tiras para orina urin

Tiras reactivas para Urianálisis
（Orina）
Folleto
URIN-1
URIN-2
URIN-3
URIN-5
URIN-10
URIN-11
Para la detección rápida de distintos analitos en orina humana.
Para diagnósticos in vitro únicamente.
USO INDICADO
Las tiras reactivas de urianálisis (orina) son tiras de plástico en las cuales se han fijado
parámetros en áreas separadas de reactivos. El examen sirve para la detección cualitativa y
semicuantitativa de uno o más de de los siguientes analitos en orina: Acido Ascórbico, Glucosa,
Bilirrubina, Cuerpos Cetónicos, (ácido acetoacético), Gravedad Específica, Sangre, pH, Proteínas,
Urobilinógeno, Nitritos y Leucocitos.
RESUMEN
p-arsanílico para formar un compuesto diazónico. El compuesto diazónico forma un complejo
con 1N-(1-naptil)-etilenediamine para producir un color rosado. No se puede detectar nitrito en
orina sana normal.9 El area de nitritos será positiva en algunos casos de infección, dependiendo
del tiempo en que las muestras de orina fueron retenidas en la vejiga antes de la toma de
muestras . La recuperación de casos positivos con los rangos de la prueba de nitritos van, desde
tan bajos como 40% en los casos en que la incubación en la vejiga ha sido pequeña, hasta tan
altos como 80%, en los casos en que la incubación en la vejiga son de por lo menos durante 4
horas.
Leucocitos: Esta prueba revela la presencia de granulocito esterasas. Las esterasas se unen a un
derivado ester pirazol amino ácido para liberar derivados del hidroxi pirazol. Este pirazol luego
reacciona con una sal diazónica para producir una coloración beige-rosada a púrpura. Las
muestras normales de orina generalmente dan un resultado negativo. Resultados con trazas
de leucocitos pueden ser de significación clínica. Cuando se dan resultados de trazas, se
recomienda hacer un nuevo examen utilizando una muestra fresca del mismo paciente. Trazas
repetidas y resultados positivos tienen significación clínica.
REACTIVOS Y PERFORMANCE
Basado en el peso seco al tiempo de impregnación, las concentraciones dadas pueden variar
entre las tolerancias fabricadas. La siguiente tabla marca tiempos y funcionamiento
característicos de cada parámetro.
La composición de la orina se modifica durante periodos de enfermedad o disfunción corporal,
antes que estos cambios afecten la composición de la sangre . El Urianálisis es un procedimiento
útil como indicador de Salud o Enfermedad, y por lo tanto, es una parte de screening rutinario
para la salud. Las tiras reactivas de Urianálisis (orina) pueden ser usadas para una evaluación
general de la salud, y como ayuda en el diagnóstico y monitoreo de enfermedades metabólicas o
sistémicas que afectan la función renal, desordenes endocrinos y enfermedades o desordenes del
tracto urinario. 1,2
Reactivo
Acido
Ascórbico
(ASC)
Glucosa
(GLU)
PRINCIPIOS Y VALORES ESPERADOS
Acido Ascórbico: Este examen se basa en la decoloración del reactivo de Tillmann. La
presencia de ácido ascórbico produce que el color del campo del examen cambie de
azul-verdoso a naranja.
Glucosa: Este examen se basa en la reacción enzimática que ocurre entre la glucosa oxidasa,
peroxidasa y el cromógeno. En presencia de glucosa oxidasa la glucosa se oxida produciendo
ácido glucónico.El peróxido de hidrógeno primero reacciona con el cromógeno de potasio
yoduro en la presencia de la peroxidasa. La extensión en que el cromógeno es oxidado determina
el color que se produce en un rango de verde a marrón. La glucosa no debe ser detectada en
orina normal.Pequeñas cantidades de glucosa pueden ser excretadas por el riñón.3
Concentraciones de glucosa tan bajas como 100mg/dl pueden considerarse anormales si los
resultados son consistentes.
