UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2000 Propóleos: alternativa en el control biológico de patologías fungosas de las plantas cultivadas Sosa López, Angela A. - Cabrera, María G. - Alvarez, Roberto E. Ramírez, Silvia S. - Rolin, Héctor D. Cátedras de Fitopatología; Química Orgánica y Biológica - Facultad de Ciencias Agrarias - UNNE. Sargento Cabral 2131 - (3400) Corrientes - Argentina. E-mail: [email protected] ANTECEDENTES El propóleos es un conjunto de sustancias gomosas y resinosas de color verde, pardo, castaño, rojizo o negro de acuerdo a su origen. La palabra propóleos, deriva de los términos Griegos “pro” que significa: delante de y “polis”: ciudad. Las abejas lo recolectan los días calurosos y lo utilizan en la colmena con fines desinfectantes, tapar grietas para evitar así el frío durante el invierno y el calor excesivo en el verano, cumpliendo una función de aislante térmico (6). En su composición se han identificado ácidos alifáticos y ésteres que provienen de las ceras de las abejas. También ácidos arómaticos (ácidos benzoico, ferúlico, cafeico) y sus ésteres. Estos tienen su origen en las yemas vegetales y muchos de sus componentes tienen propiedades antifúngicas y antibacterianas, fitoinhibidora o antigerminativa (ac. benzoico y ac. p-cumárico), acción hemostática o coagulante (ác. ferúlico).(1,8) Se ha detectado efecto alergénico de algunos de sus componentes, entre los que podemos mencionar el cafeato de prenyl, flavononas y flavonas cuyo origen se encuentra en los exudados vegetales que poseen elevada actividad biológica con más de 40 funciones terapéuticas reconocidas (11) Los terpenoides y otros compuestos tambièn provienen de los vegetales y son los responsables del olor del propóleos, además de conferirles propiedades antimicóticas y anestésicas (2). En los estudios realizados el año anterior comprobamos la eficiencia del propóleos en las cepas de Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Sacc., utilizando extracto etanólico al 1%. Con estos antecedentes se propuso como objetivo determinar la acción fungicida in vitro y a campo de las soluciones de Propóleos. MATERIALES Y MÈTODOS Para el estudio in vitro se trabajó con extracto etanólico al 10% de propóleos provenientes de Corrientes, Chaco y Misiones. Se realizaron aislamientos de cepas de Colletotrichum gloesporoides (Penz) Sacc, agente causal de las enfermedades llamadas comunmente antracnosis.(3,6) Las cepas de Colletotrichum gloesporiodes se aislaron de plantas enfermas de Syngonium phodofillum, Aglaonema spp., Anthurium spp. Para probar las propiedades antifungicas del propóleos se hicieron pruebas in vitro en laboratorio, seleccionando dos de las cepas de C. gloesporiodes que se sembraron en el medio donde previamente se inoculó la resina. Para ello se prepararon diluciones al 10 % en alcohol etílico de 96 G.L. que se conservaron a temperatura ambiente, en lugar oscuro durante tres días agitándolos periódicamente. De cada una de esas soluciones se tomo 1 ml y se sembraron en cajas de Petri, dejando evaporar el alcohol bajo flujo laminar, se procedió luego a agregar el medio con agar , y posteriormente se sembró el inóculo del hongo, incubàndose en laboratorio bajo luz cercana al UV durante siete días, realizàndose observaciones diarias del desarrollo fúngico. En un cultivo de tomates [Licopersicum esculentun (Mill) Nym] del invernáculo de la cátedra en la facultad de Ciencias Agrarias se presentó un fuerte ataque de “moho de la hoja”, cuyo agente causal es Fulvia fulva (Cooke) Ciferri, situación que nos indujo a realizar una aspersión experimental con una solución de propóleos al 50%, procedente de campos vírgenes de la Provincia de Misiones; estas plantas presentaban un alto grado de infección. UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2000 En otras en cambio se inoculó el patògeno y luego se las roció con la solución. De este lote de plantas, algunas se pasaron al suelo, otras se dejaron en macetas. DISCUSION DE RESULTADOS En los cultivos in-vitro el propóleos que mejor controló a Colletotrichun gloesporiodes (Penz.) Sacc., fuè el procedente de Saladas, Corrientes pero en todos los casos el desarrollo de los hongos no avanzó (7,10). Durante el trabajo eexperimental en invernàculo, un grupo de plantas adyacentes se contagiaron accidentalmente y, al cabo de siete días comenzaron a manifestar los síntomas típicos de Fulvia. (Fig. 1). Fig. 1 Plantas de tomate cafectadas por el moho de la hoja con infecciòn accidental. De acuerdo a lo observado en el invernáculo el propóleos detuvo la enfermedad en las plantas ya infectadas e impidió el desarrollo de la enfermedad. (Fig. 2). Y las plantas inoculadas no desarrollaron la enfermedad Los síntomas característicos del “moho de la hoja” son áreas cloróticas en el haz de las hojas de tomate. En el envés, bajo