexo con el subgrupo A1 (p=0.185) ni con el tipo de sangre (p=0.679), en razón de que el grupo sanguíneo no se ve afectado por el sexo, edad, ni el tipo de paciente ya que cada persona nace con un tipo de sangre definido. Palabras claves: grupo sanguíneo, subgrupo sanguíneo A1. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 2 UNIVERSIDAD DE CUENCA ABSTRACT: This research was realized in Diagnostico´s Center of Ciencias's Faculty Medical where determined the frequency of the sanguine subgroup A1, during the period from February to August 2011. The population in study was constituted by all blood donors and patients of the blood groups A and AB that they attended to the Blood Bank of Ecuadorian Red Cross of Cuenca City in a total of 200 sanguine samples, where we do not realize racial differentiation neither others infrequent variants of the blood group A. Being necessary clearly the ABO system was considered as additional date. The samples were recollected mean while or out patients as donors in Blood Bank of Ecuadorian Red Cross mediating the technique of venipuncture the quantity requisite was of 3 to 5ml of blood picked up with anticoagulant, which was processed at the clinical Medical Laboratory of Diagnostico´s Center of Ciencias Faculty. To determination of sanguine subgroup we worked with technical and method established, with satisfactory results of semi-quantitative in the direct try in tube. The 67% of the total people investigation belong to the made sex and 33% of female sex. According to blood group of people who participate in the research we found that 93% belong to the blood group A+ and 0.5% al blood group AB-. In relation to the sanguine subgroup A1 the 81% was positive and 19% was negative, the some that related with blood group. When we relation the blood group with sanguine subgroup A1 we observed that major number of cases were found in the blood group A+, of which the 93.8% are sanguine subgroup A1 positive and the 89.4% are sanguine subgroup A1 negative (p=0.679). In conclusion do not exist relation between the sex with sanguine subgroup A1 (p=0.185) neither with sanguine blood, in reason of that blood group is not AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 3 UNIVERSIDAD DE CUENCA affected by sex, age neither patient type, because each person was born with a blood group definite. Key Words: blood group, sanguine subgroup A1. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 4 UNIVERSIDAD DE CUENCA INDICE CAPITULO I RESUMEN ABSTRACT 1. INTRODUCCIÓN 2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 3. JUSTIFICACIÓN CAPITULO II 4. MARCO TEÓRICO 4.1 GRUPO SANGUINEO 4.1.1 Descubrimiento 4.1.2 Concepto 4.1.3 Otros grupos sanguíneos 4.2 SISTEMA ABO 4.2.1 Introducción 4.2.2 Importancia 4.2.3 Antígenos del Sistema ABO 4.2.4 Bioquímica y Desarrollo de los Antígenos A,B y H 4.2.4.1 Precursores 4.2.4.2 Sustancia H y antígenos A, B 4.2.5 Estructura Antigénica 4.2.6 Anticuerpos Sanguíneos 4.2.7 Antígenos ABO Adquiridos 4.2.8 Herencia del Tipo ABO 4.2.9 Frecuencia 4.3 FACTOR Rh 4.3.1 Descubrimiento 4.3.2 Concepto 4.3.3 Herencia del Factor Rh AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 5 UNIVERSIDAD DE CUENCA 4.3.4 Compatibilidad Sanguínea 4.4 SUBGRUPOS SANGUINEOS DE A 4.4.1 Importancia 4.4.2 Otros Subgrupos de A CAPITULO III 5. OBJETIVOS 5.1 OBJETIVO GENERAL 5.2 OBFETIVOS ESPECÍFICOS CAPITULO IV 6. METODOLOGÍA 6.1 TIPO Y DISEÑO GENERAL DEL ESTUDIO 6.2 UNIVERSO 6.3 MUESTRA 6.4 CRITERIOS DE INCLUSION 6.5 CRITERIOS DE EXCLUSION 6.6 METODOS, TÉCNICAS Y PROCEDIMENTOS 6.6.1 PRIMER OBJETIVO 6.6.2 SEGUNDO OBJETIVO 6.6.3 TERCER OBJETIVO 6.7 CONTROL DE CALIDAD 6.8 PLAN DE ANALISIS DE LOS RESULTADOS CAPITULO V 7. ANALISIS DE LOS RESULTADOS CAPITULO VI 8. DISCUSIÓN 9. CONCLUSIONES AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 6 UNIVERSIDAD DE CUENCA 10. RECOMENDACIONES 11. BIBLIOGRAFÍA CAPITULO VII 12. ANEXOS ANEXO No 1 CONSENTIMENTO INFORMADO ANEXO No 2 CONSENTIMENTO INFORMADO (menores de edad) ANEXO No 3 TARJETA DE RESULTADOS ANEXO No 4 RECURSOS HUMANOS y MATERIALES ANEXO No 5 CONTROL DE CALIDAD… ANEXO No 6 TRIPTICO ANEXO Nº 7 FOTOS AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 7 UNIVERSIDAD DE CUENCA UNIVERSIDAD DE CUENCA FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS ESCUELA DE TECNOLOGÍA MÉDICA AREA DE LABORATORIO CLÍNICO FRECUENCIA DEL SUBGRUPO SANGUÍNEO A1 EN LOS PACIENTES QUE ACUDEN AL BANCO DE SANGRE DE LA CRUZ ROJA ECUATORIANA CUENCA - ECUADOR 2011. TESIS PREVIA A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE LICENCIADA EN LABORATORIO CLÍNICO AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. DIRECTORA: DRA. MARÍA ÁLVAREZ HERRERA. ASESORA: DRA. MARTHA TORRES. CUENCA – ECUADOR 2011 AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 8 UNIVERSIDAD DE CUENCA RESPONSABILIDAD Los criterios vertidos en el presente trabajo investigativo son de responsabilidad de las siguientes autoras. ------------------------------------------MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA ---------------------------------------------MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 9 UNIVERSIDAD DE CUENCA AGRADECIMIENTO Doy gracias a Dios en primer lugar porque él me ha dado la vida, sabiduría y la inteligencia suficiente para llegar a la culminación de este escalón. Por toda la confianza y el apoyo brindado antes y durante la realización de esta tesis quiero agradecer a mis padres Zoila y Estuardo que han sido los pilares fundamentales para llegar hasta donde estoy. Por el amor y la paciencia dada por parte de mi esposo y mi bebé, también quiero agradecerles ya que ellos han sido la fuerza para lograr este objetivo cumplido. Y también quiero agradecer a mi Directora y Asesora de tesis, quienes han dedicado su tiempo y brindado sus conocimientos para culminar la misma. María Belén Gordillo S. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 10 UNIVERSIDAD DE CUENCA DEDICATORIA Está tesis la quiero dedicar a mis padres por el apoyo incondicional y el amor brindado cada día. A mi esposo que es mi ayuda idónea en todo momento, a mi nena preciosa que se ha convertido en mi razón de ser. Y a todas las personas que de una u otra manera aportaron para la realización de la misma. María Belén Gordillo S. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 11 UNIVERSIDAD DE CUENCA AGRADECIMIENTO Quiero comenzar dando gracias a Dios principalmente, por haberme concebido la vida y la salud necesaria para haber alcanzado este objetivo. Agradecer a mis profesores, quienes a través de estos años me han ido forjando y trasmitiéndome sus conocimientos para poder llegar a ser una excelente profesional. De una manera muy especial a la Dra. María Álvarez y Dra. Marta Torres quienes contribuyeron con su tiempo y dedicación para el desarrollo de esta tesis. Igualmente a todos mis amigos con los que he compartido esta etapa de mi vida. María de Lourdes Guzñay B. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 12 UNIVERSIDAD DE CUENCA DEDICATORIA La culminación de este proyecto la dedico con todo mi amor y cariño a mis padres María y Bolívar, quienes a través de este tiempo pudieron brindarme su apoyo moral y económico; y enseñarme que para poder triunfar en la vida es necesario esfuerzo y dedicación en los objetivos que me he planteado. A mis hermanos Fernando y Diana por haber compartido las alegrías y tristezas de mi vida. María de Lourdes Guzñay B. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 13 UNIVERSIDAD DE CUENCA CAPÍTULO I 1.- INTRODUCCIÓN Es un hecho de vital importancia que cada individuo conozca su tipo de sangre, no menos importante es conocer la distribución porcentual del subgrupo sanguíneo en nuestra sociedad y el presente trabajo destaca tal distribución en los pacientes que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana del Cantón Cuenca. Como el tipo de sangre está dado por la presencia de aglutinógenos en los glóbulos rojos, el grupo A integra moléculas con estas variaciones dando origen a los subgrupos A1, A2 y otros; por tanto reconocer subgrupos sanguíneos como los del grupo A, que pueden dar aglutinación negativa o muy débil con Anti-A y por tanto interpretarse como O, resulta peligroso sobre todo si son células del donador más aun si se transfundiera sangre A 1 en un paciente A2. Con esta determinación se está inmunizando al paciente transfundido y en una segunda transfusión puede reaccionar con anticuerpos dirigidos contra las determinantes antigénicos propias de A1 que no están en los eritrocitos A2 con consecuencias fatales. (1) La falta de conocimiento sobre los subgrupos llevan consigo riesgos para la salud como en las transfusiones de sangre entre grupos incompatibles pudiendo provocar una reacción inmunológica que puede desembocar en hemolisis, anemia, fallo renal, shock e incluso la muerte. Este estudio de carácter descriptivo tuvo como propósito determinar la frecuencia del subgrupo sanguíneo A1, se trabajó con una muestra conformada por 200 pacientes del grupo sanguíneo A y AB que acudieron al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana, a los mismos que mediante una punción capilar y venosa se obtuvo la muestra a ser analizada y se determinó el tipo de grupo sanguíneo y el subgrupo al que pertenecen. Las variables de edad, lugar de procedencia y otras no son consideradas de importancia ya que los grupos sanguíneos están presentes desde el nacimiento. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 14 UNIVERSIDAD DE CUENCA La mayoría de laboratorios clínicos cumplen un papel importante en la determinación del sistema ABO por ser el más conocido, pero también es necesario llegar a la identificación de los subgrupos sanguíneos ya que en la actualidad se puede contar con los reactivos necesarios. El uso de técnicas adecuadas, personal capacitado y controles de calidad son necesarios para obtener resultados veraces y confiables. 2.- PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Un grupo sanguíneo es una clasificación de la sangre de acuerdo con las características presentes o no en la superficie de los glóbulos rojos y en el suero de la sangre. Las dos clasificaciones más importantes para describir grupos sanguíneos en humanos son los antígenos del sistema ABO y el factor Rh. (2) El sistema ABO fue descubierto por Karl Landsteiner en 1901, en donde se ha descrito cuatro combinaciones esenciales de hematíes y plasma, que definen los cuatro grupos sanguíneos que se conocen con las letras O, A, B y AB. En cada uno de los grupos descubiertos, los hematíes tienen en su superficie una sustancia (antígeno), que es diferente en cada grupo. El grupo A tiene el antígeno A, el grupo B tiene el antígeno B, el grupo AB tiene los dos antígenos y el grupo O no tiene antígeno. (3) La determinación de grupos y subgrupos sanguíneos son necesarios para conocer el tipo de sangre al momento de someterse a una transfusión o a un trasplante, debido a que no todos los tipos de sangre son compatibles entre sí. Trabajos de investigación realizados en la Habana Cuba, mediante un estudio realizado en 1301 muestras reportan los siguientes datos: 703 O (54,04 %); 468 A (35,97 %); 106 B (8,15 %); 18 A1B (1,38 %) y 6 A2B (0,46 %). Las muestras A se subdividieron en: 346 A1 (73,93 %); 82 A2 (17,52 %) y 40 Amt (8,55 %). Entonces el reconocimiento de subgrupos débiles del grupo A reviste importancia en la práctica forense y en el estudio de la dinámica de poblaciones. (4) AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 15 UNIVERSIDAD DE CUENCA En Costa Rica, se investigó en el Laboratorio de Ciencias Forenses y en los principales Bancos de Sangre del país los subgrupos de A en 1000 muestras de sangre, reportándose: A (897) y AB (103). La proporción de los subgrupos, fueron las siguientes: A1 884 (88.4%), Aint 79 (7.9%), A2 36 (3.6%), A3 1 (0.1%). (5) En Bolivia La Paz, se estudiaron los grupos sanguíneos de 720 pacientes de ambos sexos pertenecientes a una clase socio-económica media y alta, de origen mestizo y blanco. El estudio se llevó a cabo desde el primero de enero al 31 de diciembre de 1999 en donde se obtuvieron los siguientes resultados: 402 O (55.83%), 234 A (32.52%), 76 B (10.55%), 8 AB (1.1%). (6) En Ecuador en la ciudad de Cuenca, en el Banco de Sangre en el año 2010 se realizaron tipificaciones sanguíneas a 21.599 pacientes de los cuales 15916 son O+ (73.69%); 411 O- (1.90%); 3521 A+ (16.30%); 146 A- (0.67%); 1365 B+ (6.32%); 45 B- (0.21%); 187 AB+ (0.87%) y AB- 8 (0.04%). (7) No se han realizados estudios en nuestro medio de subgrupos “A” o “AB”, de ahí la importancia de este trabajo de investigación que nos ayudará a establecer tan importantes parámetros en una población seleccionada. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 16 UNIVERSIDAD DE CUENCA 3.- JUSTIFICACIÓN Este trabajo de investigación brindará un aporte a la sociedad ya que permite conocer los porcentajes de grupos y subgrupos sanguíneos de los pacientes que acuden a la Cruz Roja Ecuatoriana del Cantón Cuenca, pues en la actualidad no se han realizado estudios sobre este tema y los resultados obtenidos ayudarán a los pacientes a conocer no solo su grupo sanguíneo sino también al subgrupo al que pertenecen; y así saber con certeza ¿qué tipo de sangre pueden recibir o donar?, sin problemas de incompatibilidad que conllevan a riesgos para su salud. Es importante reconocer que la población asignada para este estudio son de diferentes edades, resaltando sobre todo a las futuras madres y a personas que en algún momento lleguen a donar o recibir sangre y mediante este trabajo deseamos además transmitir la información necesaria sobre estos problemas de incompatibilidad sanguínea que pueden presentarse al momento de ser receptores en una transfusión. Las técnicas utilizadas para la determinación de los grupos y subgrupos sanguíneos no implican solamente seguir los procesos a cabalidad, sino también el conocimiento y las destrezas del operador, razón por la cual mediante esta investigación tendremos la oportunidad de adquirir conocimientos nuevos y reducir errores en el trabajo de laboratorio utilizando adecuados controles de calidad, que permitan entregar resultados veraces y confiables. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 17 UNIVERSIDAD DE CUENCA CAPÍTULO II 4.- MARCO TEORICO 4.1 GRUPOS SANGUÍNEOS 4.1.1 DESCUBRIMIENTO La posibilidad de trasfundir sangre de un individuo a otro, quizás fue seriamente discutida por primera vez en la primera mitad del siglo XVII, aunque ya desde un tiempo más antiguo se había pensado en los poderes vitales de la sangre y en su capacidad rejuvenecedora. Dice la historia, por ejemplo, que los egipcios tomaban baños de sangre y algunas enfermedades se trataban con la ingestión de sangre de animales. La era fisiológica de la historia de la transfusión sanguínea comenzó con el descubrimiento de la circulación de la sangre por Harvey en 1616. Los primeros experimentos fueron hechos con transfusiones homólogas entre animales y en 1667 se efectuó la primera transfusión en un humano al cual se le inyectaron 9 onzas de sangre de carnero. Después de los primeros accidentes y del descrédito del procedimiento, hubo un receso de casi 150 años en que no hubo ningún avance en la transfusión de sangre. En 1818 James Blundell, obstetra y fisiólogo inglés, hizo la primera transfusión de hombre a hombre y para 1875 ya se habían hecho unas 350 transfusiones en humanos. (8) Karl Landsteiner, médico austriaco, enseñaba entonces anatomía patológica en la Universidad de Viena. Uno de sus campos de investigación fue la genética de la sangre humana que comparó con la de los simios. Landsteiner observó que al mezclar la sangre de dos personas había ocasiones en que los glóbulos rojos se aglutinaban formando grumos visibles. Analizó la sangre de un total de 22 personas, incluyendo la suya y la de cinco colaboradores de su laboratorio, para lo cual procedía a separar el suero de la AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 18 UNIVERSIDAD DE CUENCA sangre total, lavaba después los glóbulos rojos y los sumergía en una solución de suero salino fisiológico. A continuación ensayaba cada suero con los diferentes glóbulos rojos obtenidos y finalmente tabulaba los resultados. Llegó así a descubrir tres tipos distintos de hematíes, denominados A, B y O, que daban lugar a reacciones de aglutinación. Estos hallazgos los realizó en Viena hacia 1901. Dos años más tarde, dos discípulos suyos, Alfredo de Castello y Adriano Sturli, analizando 155 muestras (de 121 pacientes y 34 controles sanos), descubren un cuarto grupo, al que llaman AB, sin poder aglutinante. (8) Gracias a sus trabajos pioneros en inmunohematología se estableció la compatibilidad sanguínea entre las distintas sangres de los seres humanos. El descubrimiento de los grupos sanguíneos por Karl Landsteiner, del que ahora se cumple el primer centenario, facilitó la labor de la justicia al permitir los análisis periciales en casos de litigio de paternidad y lo que es más importante, hizo posible las transfusiones sanguíneas seguras basadas en criterios científicos, evitando los temibles accidentes postransfusionales (hemólisis o destrucción de los glóbulos rojos y lesiones renales) por la falta de compatibilidad sanguínea. (9) 4.1.2 CONCEPTO Es el conjunto de antígenos genéticamente determinados, que se encuentran presentes en la superficie de la membrana de las células sanguíneas y que pueden producir, con una transfusión o con el embarazo una inmunización. (10) 4.1.3 OTROS GRUPOS SANGUÍNEOS Existen actualmente 30 grupos sanguíneos reconocidos por la Sociedad Internacional de Transfusión de Sangre (ISBT), clasificados por letras como, por ejemplo M, N, S y P descrito en 1927 por Landsteiner y Le- vine, hay otros conocidos por el nombre de las personas en las que se identificaron los AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 19 UNIVERSIDAD DE CUENCA anticuerpos por primera vez (Kell, Duffy, Diego,etc.), los cuales, aunque de interés genético y antropológico, pueden influir en el aspecto transfusional. (11) 4.2 SISTEMA ABO 4.2.1 INTRODUCCIÓN El sistema ABO fue el primer grupo sanguíneo descubierto por Landsteiner, su nombre proviene de los tres tipos de grupos que se identifican: los de antígeno A, de antígeno B, y "O". Landsteiner demostró que los glóbulos rojos contenían por lo menos dos factores, designados como aglutinógenos A y B, con los cuales se podía explicar los cuatro grupos que existían y así postuló que cada persona podía tener uno de ellos (A o B), ambos (AB) o ninguno (O). (12) Gráfico Nº 1 SISTEMA ABO Fuente Nº 11 AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 20 UNIVERSIDAD DE CUENCA 4.2.2 IMPORTANCIA Cada individuo posee un conjunto diferente de antígenos eritrocitarios; existen en la actualidad cerca de 27 sistemas antigénicos conocidos, más algunos antígenos diferenciados que aún no han sido atribuidos a ningún sistema específico. Es difícil encontrar dos individuos con la misma composición antigénica; de ahí la posibilidad, de la presencia en el suero de anticuerpos específicos (dirigidos contra los antígenos que cada individuo no posee), lo que resulta en aglutinación o hemólisis cuando ocurre una transfusión incompatible. Diferentes sistemas antigénicos se caracterizan por inducir a la formación de anticuerpos en intensidades diferentes; por lo que algunos son más comunes y otros, más raros. (25) La determinación de los grupos sanguíneos tiene importancia en varias ciencias: En Hemoterapia, se vuelve necesario estudiar al menos alguno de estos sistemas en cada individuo para garantizar el éxito de las transfusiones. Así, antes de toda transfusión, es necesario determinar, al menos el tipo ABO y Rh del donador y del receptor. En Ginecología/Obstetricia, se puede diagnosticar DHRN a través de su estudio, adoptándose medidas preventivas y curativas. En Antropología, se puede estudiar diversas razas y sus interrelaciones evolutivas, a través del análisis de la distribución poblacional de los diversos antígenos, determinando su predominancia en cada raza humana y haciéndose comparaciones. (12) 4.2.3 ANTIGENOS DEL SISTEMA ABO Así, ha quedado establecido que los antígenos del sistema ABO son los únicos para los cuales existe el correspondiente anticuerpo, siendo ello una característica constante y predecible en el suero de individuos normales. (13) Grupo A: en la membrana plasmática de los glóbulos rojos posee aglutinógenos A y en el plasma, aglutininas anti B (contra el aglutinógeno B). AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 21 UNIVERSIDAD DE CUENCA Grupo B: con aglutinógenos B en los eritrocitos y aglutininas anti A (contra el aglutinógeno A) en el plasma sanguíneo. Grupo O: este grupo carece de aglutinógenos en la superficie de sus eritrocitos y en el plasma contiene dos tipos de aglutininas, las anti A y las anti B (contra ambos tipos de aglutinógenos). Grupo AB: a diferencia del grupo O, el grupo AB posee los dos aglutinógenos A y B en las membranas plasmáticas de los glóbulos rojos, pero carece de aglutininas plasmáticas. (14) Gráfico Nº 2 ANTÍGENOS Y ANTICUERPOS DEL SISTEMA ABO Grupos Antígenos Anticuerpos Genotipo sanguíneos 0 H Anti-A, B OO A A Anti-B AO-AA B B Anti-A BO-BB AB AyB Ninguno AB Fuente Nº 15 Modificado por las autoras. 