Bilirrubina: Esta prueba está basada en la reacción de azo-copulación de bilirrubina con la
dicloroanilina diazotizada en un medio ácido fuerte. La variación de los niveles de bilirrubina
produce un color rosado-tostado proporcional a la concentración en orina. En orina normal no se
detecta bilirrubina ni siquiera con métodos muy sensibles. Incluso trazas de bilirrubina requieren
una mayor investigación. Resultados atípicos (colores diferentes desde el negativo hasta el
color positivo que muestra la gráfica de colores) pueden indicar que los pigmentos biliares
derivados de la bilirrubina están presentes en la muestra de orina y que posiblemente están
enmascarando la reacción de la Bilirrubina.
Cuerpos Cetónicos: Este examen está basado en la reacción de los cuerpos cetónicos con los
ácidos nitroprusiato y acetoacético para producir un cambio de color que va desde un rosado
pálido para resultados negativos, hasta un rosado oscuro o color púrpura para resultados
positivos. Los cuerpos cetónicos normalmente no se encuentran presentes en la orina.Niveles
detectables de cuerpos cetónicos pueden darse en orina en condiciones de tensión fisiológica
como ayuno, embarazo y ejercicios extenuantes.4-6
Durante dietas extremas, o en algún otra situación anormal de metabolismo carbohidrato los
cuerpos cetónicos aparecen en la orina en concentraciones excesivamente altas antes de que los
cuerpos cetónicos se eleven en el suero.7
Gravedad Específica: Esta prueba está basada en el aparente cambio pKa de algunos
polielectrolitos pretratados en relación a la concentración de iones. En presencia de un indicador,
el color varía de azul oscuro-verde en orina de baja concentración, a verde y verde amarillento
en orina de alta concentración de iones. Orina recogida al azar puede variar en su gravedad
específica de 1,003-1,035.8 Orina de 24 horas recogida de adultos sanos con dieta normal y
alimento fluido debe tener una gravedad específica de 1,016-1,022. 8 En casos de daño renal
severo, la gravedad específica se fija en 1,010 del glomerulado filtrado.
Sangre: Esta prueba se basa en la actividad peroxidásica de la hemoglobina que cataliza la reacción
del di-isopropilbenceno dihidroperóxido y la 3,3 ', 5,5'-tetrametilbenzidina.Los rangos de colores
resultantes van de naranja a verde a azul oscuro. Cualquier mancha verde o el desarrollo de un color
verde en el área reactiva en 60 segundos es significativo y la muestra de orina debe seguir siendo
examinada.Frecuentemente se puede encontrar sangre, aunque no siempre,en mujeres durante la
menstruación.El significado clínico de los resultados muy débiles varía según el paciente y
precisándose el dictamen clínico de las muestras.
pH: Esta prueba se basa un sistema de indicador doble que permite una amplia gama de colores
y que cubre todo el rango de pH. La gama de colores va desde naranja a amarillo y desde verde a
azul. El rango esperado para muestras de orina normal en neonatos es de pH 5-7.9 El rango
esperado para otras personas normales es de pH 4,5-8, con un resultado promedio de pH 6.9
Proteinas: Esta reacción está basada en el fenómeno conocido como “error proteico” de
indicadores de pH donde un indicador que es altamente saturado con tampón cambiará de color
en la presencia de proteinas (aniones) al mismo tiempo el indicador libera iones de hidrógeno a
la proteina. A un constante pH el desarrollo de cualquier verde se debe a la presencia de proteina.
El rango de colores va de amarillo a amarillo-verde para resultados negativos y de verde a verdeazulado para resultados positivos. Un riñón normal puede evacuar 1-14 mg/dl de proteinas.10 Un
color correspondiente a un recuadro más oscuro indica proteinuria significativa. Se requiere de
un juicio clínico para evaluar el significado de un resultado de trazas.
Urobilinógeno: Este examen está basado en una reacción de Erlich modificada entre
p-dietilaminobenzaldehido y urobilinógeno en un medio fuertemente ácido para que
produzca un color rosa.El Urobilinógeno es uno de los mayores compuestos producido en
hemosíntesis y es una sustancia normal en la orina. El rango normal esperado en orina con esta
prueba es 0,2-1,0 mg/dl (3,5-17 µmol/l).8 Con un resultado de 2,0 mg/dl (35 µmol/l) la muestra
del paciente debe seguir evaluándose.
