EL LABORATORIO EN LA INFERTILIDAD MASCULINA
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EL LABORATORIO EN LA INFERTILIDAD MASCULINA Bioq. Lorena K. López Bioq. Fernando Smithuis HOSPITAL “Dr. CARLOS G. DURAND” INFERTILIDAD Incapacidad de una pareja sexualmente activa y que no utiliza contracepción, para lograr el embarazo en el transcurso de un año. HOSPITAL CARLOS G. DURAND “10 % de las parejas en edad reproductiva son infértiles” ( OMS, 1999) 30 % factor masculino 35 % factor femenino 20 % compartido 15 % sin causa aparente HOSPITAL CARLOS G. DURAND CAUSAS DE INFERTILIDAD MASCULINA 50% desconocidas Causas conocidas: • • • • • • • • • • Varicocele Déficit de gonadotrofinas Alteraciones genéticas Obstrucción de conductos excretores Tóxicos del medio ambiente, alcohol, drogas, medicamentos, radiación, quimioterapia. Enfermedades sistémicas Infecciones: sistémicas y genitales. Alteraciones neurológicas Impotencia Enfermedades autoinmunes HOSPITAL CARLOS G. DURAND EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Estudios complementarios HOSPITAL CARLOS G. DURAND EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Cuestionario Examen Físico Estudios solicitados al laboratorio Estudios complementarios HOSPITAL CARLOS G. DURAND EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Cuestionario Examen Físico Estudios solicitados al laboratorio Estudios complementarios HOSPITAL CARLOS G. DURAND CUESTIONARIO Antecedentes personales: Edad Ocupación anterior y actual Infecciones Tóxicos Criptorquidia Traumatismos Antecedentes familiares: De esterilidad Interrogatorio de sexualidad: Frecuencia de relaciones sexuales Eyaculación, erección, libido HOSPITAL CARLOS G. DURAND CUESTIONARIO Antecedentes personales: Calor Edad Insecticidas Ocupación anterior y actual Químicos Infecciones Radiaciones Tóxicos Criptorquidia Traumatismos Antecedentes familiares: De esterilidad Interrogatorio de sexualidad: Frecuencia de relaciones sexuales Eyaculación, erección, libido HOSPITAL CARLOS G. DURAND CUESTIONARIO Antecedentes personales: Edad Paperas Ocupación anterior y actual Orquitis Infecciones Epididimitis Tóxicos Prostatitis Venéreas Criptorquidia Traumatismos Antecedentes familiares: De esterilidad Interrogatorio de sexualidad: Frecuencia de relaciones sexuales Eyaculación, erección, libido HOSPITAL CARLOS G. DURAND CUESTIONARIO Antecedentes personales: Edad Ocupación anterior y actual Tabaco Infecciones Alcohol Tóxicos Drogas de abuso Medicamentos Criptorquidia Quimioterapia Traumatismos Antecedentes familiares: De esterilidad Interrogatorio de sexualidad: Frecuencia de relaciones sexuales Eyaculación, erección, libido HOSPITAL CARLOS G. DURAND CUESTIONARIO Antecedentes personales: Edad Ocupación anterior y actual Infecciones Tóxicos Criptorquidia Traumatismos Antecedentes familiares: De esterilidad Interrogatorio de sexualidad: Frecuencia de relaciones sexuales Eyaculación, erección, libido HOSPITAL CARLOS G. DURAND EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Cuestionario Examen Físico Estudios solicitados al laboratorio Estudios complementarios HOSPITAL CARLOS G. DURAND EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Cuestionario Examen Físico Estudios solicitados al laboratorio Estudios complementarios HOSPITAL CARLOS G. DURAND EXAMEN FISICO Grado de virilización: Proporciones anatómicas Pene