4.2.4 BIOQUÍMICA Y DESARROLLO DE LOS ANTÍGENOS A, B YH Los antígenos A, B y H de los hematíes son glicoproteínas o glucolípidos; sin embargo, algunos autores consideran que las sustancias de los grupos sanguíneos son glucolípidos sobre los eritrocitos, pero estos aparecen como glucoproteínas en la forma secretoria que se encuentra en los líquidos orgánicos. La especificidad antigénica está determinada por los glúcidos en los extremos no reductores del componente hidrato AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. de carbono. Los principales 22 UNIVERSIDAD DE CUENCA determinantes estructurales de la especificidad de los grupos H, A y B son los siguientes: H: alfa - L - fucosa A: alfa - N - acetilgalactosamina B: alfa - D – galactosa Los productos primarios del gen del locus de grupo sanguíneo son glucosil transferasas, que dirigen el agregado de las unidades de glúcidos adecuadas a los sustratos aceptores preformados. Las enzimas son específicas, no sólo para el tipo de glúcido agregado, sino también para el sustrato y el tipo de unión. (16) 4.2.4.1 Precursores Existen dos tipos posibles de sustancias para los antígenos A, B, H: Tipo I y Tipo II. Ambos constan de azúcares idénticos, pero la unión de los mismos en el extremo terminal es diferente. El precursor Tipo I, tiene una galactosa terminal unida a una Nacetilglucosamina subterminal por una unión 1 – 3. En el precursor Tipo II, este enlace es 1 – 4. El gen H codifica para la producción de alfa-L-fucosiltransferasa que cataliza la adición de L-fucosa, el aminoazúcar dominante del antígeno H, a dos estructuras ligeramente diferentes conocidas como cadenas precursoras 1 y 2. (16) AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 23 UNIVERSIDAD DE CUENCA Gráfico Nº 3 PRECURSORES DE LOS ANTÍGENOS Fuente Nº 16 4.2.4.2 Sustancia H y antígenos A, B La sustancia H se forma por adición de una fucosa a la galactosa terminal. Si la cadena es de tipo I, se forma H tipo I y si es de tipo II, la estructura se denomina H de tipo II. Gráfico Nº 4 SUSTANCIAS H Fuente Nº 16 Fuente Nº 16 Una vez que actúa el gen H, las enzimas codificadas por los genes A y B, pueden añadir los monosacáridos correspondientes (que dan especificidad) a las cadenas H preformadas. Las enzimas transferasas son los productos de los genes A y B. La substancia precursora está constituida por AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. glucosa-galactosa-Nacetilglucosamina- 24 UNIVERSIDAD DE CUENCA galactosa. En la substancia H existe una L-fucosa insertada en la D-galactosa terminal, la L-fucosa es el azúcar inmunodominante. En la substancia A el azúcar inmunodominante en la N-acetil D-galactosamina insertada en la D-galactosa terminal; en la B es D-galactosa-insertada en la Dgalactosa terminal. (26) Gráfico Nº 5 ESTRUCTURA DE LOS ANTÍGENOS A Y B Fuente Nº 16 4.2.5 ESTRUCTURA ANTIGÉNICA Los antígenos del grupo ABO son de naturaleza hidrocarbonada. Los determinantes antigénicos de los antígenos A, B y 0 son azúcares terminales de cadenas de oligosacáridos ancladas en glucoproteínas o glucolípidos de la membrana eritrocitaria. Los antígenos A y B difieren solo en el azúcar terminal del oligosacárido. El antígeno A se caracteriza por un residuo N-acetilgalactosamina en posición terminal, mientras que el antígeno B se caracteriza por un residuo terminal de galactosa. El fenotipo 0 ocurre cuando no hay azúcares terminales propios del A y del B. La sustancia precursora, a la cual se añaden los residuos azucarados propios del A y B, se llama sustancia H. La sustancia H también tiene poder antigénico caracterizado por una fucosa, unida de forma covalente al azúcar subterminal AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 25 UNIVERSIDAD DE CUENCA (una galactosa), a la cual también se unen los residuos propios del A y B si están presentes. Las personas del grupo A añaden una N-acetilgalactosamina a la sustancia H para generar el epítope A, y las del grupo B añaden una galactosa a la sustancia H para generar el epitope B. Las del grupo 0 no añaden ningún azúcar a la sustancia H, y por lo tanto expresan el antígeno H, pero no el A o el B. (17) Los genes del grupo ABO intervienen en la codificación de las glucosiltransferasas que catalizan la adicción de los azucares terminales específicos en el oligosacárido precursor, no en la generación de la sustancia antigénica en sí. Hay dos copias o alelos de cada gen, correspondientes a cada par de cromosomas. Los genes que codifican las glucosíltransferasas están en el cromosoma 9 (9q34.1-q34.2) mientras que el gen que codifica la H fucosiltransferasa está en el cromosoma 19. (21) 4.2.6 ANTICUERPOS SANGUÍNEOS La mayoría de las pruebas serológicas en inmunohematología dependen de reacciones entre antígenos en los glóbulos rojos y anticuerpos en el suero. Los anticuerpos sanguíneos son usualmente Ig G y/o IgM y en casos raros IgA. La capacidad de fijar complemento por algunos de estos anticuerpos es también importante para el entendimiento de algunos fenómenos in vitro e in vivo. Usualmente los anticuerpos IgG tienen mayor significado clínico y en Enfermedad Hemolítica del recién nacido son los anticuerpos IgG los responsables de la enfermedad. Por otro lado, reacciones hemolíticas transfusionales causadas por anticuerpos IgM con fijación de complemento pueden causar hemolisis intravascular severa (ej. Incompatibilidad de grupo ABO) y reacciones transfusionales hemolíticas causadas por anticuerpos IgG pueden causar hemólisis extravascular y reacción menos severa (Ejemplo la incompatibilidad Rh). (8) 4.2.7 ANTIGENOS ABO ADQUIRIDOS AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 26 UNIVERSIDAD DE CUENCA En algunas situaciones como en carcinoma, infecciones gastrointestinales u otras como en personas de grupos A u O puede ocurrir adquisición de "antígeno B", el mismo que desaparece cuando el proceso patológico ha concluido. Esta anormalidad puede crear problemas en el tipiaje ABO. (8) 4.2.8 HERENCIA DEL TIPO ABO Este tipo de herencia está controlado por un solo gen con tres alelos: O (SIN, por no poseer los antígenos ni del grupo A ni del grupo B), A y B. El alelo A da tipos A, el B da tipos B y el alelo O da tipos O, siendo A y B alelos dominantes sobre O. Así, las personas que heredan dos alelos OO tienen tipo O; AA o AO dan lugar a tipos A; y BB o BO dan lugar a tipos B. Las personas AB tienen ambos genotipos debido a que la relación entre los alelos A y B es de codominancia. Por tanto, es imposible para un progenitor AB, tener un hijo con tipo O, a excepción de que se de un fenómeno poco común conocido como "fenotipo Bombay" o diversas formas de mutación genética relativamente extrañas. (12) 4.2.9 FRECUENCIA En 1914, Hirszfeld señaló que el sistema ABO tenía una distribución variable en los diferentes grupos étnicos y desde entonces, múltiples estudios que se han realizado y publicado en cada parte del mundo, señalan su importancia como marcadores genéticos y antropológicos. Para el Banco de Sangre es importante conocer la distribución de los grupos sanguíneos en la población general, con el fin de establecer las reservas de sangre que de cada grupo se deben mantener y poder atender de manera eficiente las demandas que se presenten. (13) AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 27 UNIVERSIDAD DE CUENCA Gráfico Nº 6 DISTRIBUCIÓN MUNDIAL DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS Fuente Nº 18 Modificado por las autoras. 4.3 FACTOR RH 4.3.1 DESCUBRIMIENTO El diminutivo "Rh" es usado para abreviar la palabra rhesus, la cual significa mono en griego. Su origen se encuentra en 1940, cuando Karl Landsteiner junto con Alexander Solomon Wiener, descubrieron un antígeno en los hematíes al que bautizaron como factor Rh, al haber sido hallado en el suero de conejos inmunizados con sangre procedente de un mono de la India de la especie Macacus rhesus. (19) 4.3.2 CONCEPTO El factor Rh es una proteína integral de la membrana aglutinógena que está presente en todas las células. Un 85% de la población tiene en esa proteína una estructura dominante, que corresponde a una determinada secuencia de aminoácidos que en lenguaje común son denominados habitualmente Rh+. Tener Rh- significa que se tiene la misma proteína pero con modificaciones en ciertos aminoácidos que determinan diferencias significativas en la superficie AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 28 UNIVERSIDAD DE CUENCA de los glóbulos rojos, y hacen a los humanos Rh- disponer de anticuerpos (aglutininas) en el plasma que reaccionan con los glóbulos rojos Rh+. Existe la posibilidad del Rh nulo (Rh null), rarísimo; esta sangre no reacciona con ninguno de los antisueros Rh descritos y puede considerarse como ausencia de estos antígenos en los eritrocitos de la persona. (19) 4.3.3 HERENCIA DEL FACTOR RH El antígeno D posee la mayor capacidad antigénica. Los genes responsables de este sistema se localizan en el cromosoma 1. Existen dos teorías sobre el control genético: Teoría de Fisher: Tres genes C, D, E (presentan antígeno D aquellas combinaciones que contengan el alelo D como por ejemplo cDe.). Teoría de Wiener: En determinados casos se expresa un antígeno D débil Du (rh-) como consecuencia de: 1. La represión del gen D por un gen C en posición trans (cromosoma opuesto). 