Nitritos: Esta prueba depende de la conversión de nitrato a nitrito, mediante la acción de
bacteria gram negativa en la orina. En un medio ácido, el nitrito en la orina reacciona con ácido
OSIS22-E
02/03/12
Bilirrubina
(BIL)
Tiempo
de
Lectura
Composición
2,6-Diclorofenolindofenol,
30
tampón e ingredientes
Segundos
no-activos.
glucosa oxidasa, peroxidasa,
30
Segundos ioduro potasio, tampón e
ingredientes no-activos.
Sal de diazonio
30
2,4-dicloroanilina; tampón e
Segundos
ingredientes no-activos.
Descripción
Detecta acido ascórbico desde
5-10 mg/dl (0,28-0,56 mmol/l).
Detecta glucosa desde 50-100
mg/dl (2,5-5 mmol/l).
Detecta bilirrubina desde
0,4-1,0 mg/dl (6,8-17 µmol/l).
Cuerpos
Cetónicos
(KET)
40
Sodio nitroprusiano, tampón.
Segundos
Detecta ácido acetoacético desde
2,5-5 mg/dl (0,25-0,5 mmol/l).
Gravedad
Específica
(SG)
indicador de azul de
bromtimol, tampón e
45
ingredientes no-activos. Poli
Segundos (anhidrido metil vinil
ester/maleico anhídrido),
hidróxido sódico.
Sangre
(BLO)
3,3’,5,5’-Tetrametilbenzidina
60
(TMB); diisopropilbenzeno
Segundos
dihidroperóxido
Determina la gravedad
específica entre 1,000-1,030.
Los resultados correlativos con
los valores obtenidos por el
método del Index refractario
entre ±0,005.
Detecta hemoglobina libre
desde 0,018-0,060 mg/dl o
5-10 Ery/µl en muestras de
orina con, contenido de ácido
ascórbico de <50 mg/dl.
Permite la diferenciación cuantitativa de valores de pH entre el
Rango de 5-9.
Rojo metilo, sal sódica, azul
60
de bromtimol, tampón e
Segundos ingredientes no-activos
Azul de tetrabromofenol,
Proteinas
60
tampón e ingredientes
(PRO)
Segundos
no-activos
p-dietilaminobenzaldehida,
Urobilinógeno
60
tampón e ingredientes
(URO)
Segundos
no-activos
pH
Nitritos
(NIT)
Leucocitos
(LEU)
OBTENCION Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
La muestra debe ser recogida en un recipiente limpio y seco y examinado lo antes posible. No
centrifugar. No se recomienda usar conservantes para orina. Si la prueba no se puede hacer en el
transcurso de una hora después de haber sido recogida, refrigerar la muestra inmediatamente y
atemperar a temperatura ambiente antes de examinarla.
El almacenamiento prolongado de orina a temperatura ambiente puede dar lugar a
contaminación microbiana, con resultados de cambios en el pH. Un desvío hacia pH alcalino,
puede dar un resultado falso positivo en la lectura de la proteina. La orina conteniendo glucosa
puede decrecer en su pH cuando el organismo metabolice la glucosa.
Una contaminación de la muestra de orina con limpiadores que contengan clorohehidina puede
afectar los resultados del examen de proteina y en menor grado el de gravedad específica y el de
bilirrubina.
MATERIALES
Materiales Suministrados
 Tiras
 Folleto
Materiales Requeridos no Suministrados
 Recipiente para colectar la muestra
 Cronòmetro
INSTRUCCIONES DE USO
Permitir que la tira, muestra, y/o controles se encuentren a temperatura ambiente
(15-30°C) antes de realizar la prueba.
1. Retirar la tira del tubo cerrado y utilizarla lo antes posible. Cerrar de inmediato el tubo una
vez que se haya retirado el número de tiras necesarias. Sumergir por completo el área
reactiva de la tira en el recipiente conteniendo la orina fresca bien mezclada e
inmediatamente sacarla del recipiente para evitar que los reactivos se disuelvan. Vea figura
1 abajo.