Escroto Tamaño testicular Pilosidad Presencia de ginecomastia Presencia de varicocele HOSPITAL CARLOS G. DURAND EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Espermograma Pruebas funcionales Perfil hormonal Estudios complementarios HOSPITAL CARLOS G. DURAND EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Espermograma Pruebas funcionales Perfil hormonal Estudios complementarios HOSPITAL CARLOS G. DURAND FISIOLOGIA VESICULAS SEMINALES PROSTATA GLANDULAS BULBOURETRALES CONDUCTOS DEFERENTE Y EYACULADOR Transporte de Z EPIDIDIMO Desarrollo y maduración Almacenamiento TESTICULOS Espermatogénesis Producción de andrógenos HOSPITAL CARLOS G. DURAND EL ESPERMATOZOIDE Cola Pieza terminal Pieza media Cabeza HOSPITAL CARLOS G. DURAND SEMEN Espermatozoides suspendidos en las secreciones del testículo, epidídimo, próstata, vesículas seminales y glándulas bulbouretrales, que se mezclan en el momento de la eyaculación. HOSPITAL CARLOS G. DURAND EL EYACULADO NORMAL 1ª Porción HOSPITAL CARLOS G. DURAND 5 – 10 % pH Alcalino Mucoproteínas 2ª Porción 15-30 % pH Acido Enzimas, Zn, Ac cítrico 3ª Porción 70-80 % pH Alcalino Espermatozoides Sust. Nutricionales TOMA DE MUESTRA Abstinencia de 3 a 5 días Masturbación Recipiente adecuado Evitar perder muestra Traslado: Tiempo Temperatura HOSPITAL CARLOS G. DURAND ESPERMOGRAMA • Examen Macroscópico • Examen Microscópico • Bioquímica del plasma seminal HOSPITAL CARLOS G. DURAND EXAMEN MACROSCOPICO Volumen pH Viscosidad Color Aspecto Licuefacción HOSPITAL CARLOS G. DURAND VOLUMEN Valores de Referencia: 2 – 6 ml Hipospermia: < 2 ml Hiperespermia: > 6 ml Aspermia: Ausencia de Eyaculado HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 pH Valores de Referencia: 7,2 – 8,0 pH>8.0 Falla Prostática pH<7.2 Agenesia de conductos deferentes Ausencia de vesículas seminales HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 VISCOSIDAD Goteo libre desde pipeta Filamento < 2cm Filancia con varilla de vidrio Filamento < 5 cm Aumentada Difícil manejo de la muestra Relación con astenospermia HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 COLOR / ASPECTO Blanco Opalescente Traslúcido HOSPITAL CARLOS G. DURAND Amarillento Turbio Piospermia OMS 1999 LICUEFACCION Normal Antes de los 60 minutos Incompleta Presencia de coágulos después de 60 minutos HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 ESPERMOGRAMA • Examen Macroscópico • Examen Microscópico • Bioquímica del plasma seminal HOSPITAL CARLOS G. DURAND EXAMEN MICROSCOPICO Movilidad Viabilidad Recuento de Espermatozoides Células Peroxidasa + Morfología HOSPITAL CARLOS G. DURAND MOVILIDAD En fresco sobre platina termostatizada Grados a b c d Movilidad lineal rápida. > 25 µm / seg. Movilidad no lineal o lineal lenta. Movilidad in situ. < 5 µm / seg. Inmóviles. HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 Movilidad normal: Grado a > 25 % ó Grado a + b > 50 % HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 Astenospermia: Grado a < 25 % ó Grados a + b < 50 % OMS 1999 ASAC: ANALISIS SEMINAL ASISTIDO POR COMPUTADORA • • • • • • • • • VCL: vel. curvilínea VSL: vel. rectilínea VAP: vel. promedio ALH: amplitud de desplazamiento LIN: linealidad WOB: oscilación STR: rectitud BCF: frecuencia de cruce MAD: desplazamiento angular VIABILIDAD Test de Eosina: Colorea los espermatozoides muertos Normal HOSPITAL CARLOS G. DURAND Más del 50 % de espermatozoides vivos OMS 1999 RECUENTO DE ESPERMATOZOIDES Dilución en cámara de Neubauer 20x106/ml o 40x106/eyac. Polizoospermia Criptozoospermia Azoospermia Oligozoospermia OMS 1999 CELULAS PEROXIDASA POSITIVA Coloración con Bencidina – Cianocina – H2O2 Leucospermia.