2. La existencia de un alelo Du. 3. La formación de un antígeno D incompleto. En 1986 Tippet, emite la teoría de la existencia de dos genes RHD y RHCD, que fueron secuenciados en 1990 por Colin y colaboradores. La enfermedad del Rh es provocada por una madre Rh- que concibe un hijo Rh+. Los anticuerpos de la sangre materna destruyen el Rh+ del bebé. Si la madre piensa tener un segundo hijo debe aplicarse una vacuna que elimina los anti-Rh, que químicamente es una gammainmunoglobulina, la misma que debe ser aplicada dentro de las 72 horas después del primer parto, ya que si se tiene AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 29 UNIVERSIDAD DE CUENCA un segundo bebé con Rh+ la madre producirá anti-Rh en exceso que destruirá la sangre del hijo, produciendo la enfermedad llamada Eritroblastosis fetal (anemia severa), en otros casos por la producción en exceso de los anti-Rh, el hijo puede morir intrauterinamente. (19) Gráfico Nº 7 EJEMPLO DE HERENCIA DEL FACTOR RH Fuente Nº 19 4.3.4 COMPATIBILIDAD SANGUINEA Los donantes de sangre y los receptores deben tener grupos compatibles. El grupo O- es compatible con todos, por lo que, quien tiene dicho grupo se dice que es un donante universal. Por otro lado, una persona cuyo grupo sea AB+, podrá recibir sangre de cualquier grupo, y se dice que es un receptor universal. Por ejemplo, una persona de grupo A- podrá recibir sangre O- o A- y donar a AB+, AB-, A+ o A-. Cabe mencionar que al recibirse la sangre de un donante, ésta se separa en distintos hemocomponentes y ahí se determina la compatibilidad con los debidos grupos sanguíneos. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 30 UNIVERSIDAD DE CUENCA Actualmente ya casi no se realizan transfusiones de sangre entera, si así fuera no se debe utilizar el término "donante o receptor universal" ya que es necesario tener en cuenta que la sangre entera está compuesta principalmente por glóbulos rojos (con sus antígenos) y por plasma (con sus anticuerpos). De ese modo, si se transfundiera a una persona de grupo A la sangre de un supuesto dador universal de grupo O, estaría ingresando anticuerpos anti A (del donante que es grupo O), que como se mencionó, tiene anticuerpos anti-A y anti-B a la persona a transfundir provocando una incompatibilidad ABO pudiendo provocar incluso la muerte. Como se aclaró, la sangre se separa en distintos hemocomponentes, los glóbulos rojos, plasma, y plaquetas. De esta manera, se pueden transfundir los glóbulos rojos de un donante O a cualquier grupo sanguíneo ya que no cuenta con antígenos para el sistema ABO en sus glóbulos rojos. Por el contrario, se puede transfundir su plasma a un individuo solamente con el mismo grupo sanguíneo, teniendo en cuenta que el grupo O cuenta con anticuerpos anti-A y anti-B. Lo mismo sucede con el grupo AB. (12) Gráfico Nº 8 TABLA DE COMPATIBILIDAD ENTRE GRUPOS SANGUÍNEOS Fuente Nº 12 AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 31 UNIVERSIDAD DE CUENCA 4.4 SUBGRUPOS SANGUÍNEOS DE A El problema de las transfusiones se agrava debido a la existencia de subgrupos, dentro de un grupo sanguíneo, así el fenotipo A puede dividirse en dos principales subgrupos A1 y A2 aunque existen otros subgrupos que son el resultado de mutaciones en la glucosiltransferasa y reducen su actividad o modifican la especificidad del sustrato sobre el que actúan. El resultado es una cantidad menor de sustancia A, y a veces, una estructura antigénica alterada. 4.4.1 IMPORTANCIA Conocer los subtipos de A es importante porque pueden interferir con la determinación correcta del grupo sanguíneo de un donante o de un receptor de sangre. A veces, se detectan por discrepancias entre el grupo sérico y el hemático, en los que se necesitan pruebas adicionales hasta identificar correctamente el grupo. (14) Es importante porque: Pueden dar aglutinación negativa o muy débil con Anti-A y por lo tanto interpretarse como 0, lo que es peligroso sobre todo si son células del donador. Si se transfunde sangre A1 en un paciente A2, se está inmunizando a este paciente y en una segunda transfusión puede reaccionar con anticuerpos dirigidos contra las determinantes antigénicos propias de A1 que no están en los eritrocitos A2. El 2% de la población A2 y 25% de la A2B, tienen anti-A1 y por lo tanto si requieren transfusión deben recibir sangre A2 y A2B respectivamente.(8) Es más corriente encontrar subgrupos de A que subgrupos de B. Mientras el 80% de los individuos A son A1, nada menos que el 20% son A2. Las personas del subgrupo A2; tienen menos antígeno A en la superficie de sus eritrocitos, e incluso algunas producen un anticuerpo anti-A1, clínicamente poco AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 32 UNIVERSIDAD DE CUENCA significativo, excepto en las raras ocasiones que actúa a 37°C. El hecho de producir anti-A1 significa que también hay diferencias cualitativas entre el A1 y el A2. Parece ser que en los eritrocitos A1 el antígeno A esta muy ramificado. Los individuos A1 producen antígeno A, a partir de todas las cadenas H de tipo II (H1, H2, H3, H4). Los individuos A2 producen antígeno A solamente a partir de los precursores H1 y H2. Por lo tanto, los individuos A1 presentan más cantidad de antígeno A por eritrocito que los individuos A2. (20) Los eritrocitos A2 aglutinan mas débilmente que los A1 con los antisueros habituales, pero prácticamente igual con los monoclonales, y no aglutinan nada con la lectina procedente de la planta Dolichos biflorus, cosa que los eritrocitos A1 si lo hacen. Los glóbulos rojos de los individuos A1 presentan aproximadamente 106 sitios antigénicos por célula; en cambio, los A2 sólo poseen entre 0,2 a 0,4 x 106 sitio por glóbulo rojo. La distinción entre A1 y A2 corresponde a una diferencia en el número y distribución de los receptores A en la membrana eritrocitaria y a una diferencia cualitativa de estructura. La diferenciación entre ambas se realiza mediante la utilización de anticuerpos monoclonales y lectinas específicas de grupo sanguíneo Dolichos biflorus (antiA1) y Ulex europaeus (anti-H). Se definen como A intermedio (Aint) aquellos hematíes en los que se observan ciertos caracteres A1 y ciertos caracteres A2. Diferentes grupos de trabajo han utilizado diversos criterios para clasificar el Aint. Algunos clasifican como Aint aquellas células con reacciones débiles con Dolichos, pero con reactividad H más fuerte que las A2, mientras que otros las clasifican por su fuerte reactividad con Dolichos y Ulex. Dentro de los AB también hay subgrupos de A, en su mayoría A1B y algunos A2B. Entre el 22% y el 35% de los A2B tienen anti-A1 en el suero. Es de suponer que la mayor incidencia de anti-A1 en los A2B, comparándolos con los A2, tiene que ver con el nivel mas bajo del antígeno A1 en las células A2B que en las A2. (14) AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 33 UNIVERSIDAD DE CUENCA No es necesario en la rutina determinar si una persona es A1 o A2, a menos que en su suero exista un anticuerpo con especificidad anti-A1 que esté causando una discrepancia en la interpretación del grupo inverso, o que se presente incompatibilidad en la prueba cruzada. (13) Gráfico Nº 9 SUBGRUPOS SANGUÍNEOS DE A Fuente Nº 14 4.4.2 OTROS SUBGRUPOS DE A Existen otros subgrupos A considerados débiles A3, Ax, Aend, Am, Ael, en los que la reactividad antigénica es inferior a la de los glóbulos A2. (4) A3: estos hematíes presentan un modelo característico de aglutinación cuando reaccionan con el suero anti-A: algunos de los hematíes son aglutinados mientras que otros no lo son, es decir, ofrecen una imagen de doble población. El fenotipo A3 presenta una frecuencia de 1:1000. (20) Aint: su reacción con anti-A y anti-A1 es más débil que los eritrocitos A1 y más fuerte con anti–H que los eritrocitos A2, producen un patrón de campo mixto característico de pequeños aglutinatos entre muchas células libres en las pruebas con anti-A y anti-B. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 34 UNIVERSIDAD DE CUENCA Ax: Las células tienen una reacción muy débil con anti-A, o no la presentan. En el suero, el anti-A no existe o es muy débil y habitualmente contiene anti-A1. En saliva, cuando es secretor, sólo se detecta el antígeno H. Am: reacción negativa o débil con anti-A y anti AB. En suero, no se detecta anti- A o anti-A1; en saliva de secretor se encuentran antígenos A y H. Aend: A débil debido en apariencia a un alelo de ABO, pero que no se cataloga como Ax ni Am. La saliva contiene H, pero no A. Ael: No son aglutinados por anti-A ni por anti-A,B de ningún origen, Ael es aún más débil que Aend. La saliva de los secretores contiene H pero no A. Los grupos débiles de A como Ax, Am y Ael no pueden ser identificados en forma confiable sólo sobre la base de las pruebas tipificación de sangre. Los estudios de la saliva, transferasas nos ayudan a identificarlos. (29) Estos subgrupos pueden ser el resultado de: Genes alelos situados en el locus ABO, que comprende menos del 1% del total de genes del grupo A. Genes modificadores situados en otros locus, que alteran la expresión de los genes normales ABO. Mezclas de sangre. Cambios en la fuerza de reacción del antígeno A, causado por enfermedades. Antígeno A adquiridos. (13) Anti A1: Este anticuerpo reacciona con los hematíes A1, pero no reacciona con los hematíes A2. Es posible que el anti - A1 reaccione con el antígeno A que se forma a partir de las cadenas H3 y H4. Anti-A1 se considera clínicamente significativo cuando reacciona a 37°C. (21) Anti-A1 Lectin. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 35 UNIVERSIDAD DE CUENCA Anti-A1 lectina es un reactivo estabilizado preparado a partir de un extracto purificado de semillas Dolichos biflorus que es cuidadosamente calibrado para una diferencia de las células del grupo sanguíneo A. Contiene una fitohemaglutinina contra los subgrupos A1 y A1B; prácticamente específicos para un antígenos en las células rojas de la sangre humana. La determinación de subgrupos A no debe realizarse durante el primer año de vida ya que el antígeno A no se encuentra plenamente desarrollado (20) AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 36 UNIVERSIDAD DE CUENCA CAPÍTULO III 5.