2. Al retirar la tira de la orina, correr el filo de la tira contra el borde del recipiente de la orina
para desechar el exceso de orina. Sostener la tira en una posición horizontal y poner en
contacto el filo de la tira con un material absorbente (ej. toalla de papel) para evitar que los
productos se mezclen con reactivos de áreas adyacentes y/o se ensucien las manos con la
orina. Vea la figura 2 abajo.
3. Comparar las áreas reactivas con la correspondiente tabla de colores de la etiqueta del tubo
en el tiempo especificado. Sostener la tira cerca de la tabla de color y comparar
cuidadosamente. Vea figura 3 abajo.
Nota: Los resultados se pueden leer hasta 2 minutos después del tiempo especificado.
1
2
3
Detecta albúmina desde
7,5-15 mg/dl (0,075-0,15 g/l).
Detecta el urobilinógeno desde
0,2-1,0 mg/dl (3,5-17 µmol/l).
Detecta el nitrito de sodio desde
ácido p-arsanílico; N-(1-naftil) 0,05-0,1 mg/dl, en orina con una
60
etilenediamina, tampón e
gravedad específica baja y con
Segundos
ingredientes no-activos
menos de 30 mg/dl de ácido
ascórbico.
ácido pirrol amino ester
Detecta leucocitos desde 9-15
120
derivado, sal de diazonio,
glóbulos blancos Leu/µl en
Segundos tampón e ingredientes
orinas clínicas.
no-activos
La características y métodos del examen de Urianálisis en tiras (orina) han sido determinadas
mediante exámenes clínicos en Laboratorios. Para el usuario los parámetros de importancia son
la sensibilidad, especificidad, exactitud y precisión. Generalmente, estas pruebas han sido
desarrolladas para ser específicas para los parámetros que se indican con las excepciones de
interferencia que se mencionan.. Lea la sección de “Limitaciones” en este mismo folleto.
La interpretación visual de los resultados depende de diversos factores: La variabilidad de la
percepción del color, la presencia o ausencia de factores de inhibición, y las condiciones de luz
al leer la tira. Cada cuadro de color en la tabla corresponde a un rango de concentración
analítica.
PRECAUCIONES
Para diagnóstico in vitro únicamente. No utilizar después de la fecha de expiración.
La tira debe permanecer en el tubo hasta el momento de utilizarla.
No tocar las áreas reactivas de la prueba.
Descartar cualquier tira del tubo que se encuentre descolorida ya que puede estar deteriorada.
Todas las muestras deben considerarse potencialmente peligrosas y deben ser manipuladas,
como cualquier agente infeccioso.
 Las tiras utilizadas deben ser desechadas de acuerdo a las regulaciones locales después
del examen.
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
Almacenar los tubos en su envase original, ya sea a temperatura ambiente o refrigerados (2-30°C).
Guardarlos fuera del alcance de la luz solar. La tira es estable hasta su fecha de caducidad





indicada en la etiqueta del tubo. No remover el desecante. Sacar sólo las tiras que van a ser
usadas inmediatamente. NO CONGELAR. No utilice las tiras después de la fecha de
expiración.
Nota: Una vez que el tubo ha sido abierto por primera vez, el resto de las tiras tendrán una
estabilidad de tres meses. La estabilidad se puede ver reducida en condiciones de mucha
humedad.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Los resultados se obtienen por comparación directa con la tabla de colores.La tabla de colores
representa valores nominales, los valores actuales variarán cercanamente a los valores
nominales. En el caso de resultados inesperados o cuestionables, se recomiendan los siguientes
pasos: comprobar la fecha de caducidad del tubo impresa en la etiqueta, comparar los
resultados con controles positivos y negativos conocidos y repitir la prueba utilizando una
nueva tira. Si el problema persiste descontinuar el uso de las tiras de ese tubo y consultar con su
distribuidor local.
CONTROL DE CALIDAD
Para unos resultados óptimos, el funcionamiento correcto de las tiras debe ser confirmado
examinando muestras/controles de orina positivas y negativas conocidas, cada vez que se use un
envase nuevo de tiras. Cada laboratorio debe establecer sus propias especificaciones, para un
buen control del método.