> 1.000.000 C Pox + / ml Zona gris > 600.000 C Pox + / ml HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 MORFOLOGIA Normospermia > 30 % normales Giemsa Papanicolaou HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 MORFOLOGIA Defectos de Cabeza HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 MORFOLOGIA Defectos de cuello y pieza media HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 MORFOLOGIA Defectos de cola HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 ESPERMOGRAMA ESPERMOGRAMA • Examen Macroscópico • Examen Microscópico • Bioquímica del plasma seminal HOSPITAL CARLOS G. DURAND BIOQUIMICA DEL PLASMA SEMINAL Fructosa Ácido Cítrico α Glucosidasa Prostaglandinas Fosfatasa Ácida Prostática Zinc HOSPITAL CARLOS G. DURAND BIOQUIMICA DEL PLASMA SEMINAL Fructosa Prostaglandinas HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 BIOQUIMICA DEL PLASMA SEMINAL Ácido Cítrico Fosfatasa Acida Prostática Zinc HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 BIOQUIMICA DEL PLASMA SEMINAL α Glucosidasa HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Espermograma Pruebas funcionales Perfil hormonal Estudios complementarios HOSPITAL CARLOS G. DURAND EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Espermograma Pruebas funcionales Perfil hormonal Estudios complementarios HOSPITAL CARLOS G. DURAND PRUEBAS FUNCIONALES MAR Test/Immunobeads Swim Up Test Hiposmótico Test de Heterogeneidad Cromatínica HOSPITAL CARLOS G. DURAND MAR TEST / IMMUNOBEADS Factor Inmunológico presente: > 50 % Espermatozoides móviles unidos a GR HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 MAR TEST / IMMUNOBEADS Factor Inmunológico presente: > 50 % Espermatozoides móviles unidos al Immunobead HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 SWIM UP Mejoramiento funcional Etapa seleccionadora Previa a una inseminación artificial HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 PRUEBAS FUNCIONALES Test Hiposmótico: Evalúa la integridad anátomo funcional de la membrana plasmática. Test de Heterogeneidad cromatínica: Determina el estado e integridad de la cromatina nuclear. HOSPITAL CARLOS G. DURAND OMS 1999 EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Espermograma Pruebas funcionales Perfil hormonal Estudios complementarios HOSPITAL CARLOS G. DURAND EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Espermograma Pruebas funcionales Perfil hormonal Estudios complementarios HOSPITAL CARLOS G. DURAND PERFIL HORMONAL FSH LH Testosterona Testosterona Libre SHBG To biodisponible Índice de Testosterona bio Prolactina TSH HOSPITAL CARLOS G. DURAND EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Estudios complementarios Microbiológico HOSPITAL CARLOS G. DURAND Imágenes Biopsia EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Estudios complementarios Microbiológico HOSPITAL CARLOS G. DURAND Imágenes Biopsia EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Estudios complementarios Microbiológico HOSPITAL CARLOS G. DURAND Imágenes Biopsia EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Estudios