- OBJETIVOS 5.1 OBJETIVO GENERAL ♣ Determinar la frecuencia del subgrupo sanguíneo A1 en los pacientes que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana de la ciudad de Cuenca en el año 2011. 5.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS ♣ Identificar a los pacientes que pertenezcan al grupo sanguíneo A o AB. ♣ Determinar el subgrupo sanguíneo A 1 y los resultados obtenidos relacionarlos con el grupo sanguíneo y el tipo de paciente. ♣ Brindar información a los pacientes sobre las complicaciones de la incompatibilidad sanguínea mediante el empleo de trípticos. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 37 UNIVERSIDAD DE CUENCA CAPÍTULO IV 6.- METODOLOGÍA 6.1 TIPO Y DISEÑO GENERAL DEL ESTUDIO El presente estudio es de tipo descriptivo 6.2 UNIVERSO En este estudio, el universo lo conformaron 3862 pacientes, quienes acudieron al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana del Cantón Cuenca en el año 2010 del grupo sanguíneo A y AB, los mismos que fueron obtenidos por datos proporcionados por la misma Institución. GRUPO SANGUINEO FRECUENCIA A+ 3521 A- 146 AB+ 187 AB- 8 TOTAL 3862 6.3 MUESTRA Muestra no probabilística, prospectiva conformada por 192 pacientes que acudieron al Banco de Sangre de la Cruz Roja, de acuerdo a la siguiente fórmula: AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 38 UNIVERSIDAD DE CUENCA Tamaño Muestral: Donde: N = Total de la población = 3862 Za2 = 1.962 (si la seguridad es del 95%) p = proporción esperada (en este caso 5% = 0.05) q = 1 – p (en este caso 1-0.05 = 0.95) d = precisión (en este caso deseamos un 3%). n= 3862 x (1.96)2 x 0.05 x 0.95 = 192 0.032 x (3862 – 1) + (1.96)2 x 0.05 x0.95 Para aumentar la representatividad y la posibilidad de pérdidas al momento del levantamiento de datos de la investigación se incluyó en el estudio a 200 pacientes. 6.4 CRITERIOS DE INCLUSIÓN En el presente estudio estuvieron incluidos: • Pacientes que acudieron al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana del Cantón Cuenca y que pertenecieron al grupo sanguíneo A o AB. • Pacientes de cualquier condición socio-económica, peso, talla, edad, procedencia y residencia. • Pacientes que firmaron el consentimiento informado y los que tuvieron la autorización de sus representantes al ser menores de edad. 6.5 CRITERIOS DE EXCLUSIÓN No fueron incluidos: AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 39 UNIVERSIDAD DE CUENCA • Pacientes que no firmaron el consentimiento informado. • Pacientes que presentaron alguna resistencia para colaborar con el estudio. 6.6 METODOS, TÉCNICAS Y PROCEDIMIENTOS 6.6.1 PRIMER OBJETIVO Para identificar a los pacientes del grupo sanguíneo A o AB, objeto de nuestro estudio, se solicitó el permiso correspondiente para la realización de la tesis que lleva por título “Frecuencia del subgrupo sanguíneo A1 en los pacientes que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana del Cantón Cuenca 2011”, permitiéndonos tener acceso a la información necesaria para la realización de nuestro estudio. Luego se solicitó la colaboración del personal que labora en la Institución para que nos permita realizar el grupo sanguíneo a todos los pacientes que acuden a dicho centro y obtener el consentimiento informado, requisito necesario para el desarrollo del estudio. Finalmente, con el apoyo del personal del Banco de Sangre de La Cruz Roja, se procedió a la recolección de las muestras sanguíneas y su adecuado transporte al Centro de Diagnostico de la Facultad de Ciencias Médicas, lugar en el que se llevo a cabo la investigación. TÉCNICA DE LABORATORIO CLÍNICO PARA LA DETERMINACIÓN DEL GRUPO SANGUÍNEO: Toma de muestra Muestra Capilar 1. Colocar al paciente en la posición adecuada (sentado). La punción se realiza en la yema del dedo índice preferiblemente. 2. Provocar una hipertermia local, mediante frotación y apretar el pulpejo del dedo seleccionado de manera tal que la extremidad muestre congestión venosa. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 40 UNIVERSIDAD DE CUENCA 3. Desinfectar el sitio de la punción con algodón empapado en alcohol. Dejamos secar la piel sin soplar. 4. Tomar una lanceta nueva, estéril, desechable y realizar una punción rápida y segura. 5. Recolectar las gotas de sangre necesarias en la placa evitando presionar demasiado fuerte. (22) Determinación del Grupo Sanguíneo 1. En una lámina de vidrio limpia y rotulada colocar tres gotas de sangre separadas. 2. Añadir una gota de cada reactivo (Anti A, Anti B y Anti D) sobre cada gota de sangre depositada. 3. Mezclar con un palillo el reactivo dentro de un área de unos 2 cm de diámetro, moviendo la lámina en forma suave y continua por 2 minutos. 4. Interpretación, leer macroscópicamente por aglutinación. (23) RESULTADOS Anti - A A+ Aglutina A- Aglutina Anti - B Anti - D Aglutina B+ Aglutina B- Aglutina AB+ Aglutina Aglutina AB- Aglutina Aglutina O+ Aglutina Aglutina Aglutina O- 6.6.2 SEGUNDO OBJETIVO AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 41 UNIVERSIDAD DE CUENCA Para determinar el subgrupo sanguíneo A1, empleamos la técnica de aglutinación con el reactivo anti-A1, el período estimado para el análisis de las muestras fue de 3 meses. TÉCNICA DE LABORATORIO CLÍNICO PARA LA DETERMINACIÓN DEL SUBGRUPO SANGUÍNEO A1: Toma de muestra Muestra venosa 1. Colocar al paciente en posición adecuada (sentado). Se coloca el brazo extendido sobre el soporte. 2. Colocar el torniquete de 8 a 10 cm por encima del lugar de la punción, al dificultarse el retorno venoso edematiza las venas y por tanto mejora su palpación. 3. Examinar exhaustivamente las venas (cefálica, basílica o mediana), visualizando la zona y palpándola. Una vez localizada la vena limpiamos la zona con alcohol y se deja secar sin soplar. 4. Situar la aguja con el bisel hacia arriba aproximadamente 20º sobre la piel, al mismo tiempo con la mano izquierda se fija los tejidos. 5. Una vez extraída la sangre el paciente abre la mano y se descomprime la vena. Una vez terminada la extracción y antes de extraer la aguja se debe retirar el torniquete. 6. Retirar la aguja y colocar en el punto de punción algodón o gasa estéril ejerciendo presión. (24) Determinación del subgrupo sanguíneo A1 1. Colocar en un tubo 0.5 ml de sangre total. 2. Adicionar al tubo de ensayo con la sangre total 4 ml de suero fisiológico. 3. Centrifugar por un minuto y descartar el sobrenadante. 4. Realizar este procedimiento por dos ocasiones más. 5. Eliminar el sobrenadante y colocar una gota del reactivo anti – A1 a la muestra. 6. Mezclar y centrifugar por 15 segundos a 1000 rpm. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 42 UNIVERSIDAD DE CUENCA 7. Agitar suavemente el tubo y resuspender el botón celular, 8. Interpretar. Si a una agitación suave los hematíes se despegan en uno o varios bloques, la reacción es positiva y si formar una suspensión homogénea, la reacción es negativa.(26) RESULTADOS NEGATIVO Ausencia de aglutinación. POSITIVO Presencia de aglutinación. 6.6.3 TERCER OBJETIVO Para realizar este objetivo, se entregó un folleto el cual describe la información de los grupos sanguíneos, factor Rh, problemas de incompatibilidad, la importancia de conocer el tipo de sangre y subgrupos sanguíneos de A. (Anexo Nº6) 6.7 CONTROL DE CALIDAD El aseguramiento de la calidad de las investigaciones del laboratorio implica todo un conjunto de medidas encaminadas a lograr una adecuada confiabilidad de los resultados. En este trabajo de investigación, se realizó un control interno interlaboratorio e intralaboratorio CONTROL INTERNO INTRALABORATORIOS Control interno de calidad significa una serie de actuaciones encaminadas a evaluar diariamente la fiabilidad de las determinaciones analíticas rutinarias (27). Para lo cual se utilizan muestras especialmente preparadas para cumplir el rol de “muestras testigo”. Estas muestras pueden prepararse en el mismo laboratorio o adquirirse comercialmente. (28) Este control lo realizamos por semana un total de 5 controles negativos, utilizando glóbulos rojos lavados de un grupo sanguíneo “O”, previamente AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 43 UNIVERSIDAD DE CUENCA verificado, ya que esté al reaccionar con el reactivo anti A1 no produce ninguna aglutinación. También se realizaron semanalmente 5 controles positivos comerciales, para los que se utilizó células de grupo sanguíneo A1 que dieron aglutinación con el reactivo anti A1. (Anexo Nº5 parte b) CONTROL INTERLABORATORIOS Para confirmar los resultados obtenidos, se procedió a enviar 15 muestras al Banco de Sangre de SOLCA y 15 muestras al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana, dando un total de 30 muestras entre positivas y negativas para subgrupo A1, los resultados de estas instituciones fueron exactamente iguales a los resultados obtenidos en nuestra investigación. (Anexo Nº 5 parte a) 6.8 PLAN DE ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS En el análisis de la información se utilizó los siguientes programas estadísticos: SPSS VERSION 15.0 EN ESPAÑOL y EXCEL. Y se determinó frecuencia, porcentaje y chi cuadrado. Los resultados son presentados en cuadros y gráficos. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 44 UNIVERSIDAD DE CUENCA CAPÍTULO V 7.- ANÁLISIS DE RESULTADOS TABLA # 1 DISTRIBUCIÓN DE GRUPOS SANGUINEOS DE LOS PACIENTES DE LA CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA DEL AÑO 2010. GRUPO SANGUINEO FRECUENCIA PORCENTAJE O+ 15916 73,69 O- 411 1,9 A+ 3521 16,3 A- 146 0,67 B+ 1365 6,32 B- 45 0,21 AB+ 187 0,87 AB- 8 0,04 TOTAL 21599 100 FUENTE: Formulario de Recolección de Datos ELABORACIÓN: Las Autoras Se observa un 73.69% del grupo sanguíneo O+, 16.3% del grupo A+ y el 0.04% del grupo sanguíneo AB-. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 45 UNIVERSIDAD DE CUENCA GRAFICO # 1 FUENTE: Tabla # 1. ELABORACION: Las Autoras. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 46 UNIVERSIDAD DE CUENCA TABLA # 2 DISTRIBUCIÓN DE 200 PACIENTES DE ACUERDO AL SEXO CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA 2011. SEXO Frecuencia Porcentaje FEMENINO 66 33,0 MASCULINO 134 67,0 Total 200 100,0 FUENTE: Formulario de Recolección de Datos ELABORACIÓN: Las Autoras Del total de pacientes que conformaron este estudio el 67 % pertenecen al sexo masculino frente al 33% del sexo femenino. GRAFICO # 2 FUENTE: Tabla # 2. ELABORACION: Las Autoras. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 47 UNIVERSIDAD DE CUENCA TABLA # 3 DISTRIBUCIÓN DE 200 PACIENTES SEGÚN SU TIPO DE SANGRE. CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA 2011. TIPO DE SANGRE Frecuencia Porcentaje A- 6 3,0 A+ 186 93,0 AB - 1 ,5 AB+ 7 3,5 Total 200 100,0 FUENTE: Formulario de Recolección de Datos ELABORACIÓN: Las Autoras De acuerdo al tipo de sangre el porcentaje más alto se encuentra en los pacientes de tipo A + con el 93% y el más bajo en los pacientes de tipo AB – con el 0.5 %. GRAFICO # 3 FUENTE: Tabla # 3. ELABORACION: Las Autoras. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 48 UNIVERSIDAD DE CUENCA TABLA # 4 DISTRIBUCIÓN DE 200 PACIENTES DE ACUERDO AL SUBGRUPO SANGUÍNEO A1. CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA 2011. SUBGRUPO A1 Frecuencia Porcentaje NEGATIVO 38 19,0 POSITIVO 162 81,0 Total 200 100,0 FUENTE: Formulario de Recolección de Datos ELABORACIÓN: Las Autoras Al realizar la prueba para determinar el subgrupo sanguíneo A1 el 19% de los casos son negativos y el 81% son positivos. GRAFICO # 4 FUENTE: Tabla # 4. ELABORACION: Las Autoras. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 49 UNIVERSIDAD DE CUENCA TABLA # 5 DISTRIBUCIÓN DE 200 PERSONAS DE ACUERDO AL TIPO DE PACIENTE CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA 2011. TIPO DE PACIENTE Frecuencia Porcentaje DONANTE 104 52,0 TIPIFICACION 96 48,0 Total 200 100,0 FUENTE: Formulario de Recolección de Datos ELABORACIÓN: Las Autoras De acuerdo al tipo de paciente que acudió a la Cruz Roja Ecuatoriana del Cantón Cuenca, la mayor frecuencia se encuentra en los donantes de sangre con el 52% frente al 48% que acudió para realizarse una tipificación. GRAFICO # 5 FUENTE: Tabla # 5. ELABORACION: Las Autoras. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 50 UNIVERSIDAD DE CUENCA TABLA # 6 RELACIÓN DEL SUBGRUPO A1 CON EL TIPO DE SANGRE EN 200 PACIENTES CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA 2011. SUBGRUPO A1 - TIPO DE SANGRE TIPO DE SANGRE A- A+ AB- AB+ TOTAL SUBGRUPO A1 # % # % # % # % # % NEGATIVO 2 5,3 34 89,4 0 0 2 5,3 38 100 POSITIVO 4 2,5 152 93,8 1 0,6 5 3,1 162 100 TOTAL 6 3 186 93 1 0,5 7 3,5 200 100 FUENTE: Formulario de Recolección de Datos ELABORACIÓN: Las Autoras El mayor número de pacientes son de tipo A+, de los cuales el 89.4% son subgrupo A1 negativo y el 93.8% son subgrupo A1 positivo. CHI CUADRADO = 0,679 No significativo. GRAFICO # 6 FUENTE: Tabla # 6. ELABORACION: Las Autoras. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 51 UNIVERSIDAD DE CUENCA TABLA # 7 RELACIÓN DEL SUBGRUPO SANGUÍNEO A1 CON EL TIPO DE PACIENTE EN 200 MUESTRAS. CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA 2011. SUBGRUPO A1 - TIPO DE PACIENTE TIPO DE PACIENTE DONANTE TIPIFICACIÓN SUBGRUPO A1 # % # TOTAL % # % NEGATIVO 16 42,1 22 57,9 38 100 POSITIVO 88 54,3 74 45,7 162 100 104 52 96 48 200 100 TOTAL FUENTE: Formulario de Recolección de Datos ELABORACIÓN: Las Autoras El mayor número de casos positivos está en donantes con un 54.3 %, en tanto que el menor porcentaje está en los pacientes que acudieron para una tipificación con el 45.7%. CHI CUADRADO = 0,175 No significativo GRAFICO # 7 FUENTE: Tabla # 7. ELABORACION: Las Autoras. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 52 UNIVERSIDAD DE CUENCA CAPÍTULO VI 8.- DISCUSIÓN El sistema de grupos sanguíneos ABO fue el primer sistema descubierto hace un siglo, pero la aparición de sus variantes más débiles debido a la heterogeneidad de los alelos A y B están siendo todavía estudiadas. Las frecuencias encontradas de los grupos sanguíneos en este estudio son similares a las observadas en otros estudios realizados en Bancos de Sangre de otros países. En este trabajo no se enfrentaron todas las muestras a los reactivos hemoclasificadores anti-A1 y anti-H, por lo que no se pudo clasificar separadamente al antígeno A en A1 y A2, por lo tanto, se investigó solamente el subgrupo A1. (30) Aunque se conoce que el subgrupo A2B y otros fenotipos débiles del grupo sanguíneo A son más frecuentes en individuos de la raza negra, en este estudio no se consideró este aspecto, debido a que no se utilizaron muestras seleccionadas de acuerdo con los parámetros antropológicos establecidos, en razón de que la población del Cantón Cuenca está constituida generalmente por mestizos, por lo que no es posible establecer las etnias por el color de la piel sin cometer errores en la clasificación. Conociendo ya el porcentaje del grupo sanguíneo de nuestra sociedad, hemos considerado el estudio de subgrupos sanguíneos de A basándonos en estudios que sean realizado en otros países como Costa Rica en donde la muestra fue más grande, se observa que el porcentaje de A 1 es 88.4%, Aint 7.9%, A2 3.6% y A3 0.1%. (5) En la Habana Cuba reportan resultados de A1 73,93 %; A2 17,52 %y 40 Aint 8,55 %; A1B (1,38 %) y A2B 0,46% (4) y en nuestra investigación se obtuvieron porcentajes de A1 de 81% y de As de 19% en una muestra de 200 personas de grupo sanguineo A y AB que acudieron al Banco de sangre de la Cruz Roja; con lo que podemos decir que no existe una AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 53 UNIVERSIDAD DE CUENCA diferencia significativa entre los dos estudios. Linares en su publicación de “Imnunohematologia y Transfusiones” menciona que 80% de los individuos A son A1, y el 20% son A2 con un porcentaje similar para los AB; que son semejantes a los resultados de nuestro estudio. (13) El Dr. Salomón Grispan en su obra titulada “Grupos sanguíneos ABO y Rh” señala lo siguiente: “La mayoría (80%) de la población a la que conocemos como "grupo A" son A1 y con menos frecuencia A2 (18-19 %) y muy rara vez otros subgrupos de A. (1) No encontramos estudios relacionados con los subgrupos en nuestro país, por lo que no es factible realizar una comparación con los resultados obtenidos en nuestra investigación. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 54 UNIVERSIDAD DE CUENCA 9. CONCLUSIONES Al término de nuestro trabajo de investigación concluimos lo siguiente: En los datos obtenidos del Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana se encontró el predominio del grupo sanguíneo "O" en un 75,59% y una escasa frecuencia del grupo sanguíneo "AB" con un porcentaje de 0.91%, que está de acuerdo a los resultados obtenidos a nivel mundial. De los 200 pacientes de todas las edades, se observa un predominio del sexo masculino con el 67% frente al 33% del sexo femenino. El mayor porcentaje del tipo de sangre de las personas A y AB sometidos a nuestro estudio pertenecen al grupo sanguíneo A+ con el 93% y el menor porcentaje es el grupo sanguíneo AB- con el 0.5%. Se encontraron 162 casos positivos para el subgrupo sanguíneo A1 con el 81% y 38 casos para el subgrupo A1 negativo que es el 19%. Al comparar el subgrupo sanguíneo con algunas variables se observó que no existe ninguna significación estadística con el grupo sanguíneosubgrupo (p=0.679) y tipo de paciente (p=0.234). AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 55 UNIVERSIDAD DE CUENCA 10 RECOMENDACIONES Conociendo que el 52 % de las personas que formaron parte de este estudio eran donantes, es importante hacer un seguimiento a las personas que reciben transfusiones con la finalidad de evitar problemas de incompatibilidad por la presencia de Anti A1. Para nuevos estudios sobre este tema, sería de utilidad contar con todos los reactivos para determinar además los subgrupos sanguíneos A2 y A intermedio. Los resultados de esta investigación deberían ser difundidos a nivel Institucional y extra Institucional, ya que son muy pocos los estudios realizados sobre este tema y los mismos pueden servir de base para futuras investigaciones. Las pruebas de grupo sanguíneo y subgrupo deberían estar dentro de los exámenes de rutina que se realizan en los laboratorios del banco de sangre para evitar futuras complicaciones que puedan presentar las personas que se sometan a una transfusión sanguínea. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 56 UNIVERSIDAD DE CUENCA 11 BIBLIOGRAFÍA 1. GRISPAN, Salomón “GRUPOS SANGUÍNEOS ABO Y Rh” Revista Médica de Honduras. Volumen 51. Pag: 6, 105 Disponible en: http://docs.google.com/viewer?a=v&q=cache:86PZ2q63uO8J:www.bvs.h n/RMH/pdf/1983/pdf/Vol51-3-1983 6.pdf+grupo+sanguineo+pdf&hl=es&gl=ec&pid=bl&srcid=ADGEESi1CS MLQav9w6R7tUJ4eIdTk1f02StAFlh1yaC6k2MTt6P8goTFIf6zmYqWeqo dUg-3rYv5wqSw0vTwqwcn-zbcw0CESlhCw193XZ6YakDYeseeQ_74k1e9sv07x1FgVtJoZ1&sig=AHIEtbTFbKIK-862fKL0SlgTHdAiwd-kKA 2. GRUPO SANGUÍNEO. 24 septiembre 2010. Disponible en: http://es.wikipedia.org/wiki/Grupo_sangu%C3%ADneo la 3. Portal de salud “ENCICLOPEDIA MÉDICA”. Disponible en: http://www.ferato.com/ 4. GARCÍA ROSASCO, Marcela, otros. Revista Cubana de Hematología, Inmunología y Hemoterapia “FRECUENCIA DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS A1, A2, AINT, B Y O EN INDIVIDUOS NORMALES” septiembre - diciembre. 2001. Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S086402892001000300003&script=sci _arttext 5. MARÍN ROJAS R. A; otros; “DISTRIBUCION DE LOS SUBGRUPOS DE A EN LA POBLACION DE COSTA RICA”. Disponible en: http://www.binasss.sa.cr/revistas/rccm/v6n3/art2.pdf 6. GONZALES DE PRADA, Eduardo; otros “ESTUDIO DE GRUPOS SANGUÍNEOS Y FACTOR RH EN UNA POBLACIÓN DE LA PAZ, BOLIVIA” La Paz–Bolivia, 1 de enero al 31 de diciembre de 1999. Disponible en: http://www.ops.org.bo/textocompleto/rnsbp00390204.pdf AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 57 UNIVERSIDAD DE CUENCA 7. Secretaría Nacional de Banco de Sangre, “INFORME MENSUAL DEL TRABAJO DEL BANCO DE SANGRE. CRUZ ROJA ECUATORIANA”; 2009. 