esas áreas descoloridas se observa el signo de la enfermedad, constituido por micelios, conidióforos y conidios del hongo, al principìo de color gris claro, que posteriormente, se torna oliváceo a pardo. La penetración de los tubos de germinación se produce a través de los estomas y el micelio del hongo desarrolla intercelularmente en los tejidos del hospedantes. Su breve incubación en un período de 10 - 14 días, la hace una enfermedad potencialmente muy peligrosa, dependiendo sus perjuicios de las condiciones ambientales. Los ataques se inician en las hojas inferiores. Las hojas con síntomas graves empardecen y caen produciendose defoliación acentuada. La sobrevivencia de Fulvia fulva se produce en restos de hojas infectadas, y estructuras de los invernaderos. Los factores determinantes de enfermedades son, la humedad (HR) que debe estar sobre 70%, y temperatura elevada. UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2000 La diseminación se produce por las corrientes de aire. Agente patógeno Fulvia fulvia (Cooke)Ciferri. Único miembro del género, se caracteriza por presentar conidióforos coloreados, con dilataciones nudosas. De ellas pueden proliferar ramificaciones laterales cortas, que producen conidios concatenados. En la experiencia con tomate el propóleos de la provincia de Corrientes, Chaco y Misiones se comportó como antifúngico y fungistático no permitiendo la infección en un caso y deterniendola en el otro. Al trabajar con extracto etanólico al 10 %, tal cual lo manifestado por los investigadores Maidana y Maldonado (3,9) se observo el potencial del propóleos en el control fúngico. Todos los propóleos en mayor o menor medida detuvieron el crecimiento del hongo Colletotrichum gloesporiodes. El extracto acuoso que solo disuelve parte de los principios activos del Propóleos, controlo eficazmente el moho de la hoja. Debido al éxito obtenido en el control de enfermedades fungosas es importante desarrollar trabajos con distintas dosis de propóleos y patógenos de manera de lograr una concentración adecuada del producto que permita controlar las enfermedades a menor costo de esta manera. Figura Nº2. Plantas de tomate tratadas con propoleos. CONCLUSIONES De acuerdo a los resultados obtenidos en este trabajo, con Fulvia fulva y al éxito en el control de Colletotrichum gloesporoides, tanto in-vitro como a campo, se concluye que, el propóleos se un biocontrolador antifúngico eficaz. El uso del propóleos podrá extenderse de igual forma para controlar otros patógenos de especies agrícolas. Los trabajos experimentales llevados a cabo por el grupo interdiciplinario participante, nos lleva aconcluir ademàs que, el propóleos es potencialmente un biocontrolador con el cual se lograrà una agricultura creciente y sostenible en armonía con el medio ambiente, dándole mayor valor agregado a nuestros productos hortícolas UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2000 si tenemos en cuenta que los mercados internacionales demandan cada dìa en mayor medida productos alimenticios netamente orgánicos. AGRADECIMIENTOS Se agradece al Señor G. Cristiani por la valiosa colaboracion prestada para montaje de este trabajo. BIBLIOGRAFIA 1. Asis, M. “Apiterapia para todos”. Instituto cubano del libro. Editorial Científico técnico del medio. Ciudad de la Habana Cuba (1996) 2. Bedascarrasbure, E .L.; Lorenzo, Alfonso; Figini, E. “Curso de Formación de Promotores Apícolas del NEA”. (1998-1999) 3. Bedascarrasbure, E. L.; Fierro Morales, W.; Maldonado, L.; Maidana, J.; Bracho Pérez, J. C.; Alvarez, A. “Propóleos Argentinos”. El propóleos un valioso producto apícola. Serie: Actualización – Nº: I. Abril de 1999 (a) 4. Bedascarrasbure, E. L.; Fierro Morales, W.; Maldonado, L.; Maidana, J.; Bracho Pérez, J. C.; Alvarez, A. “Propóleos Argentinos”. El mercado de propóleos y la estrategia argentina. Serie: Actualización – Nº: II. Abril de 1999 (b) 5. Bedascarrasbure, E. L.; Fierro Morales, W.; Maldonado, L.; Maidana, J.; Bracho Pérez, J. C.; Alvarez, A. “Propóleos Argentinos”. Producción, Cosecha y Almacenamiento de propóleos. Serie: Actualización – Nº: III. Abril de 1999 (c) 6. Bianchi, E. M. “Calidad del propóleos”. C.E.D.I.A. – Santiago del Estero. Argentina.(1996) 7. Castillo, A. E.; Sosa López, A. A. ; Subovsky, M. J. “Calidad de propóleos de distintas regiones”. XXI Congreso Argentino de Química. Pág. 414. Bahía Blanca. (1996) 8. González Guerra, Ana; Bernal Méndez, Roberto “Propóleos un camino hacia la salud” La Habana Cuba (1997) 9. Maidana, ,J .F. ”Características físicas del propóleos, en relación a su procedencia y origen vegetal”. Centro de Investigaciones Apícolas –CEDIA-UNSE. (1997). 10. Primera Jornada Internacional de Propóleos. Organizado por la Facultad de Agronomía de Buenos Aires. 15 de Mayo de 1998 11. Stangaciu S. “Propóleos”. “ Su uso en medicina”. Cuba (1997)