complementarios Microbiológico HOSPITAL CARLOS G. DURAND Imágenes Biopsia HISTORIA CLINICA Varón, 31 años Busca fertilidad hace 2 años EXAMEN FISICO: Genitales: SP Volumen testicular: Derecho: 18 ml ( VN: 15 ml ) Izquierdo: 10 ml Se solicita: Cordón testicular izquierdo engrosado Mamas: SP ESPERMOGRAMA Peso y talla: N DOPPLER Androgenización: N FUNICULAR Frecuencia de relaciones sexuales: 2-3/semana BILATERAL Antecedentes familiares: No Cirugías: No MUJER: Ciclos regulares – Sin factor tuboperitoneal – Aparentemente sin trastornos reproductivos – No infección – Hormonas: dentro de valores de referencia HOSPITAL CARLOS G. DURAND HISTORIA CLINICA E S P E R M O G R A M A Inicial VOLUMEN 2.2 mL PH >8 VISCOSIDAD Aumentada LICUEFACCION Parcial, 60 min MOVILIDAD 44% Ga:8%,Gb:30%,Gc:6% Inmóviles: 56% CONCENTRACION 18 millones/ml CPO+ 0.66 millones/ml MORFOLOGIA NORMALES: 11% FRUCTOSA 65 µmol/eyaculado ACIDO CITRICO 90 µmol/eyaculado DOPPLER FUNICULAR BILATERAL: Positivo GII en testículo izquierdo Se solicita: 1º chorro de orina y semen para investigación gérmenes comunes, Chlamydia y Ureaplasma, y PERFIL HORMONAL HOSPITAL CARLOS G. DURAND HISTORIA CLINICA EXAMEN MICROBIOLOGICO: 1º CHORRO: NEGATIVO SEMEN: POSITIVO: Ureaplasma urealyticum PERFIL HORMONAL: LH: 4.0 mUI/ ml FSH: 4.2 mUI/ ml PRL: 10 ng/ ml To: 5.1 ng/ ml Estradiol: 48 pg/ ml HOSPITAL CARLOS G. DURAND Se indica tratamiento con vibramicina a la pareja, coito condomatoso y cultivo a los 30 días postratamiento HISTORIA CLINICA Inicial 30 días VOLUMEN 2.2 mL 2.4 mL PH 8 8 VISCOSIDAD Aumentada NORMAL LICUEFACCION Parcial, 60 min Total, 60 min MOVILIDAD 44% 48% Ga: 8%, Gb:30%,Gc:6% Ga: 10%, Gb:32%,Gc:6% Inmóviles: 56% Inmóviles: 52% CONCENTRACION 18 millones/ml 17 millones/ml CPO+ 0.66 millones/ml 0.08 millones/ml MORFOLOGIA NORMALES: 11% NORMALES: 14% FRUCTOSA 65 µmol/eyaculado 60 µ mol/eyaculado ACIDO CITRICO 90 µ mol/eyaculado 87 µ mol/eyaculado HISTORIA CLINICA EXAMEN MICROBIOLOGICO: 1º CHORRO: NEGATIVO SEMEN: NEGATIVO Se sugiere cirugía por dolor repetido de testículo izquierdo, alteraciones seminales, e hipotrofia leve Repetir ESPERMOGRAMA a los 6 y 9 meses HOSPITAL CARLOS G. DURAND Inicial 30 dias 6 meses VOLUMEN 2.2 2.4 2.3 ml PH 8 8 8 VISCOSIDAD Aumentada NORMAL NORMAL LICUEFACCION Parcial, 60 min Total, 60 min Total, 60 min MOVILIDAD 44% Ga:8%,Gb:30%, Gc:6% Inmóviles:56% 48% Ga: 10%, Gb:32%, Gc:6% Inmóviles:52% 57% Ga:20%,Gb:32%, Gc:5% Inmóviles:43% CONCENTRA CION 18 Millones/ml 17 Millones/ml 27 Millones/ml CPO+ 0.66 Millones/ml 0.08 Millones/ml 0.04 Millones/ml MORFOLOGIA NORMALES: 11% NORMALES: 14% NORMALES: 31% FRUCTOSA 65 µ mol/eyaculado 60 µmol/eyaculado 57 µmol/eyaculado ACIDO CITRICO 90 µ mol/eyaculado 87 µmol/eyaculado 77 µmol/eyaculado HISTORIA CLINICA Reporta EMBARAZO a los 8 meses post cirugía HOSPITAL CARLOS G. DURAND CONCLUSIONES El espermograma y los tests de funcionalidad espermática contribuyen a determinar la etiología de la infertilidad masculina. El mejoramiento del semen in vitro constituye una herramienta terapéutica sumamente útil en las Técnicas de Fertilización Asistida de Baja Complejidad. HOSPITAL CARLOS G. DURAND El único modo fidedigno de comprobar la capacidad fecundante de un varón es el embarazo. HOSPITAL CARLOS G. DURAND Muchas Gracias por su Atención H. G. A. C. G. Durand [email protected]