8. GRISPAN, Salomón “GRUPOS SANGUÍNEOS ABO Y Rh” Revista Médica de Honduras. Volumen 51. Disponible en: http://www.bvs.hn/RMH/pdf/1983/pdf/Vol51-3-1983-6.pdf 9. MAZANA, J. S. “KARL SANGUÍNEOS”, LANDSTEINER Abril-2001. Y LOS GRUPOS Disponible en: http://centros5.pntic.mec.es/ies.victoria.kent/Rincon-C/Curiosid/Rc27/RC-27.htm 10. MARTÍN L, Alberto; “GRUPOS SANGUINEOS” 19 de septiembre del 2010. Disponible en: http://www.portalesmedicos.com/diccionario_medico/index.php/Grupos_ sangu%C3%ADneos 11. GONZALES, Ángel. “GRUPO SANGUINEO Y ENFERMEDAD”. Servicio Hematológico. Hospital San Agustín. España. Pag.36- 39 Disponible en: http://es.scribd.com/doc/7367854/grupos-sanguineos-y-enfermedad 12. “GRUPO SANGUINEO”. Disponible en: http://es.wikipedia.org/wiki/Grupo_sangu%C3%ADneo 13. LINARES, Jesús. “INMUNOHEMATOLOGÍA Y TRANSFUSIÓN” Principios y procedimientos; Primera edición Caracas 1986; Cromotip C.A. pág.; 53; 61; 63-66. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 58 UNIVERSIDAD DE CUENCA 14. PETRIDES, M; STACK, G, “GUÍA PRÁCTICA DE MEDICINA TRANSFUSIONAL”; Edición Española 2005; Sociedad Española de transfusión sanguínea y Drug Farma S.L; pág. 73-77. 15. Determinación de grupos sanguíneos. Titulación de antisueros. Disponible en: inmunologia.umh.es/Grupo%20sanguíneo%20y%20titulación%20de%20 antisueros.doc 16. SUBGRUPOA2 Y DEL ANTICUERPO Anti-A1. Jueves 16 de Septiembre del 2010. Disponible en: http://translate.google.com/translate?hl=es&sl=en&u=http://www.clinlabn avigator.com/Transfusion/a2-subgroup-and-anti-a1antibody.html&ei=HJLpTdrtD6jc0 17. MARTÍNEZ I; “GRUPOS SANGUÍNEOS A, B, O Y SU FRECUENCIA”; Revista de Divulgación Científico - Tecnológica del Estado de Morelos. Disponible en: http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/4/47/GRUPOS_SANGUI NEAOS_Y_SU_FRECUENCIA.pdf 18. Organización Mundial de la Salud (OMS) Disponible en: http://www.eluniversal.com/2011/06/14/donacion-de-sangre.shtml 19. MAROTO, Rafael. “LOS GRUPOS SANGUÍNEOS”. 28 de marzo de 2007. Disponible en: http://ficus.pntic.mec.es/rmag0063/recursos/php/grupos_sanguineos/los_ grupos_sanguineos.php 20. “SUBGRUPO A2 Y DEL ANTICUERPO Anti-A1 “jueves 16 de septiembre del 2010. Disponible en: http://translate.google.com/translate?hl=es&sl=en&u=http://www.clinlabn AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 59 UNIVERSIDAD DE CUENCA avigator.com/Transfusion/a2-subgroup-and-anti-a1antibody.html&ei=HJLpTdrtD6jc0 21. Anti –A1 lectin. Nucleo Diagnostic LTD. Reino Unido. Disponible en: http://translate.google.com/translate?hl=es&sl=en&u=http://www.coredia g.com/images/ANTI-A1_LECTIN.pdf&ei=kJ3pTZ3XM8Tk0QHiNyrAQ&sa=X&oi=translate&ct=result&resnum=4&ved=0CDMQ7gEwAw &prev=/search%3Fq%3Dlectina%2BantiA1%26hl%3Des%26biw%3D1419%26bih%3D651%26prmd%3Divns 22. MOSCOSO G, Johanna. “TOMA DE MUESTRA PARA HEMOCLASIFICACION”. Bogotá –Colombia. Disponible en : http://www.monografias.com/trabajos14/labclinico/labclinico.shtml 23. “REACTIVOS TIPIFICADORES MONOCLONALES PARA TIPIFICACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEOS ANTI - A, ANTI - B, ANTI A,B.” Disponible en: http://www.bioschile.cl/2b_1a.html 24. “CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE”; Disponible en: http://perso.wanadoo.es/sergioram1/toma_y_recepcion_de_mues_2.htm 25. COPPO, PEREIRA. “GRUPOS SANGUÍNEO”S SISTEMA ABO. Disponible en: http://www.fisiologiafacena.ecaths.com/archivos/fisiologiafacena/GS%20 GUIA%202.pdf 26. ORTIZ, Miguel Ángel; otros.” INMUNOHENATOLOGIA” Universidad de Veracruzana. Determinación de Subgrupo. Disponible en: http://www.scribd.com/doc/1028985/MANUAL-COMPLETO-DEINMUNOHEMATOLOGIA AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 60 UNIVERSIDAD DE CUENCA 27. FARINATI, Zulema “CONTROL DE CALIDAD EN LABORATORIOS CLÍNICOS: CONTROL INTERNO” Martes 29 de Septiembre de 2009. Disponible en: http://www.coyunturaonline.com.ar/?p=1612 28. PINA A, José. Hematología. CONCEPTOS RELACIONADOS CON EL CONTROL DE CALIDAD. Libro Editorial. Paraninfo Pág. 631 IES Miguel de Cervantes. Murcia. Disponible en: http://www.google.com.ec/url?sa=t&source=web&cd=1&ved=0CBYQFjA A&url=http%3A%2F%2Fcentros5.pntic.mec.es%2Fmiguel74%2Fhemato %2Fpina%2F61_CONTROL_CALIDAD_Definic_58.ppt&rct=j&q=tipos%2 0de%20control%20interno%20de%20calidad%20interlaboratorio&ei=NM AVTp_2KIrAgQfDnqX0Dw&usg=AFQjCNHoqgSd1twXffVqEp61lj1SSPdb 4w&cad=rja 29. NIETO R, Araceli. “DETECCIÓN, ANÁLISIS Y RESOLUCIÓN DE DISCREPANCIAS EN EL GRUPO SANGUÍNEO ABO”, Banco de Sangre del Hospital Gonzalo Castañeda, Instituto de Seguridad y Servicios Sociales de los Trabajadores del Estado. Revista Médica del Instituto Mexicano de Seguro Social 2006; pág. 32-33. Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/imss/im-2006/ims062h.pdf 30. GONZÁLEZ S, Reneé. BENCOMO H, Antonio y otros.” FENOTIPOS DÉBILES DEL ANTÍGENO A (sistema ABO de grupos sanguíneos) EN DONANTES DE SANGRE” Instituto de Hematología e Inmunología Ciudad de La Habana. 1996 Disponible en: http://bvs.sld.cu/revistas/hih/vol14_2_98/hih05298.htm AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 61 UNIVERSIDAD DE CUENCA CAPÍTULO VIII ANEXOS ANEXO Nº 1. CONSENTIMIENTO INFORMADO. UNIVERSIDAD DE CUENCA FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS ESCUELA DE TECNOLOGÍA MÉDICA FRECUENCIA DEL SUBGRUPO SANGUÍNEO A1 EN LOS PACIENTES QUE ACUDEN AL BANCO DE SANGRE DE LA CRUZ ROJA ECUATORIANA. CUENCA - ECUADOR 2011 Reciba un cordial saludo de parte de las integrantes María Belén Gordillo Siguencia y María de Lourdes Guzñay Barbecho del proyecto de investigación de tesis: “Frecuencia de los subgrupos sanguíneos de A en los pacientes que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana Cuenca - Ecuador 2011”, la misma que se llevará a cabo en los pacientes de grupo sanguíneo A y AB que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja de la ciudad de Cuenca, razón por la cual, queremos darle a conocer sobre este estudio: Esta investigación se llevará a cabo será sin ningún costo ni remuneración económica y es estrictamente voluntaria. Si usted decide participar de este estudio se procederá a tomarle una muestra de sangre capilar, la misma que consiste en realizarle un pequeño pinchazo en el pulpejo de su dedo índice para realizar el grupo sanguíneo, utilizando todas las normas de asepsia, existiendo un leve dolor al momento del pinchazo. Al entregarle su resultado y verificar que su grupo de sangre es de tipo “A o AB”, se procederá a tomar una muestra de sangre venosa para la determinación de subgrupos sanguíneos A1 y otros subgrupos de A, que se realizará en el laboratorio del Centro de Diagnóstico de la Facultad de Ciencias Médicas de la Universidad de Cuenca , la cantidad extraída es de unos 3 cc que no afectará de ninguna manera su estado de salud, la misma será tomada con todas las medidas adecuadas libres de contaminación en el Banco de Sangre. Los riesgos serán mínimos existiendo un leve dolor al momento del pinchazo y un posible moretón en el lugar de la extracción. Agradeciéndole por su colaboración, ya que si Ud accede a participar de la misma será de gran importancia ya que aportará con la información necesaria para determinar el porcentaje de los grupos y subgrupos sanguíneos y a cumplir con nuestros objetivos. Expreso mi consentimiento para participar de este estudio dado que he recibido toda la información necesaria de lo que incluirá el mismo y tuve la oportunidad AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 62 UNIVERSIDAD DE CUENCA de formular todas las preguntas necesarias para mi entendimiento, las cuales fueron respondidas con claridad y profundidad. Yo…………………………………………………….. después de haber conocido sobre este proyecto de investigación doy mi autorización para que se me incluya en el estudio. ---------------------------------------Firma --------------------------------Nº de cédula Fecha: Día / Mes / Año AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 63 UNIVERSIDAD DE CUENCA ANEXO Nº 2 CONSENTIMIENTO INFORMADO. UNIVERSIDAD DE CUENCA FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS ESCUELA DE TECNOLOGÍA MÉDICA FRECUENCIA DEL SUBGRUPO SANGUÍNEO A1 EN LOS PACIENTES QUE ACUDEN AL BANCO DE SANGRE DE LA CRUZ ROJA ECUATORIANA. CUENCA - ECUADOR 2011 Reciba un cordial saludo de parte de las integrantes María Belén Gordillo Siguencia y María de Lourdes Guzñay Barbecho del proyecto de investigación de tesis: “Frecuencia de los subgrupos sanguíneos de A en los pacientes que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana Cuenca - Ecuador 2011”, la misma que se llevará a cabo en los pacientes de grupo sanguíneo A y AB que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja de la ciudad de Cuenca, razón por la cual, queremos darle a conocer sobre este estudio: Esta investigación se llevará a cabo será sin ningún costo ni remuneración económica y es estrictamente voluntaria. Si usted permite que su representado (a) participe de este estudio se procederá a tomarle una muestra de sangre capilar, la misma que consiste en realizarle un pequeño pinchazo en el pulpejo de su dedo índice para realizar el grupo sanguíneo, utilizando todas las normas de asepsia, existiendo un leve dolor al momento del pinchazo. Al entregarle su resultado y verificar que el grupo de sangre de su representado (a) es de tipo “A o AB”, se procederá a tomar una muestra de sangre venosa para la determinación de subgrupos sanguíneos A1 y otros subgrupos de A, que se realizará en el laboratorio del Centro de Diagnóstico de la Facultad de Ciencias Médicas de la Universidad de Cuenca , la cantidad extraída es de unos 3 cc que no afectará de ninguna manera su estado de salud, la misma será tomada con todas las medidas adecuadas libres de contaminación en el Banco de Sangre. Los riesgos serán mínimos existiendo un leve dolor al momento del pinchazo y un posible moretón en el lugar de la extracción. Agradeciéndole por su colaboración, ya que si Ud. Accede que su representado (a) participe de la misma será de gran importancia ya que aportará con la información necesaria para determinar el porcentaje de los grupos y subgrupos sanguíneos y a cumplir con nuestros objetivos. Expreso mi consentimiento para que mi representado (a) participe de este estudio dado que he recibido toda la información necesaria de lo que incluirá el mismo y tuve la oportunidad de formular todas las preguntas necesarias para mi entendimiento, las cuales fueron respondidas con claridad y profundidad. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 64 UNIVERSIDAD DE CUENCA Yo…………………………………………………….. después de haber conocido sobre este proyecto de investigación de tesis doy mi autorización para que mi representado (a) ………………………….……………………… se incluya en el estudio. ---------------------------------------Firma AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. --------------------------------Nº de cédula 65 UNIVERSIDAD DE CUENCA ANEXO Nº 3 TARJETAS DE RESULTADO. UNIVERSIDAD DE CUENCA FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS ESCUELA DE TECNOLOGÍA MÉDICA Grupo Sanguíneo “A” Subgrupo: ______________________________ Factor Rh: ______________________________ Nombre: ______________________________ UNIVERSIDAD DE CUENCA FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS ESCUELA DE TECNOLOGÍA MÉDICA Grupo Sanguíneo “AB” Subgrupo: ______________________________ Factor Rh: ______________________________ Nombre: ______________________________ AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 66 UNIVERSIDAD DE CUENCA Anexo Nº 4. RECURSOS: A) RECURSOS HUMANOS ♣ Estudiantes: Maria Belen Gordillo Siguencia, María de Lourdes Guzñay Barbecho ♣ Directora de tesis: Dra. María Álvarez Herrera. ♣ Asesora de tesis: Dra. Martha Torres ♣ Pacientes que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana. ♣ Personal que labora en el Banco de Sangre. ♣ Personal que labora en el Centro de Diagnostico de La Facultad de Ciencias Medicas. B) RECURSOS MATERIALES REACTIVOS Y MATERIALES. Alcohol 1 litro Algodón Anti A-1 Anti-A; Anti-B; Anti-D Pipeta automática de 50 ul Pipeta serológica 10 ml Suero fisiológico Portaobjetos Cápsula Tubos vacutainer Palillos Agujas vacutainer Gradilla Tubos de pequeños Curitas ensayo Guantes Puntas amarillas AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. Torniquete Papel absorbente 67 UNIVERSIDAD DE CUENCA Anexo Nº 5. CUADROS DE CONTROL DE CALIDAD A) CONTROL INTERLABORATORIOS Para que el presente trabajo de investigación tenga la validez que exigen sus resultados se realizó un control de calidad interlaboratorios. En total fueron procesadas 20 muestras las cuales fueron enviadas a Banco de Sangre de SOLCA y al Banco de Sangre de la Cruz Roja. RESULTADO LABORATORIOS DERIVADOS S DEL PROYECTO. FECHA N. GRUPO MUESTRA SANGUNEO SUBGRUPO LUGAR BANCO 1 14/03/2011 3 A SUBGRUPO DE AS SANGRE NEGATIVO BANCO 2 14/03/2011 5 A SUBGRUPO DE AS SANGRE NEGATIVO SOLCA NEGATIVO SOLCA POSITIVO SOLCA NEGATIVO SOLCA POSITIVO SUBGRUPO 3 14/03/2011 8 A AS SUBGRUPO 4 14/03/2011 17 AB A1 SUBGRUPO 5 18/03/2011 25 A AS SUBGRUPO 6 18/03/2011 44 A A1 BANCO 7 21/03/2011 20 A AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. SUBGRUPO DE A1 SANGRE POSITIVO 68 UNIVERSIDAD DE CUENCA BANCO 8 21/03/2011 52 A SUBGRUPO DE AS SANGRE NEGATIVO BANCO 9 21/03/2011 64 A SUBGRUPO DE AS SANGRE NEGATIVO BANCO 10 30/03/2011 37 AB SUBGRUPO DE A1 SANGRE POSITIVO BANCO 11 30/03/2011 38 A SUBGRUPO DE AS SANGRE NEGATIVO SOLCA POSITIVO SOLCA NEGATIVO SUBGRUPO 12 01/04/2011 78 A A1 SUBGRUPO 13 01/04/2011 105 A AS BANCO 14 01/04/2011 90 A SUBGRUPO DE A1 SANGRE POSITIVO BANCO 15 07/04/2011 120 A SUBGRUPO DE A1 SANGRE POSITIVO BANCO 16 07/04/2011 122 A SUBGRUPO DE AS SANGRE NEGATIVO BANCO 17 07/04/2011 130 A SUBGRUPO DE A1 SANGRE POSITIVO SOLCA NEGATIVO SUBGRUPO 18 14/04/2011 143 A AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. AS 69 UNIVERSIDAD DE CUENCA SUBGRUPO 19 14/04/2011 151 A A1 SOLCA POSITIVO BANCO 20 18/04/2011 149 A SUBGRUPO DE AS SANGRE NEGATIVO BANCO 21 18/04/2011 22 26/04/2011 23 26/04/2011 24 26/04/2011 150 166 168 173 A A AB A SUBGRUPO DE A1 SANGRE POSITIVO SOLCA NEGATIVO SOLCA POSITIVO SOLCA POSITIVO SUBGRUPO AS SUBGRUPO A1 SUBGRUPO A1 BANCO 25 27/04/2011 167 A SUBGRUPO DE AS SANGRE NEGATIVO BANCO 26 27/04/2011 180 A SUBGRUPO DE AS SANGRE NEGATIVO SOLCA POSITIVO SOLCA POSITIVO SOLCA NEGATIVO SOLCA POSITIVO SUBGRUPO 27 05/05/2011 179 A A1 SUBGRUPO 28 05/05/2011 29 05/05/2011 186 197 A A A1 SUBGRUPO AS SUBGRUPO 30 05/05/2011 200 A AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. A1 70 UNIVERSIDAD DE CUENCA Al realizar una comparación entre los resultados podemos decir que no existe variación alguna entre nuestros resultados y los procesados en los laboratorios derivados, por lo que se puede concluir que los resultados de la investigación son válidos. B) CONTROL INTERNO Para la valoración de los reactivos empleados se realizó un control de calidad interno con muestras positivas y negativas ya conocidas. N° FECHA Células N° A1 Células O 14/03/2010 5 Positivo 5 Negativo 21/03/2010 5 Positivo 5 Negativo 28/03/2010 5 Positivo 5 Negativo 04/04/2010 5 Positivo 5 Negativo 11/04/2010 5 Positivo 5 Negativo 18/04/2010 5 Positivo 5 Negativo 25/04/2010 5 Positivo 5 Negativo 02/05/2010 5 Positivo 5 Negativo AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 71 UNIVERSIDAD DE CUENCA Anexo Nº 6. Información del Tríptico. SABES QUE ES EL GRUPO SANGUINEO? Es el conjunto de antígenos genéticamente determinados, que se encuentran presentes en la superficie de la membrana de las células sanguíneas y que pueden producir, con una transfusión o con el embarazo una inmunización. Se han identificado alrededor de 20 antígenos del grupo sanguíneo siendo de mayor importancia en la practica transfuncional el sistema ABO y el factor Rh. El sistema ABO fue descubierto por Karl Landsteiner en 1901, convirtiéndolo en el primer grupo sanguíneo conocido. Las transfusiones de sangre entre grupos incompatibles pueden provocar una reacción inmunológica que puede desembocar en hemólisis, anemia, fallo renal, shock, o muerte. Sólo se necesita una muestra de sangre para determinar el grupo sanguíneo y factor Rh. EL FACTOR Rh Es una proteína que se encuentra en la superficie de los glóbulos rojos. Si está presente se designa como factor Rh positivo (+) y si no está presente Rh negativo (-). Esta proteína se encuentra en más del 85% de la población de todo el mundo. El factor Rh (Rhesus) fue descubierto por Karl Landsteiner y Wiener en 1940, en los glóbulos rojos de una especie de monos de la India, el Macacus Rhesus. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 72 UNIVERSIDAD DE CUENCA LA IMPORTANCIA DE CONOCER SU GRUPO SANGUINEO. Conocer tu grupo sanguíneo es de vital importancia ante una situación de urgencia ya que puede ayudar a salvar la vida a otra persona en una situación de emergencia, en donde no es posible esperar a tipificar la sangre del donante y del receptor. Si sabemos cuál es su grupo sanguíneo podremos ayudarle con mayor rapidez. Siguiendo las normas básicas de transfusión no existirán incompatibilidades en la transfusión de sangre de un ser humano a otro. Se aconsejan a todas las personas llevar siempre la identificación del grupo sanguíneo y factor Rh. Se puede estudiar diversas razas y sus interrelaciones evolutivas, a través del análisis de la distribución poblacional de los diversos antígenos, determinando su predominancia en cada raza humana y lo que permite hacer comparaciones. COMPATIBILIDAD En toda transfusión hay un donante que es la persona que haciendo uso de su libertad, decide ofrecer su sangre en las condiciones sanitarias legalmente establecidas con el fin concreto de ayudar a salvar la vida de un ser humano, y un receptor que es el individuo capaz de recibir sangre de cualquier tipo sin que se produzca aglutinación de los eritrocitos. Por lo tanto, los donantes de sangre y los receptores deben tener grupos sanguíneos compatibles. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 73 UNIVERSIDAD DE CUENCA No se pueden introducir antígenos que un paciente no tenga en su sangre, dado que provocará una reacción de sensibilización alertando el sistema inmunológico y provocando una reacción transfusional. SUBGRUPOS SANGUÍNEOS. Los grupos sanguíneos está distribuidos entre la población aproximadamente en los siguientes porcentajes; 0 43%; A 40%; B 12% y AB 5%. Diversas investigaciones han revelado que existen, dentro de un mismo grupo sanguíneo, subgrupos dependiendo de la cantidad y calidad de los antígenos presentes en los glóbulos rojos. Es más corriente encontrar subgrupos de A que subgrupos de B. Conociendo que el porcentaje del grupo sanguíneo A es del 40%, resulta importante identificar los subgrupos de A, porque pueden interferir con la determinación correcta del grupo sanguíneo de un donante o de un receptor de sangre. Mientras el 80% de los individuos A son A1, nada menos que el 20% son A2 o As. Este trabajo de investigación brindará un aporte a la sociedad permitiendo conocer los porcentajes de grupos y subgrupos sanguíneos de los pacientes que acuden a la Cruz Roja de la ciudad de Cuenca, ya que en la actualidad no se han realizado estudios sobre este tema y los resultados obtenidos ayudarán a los pacientes conocer sobre su grupo sanguíneo y a la vez en un futuro saber ¿qué tipo de sangre puede recibir o donar?, para evitar problemas de incompatibilidad los mismos que pueden causar problemas en su salud. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 74 UNIVERSIDAD DE CUENCA Anexo Nº 7. ♣ Identificación de los pacientes de grupo sanguíneo A y AB (Tipo de sangre) (Donante) ♣ Recolección de la muestra. (Tipo de sangre) AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. (Donante) 75 UNIVERSIDAD DE CUENCA ♣ Materiales y Reactivos. (Anti-A1, Anti –B, Anti-A) Procedimiento. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 76 UNIVERSIDAD DE CUENCA 1. Muestras de sangre recolectadas con EDTA. 2. Identificar los tubos con el número correspondiente (grupo y subgrupo). 3. Añadir la muestra de sangre a cada tubo y suero fisiológico para el lavado los glóbulos rojas. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 77 UNIVERSIDAD DE CUENCA 4. Centrifugar por 1min. a 3000rpm. 5. Descartar el sobrenadante y realizar este procedimiento por 2 ocasiones más. 6. Añadir una gota (50ul) de reactivo Anti- A1Lectin en el tubo marcado A1 y una gota del Anti-A en el tubo marcado A. AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 78 UNIVERSIDAD DE CUENCA 7. Centrifugar por 1min. a 3000rpm. 8. Resuspender con cuidado los eritrocitos y observar macroscópicamente si se produce aglutinación. Subgrupo=A1 Grupo=A AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. Subgrupo=AS Grupo=A 79 UNIVERSIDAD DE CUENCA Subgrupo=AS Grupo=AB As y A1 AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 80