LIMITACIONES
Nota: Las tiras reactivas de Urianálisis (orina) pueden verse afectadas por sustancias que
causan color anormal en la orina, como los medicamentos que contienen colorantes azoicos (por
ejemplo, Pyridium ®, Gantrisin Azo ®, Azo Gantanol ®), nitrofurantoína (Microdantin ®,
Furadantin ®), y riboflavin. El desarrollo de color en la prueba puede estar enmascarada o
producirse una reacción coloreada que podría interpretarse como un falso resultado.
Acido Ascórbico: No se conoce de ninguna interferencia.
Glucosa: El área reactiva no reacciona con lactosa, galactosa, fructosa u otras substancias
metabólicas, ni con metabolitos reducidos de drogas (ej: salicilatos y ácido nalidíxico). La
sensibilidad puede decrecer en muestras con alta densidad específica (>1,025) y con ácido
ascórbico en concentraciones ≥ 10 mg/dl.
Bilirrubina: La bilirrubina está ausente en orina normal, por lo que cualquier resultado positivo,
incluida una traza positiva, indica una condición patológica subyacente y requiere de una mayor
investigación. Las reaciones pueden ocurrir con orina que contenga largas dosis de
cloropromazina o rifampen, que podría ser confundida con bilirrubina positiva. La presencia de
pigmentos biliares puede enmascarar la reacción de bilirrubina. Este fenómeno se caracteriza por
el desarrollo de color en el área del examen diferente a los colores de la tabla. Altas
concentraciones de ácido ascórbico pueden restarle sensibilidad.
Cuerpos Cetònicos: La prueba no reacciona con acetona o β-hidroxibutirato. Muestras de orina
con pigmentación alta, y otras sustancias conteniendo grupos de sulfidril ocasionalmente dan
reacciones e incluyen señales (+).
Gravedad Específica: La cetoacidosis o proteinas altas con mas de 300 mg/dl, pueden causar
resultados elevados. Los resultados no son afectados por compuestos de orina no iónica como la
glucosa. Si la orina tiene un pH de 7 o más, añada 0,005 a la gravedad específica de la lectura
indicada en la tabla de colores.
Sangre: Un color azul uniforme es indicativo de la presencia de mioglobina, hemoglobina o
eritrocitos hemolizados. Dispersos o compactos las manchas azules son indicativas de eritrocitos
intactos. Para alcanzar una mayor exactitud, se dan escalas separadas de colores para
hemoglobina y eritrocitos. Los resultados positivos en esta prueba se encuentran frecuentemente
en mujeres durante su periodo menstrual. Se ha informado que orina de pH alta reduce la
sensibilidad, mientras que valores moderados o de alta concentración de ácido ascórbico inhibe
la formación de color. La peroxidasa microbiana, asociada con infección en el tracto urinario,
puede causar un resultado falso positivo. La prueba es ligeramente más sensible en la detección
de hemoglobina libre y mioglobina que para la detección de eritrocitos intactos.
pH: Si no se sigue el procedimiento correcto, un exceso de orina permanecerá en la tira, y un
fenómeno llamado “rebosamiento” puede ocurrir, mediante el cual el ácido del tampón del
reactivo de la proteina ingresará al área del pH causando que las lecturas del pH aparezcan
artificialmente bajas. Las lecturas de pH no son afectadas por la variación de la concentración
del tampón en la orina.
Proteinas: Cualquier color verde indica la presencia de proteina en la orina. Esta prueba es
altamente sensitiva para albúmina, y menos sensitiva para hemoglobina, globulina y
mucoproteina. Un resultado negativo no descarta la presencia de estas otras proteinas. Se pueden
obtener falsos positivos con orina muy tamponada u orina alcalina. La contaminación de
muestras de orina con compuestos de amonio cuaternario o limpiadores de la piel que contengan
clorohexadina pueden dar falsos positivos. Pruebas de orina con gravedad especifica alta pueden
dar resultados falsos negativos.
Urobilinógeno: Todos los resultados menores a 1mg/dl de urobilinógeno deben interpretarse
como normales. Un resultado negativo en ningún momento descarta la presencia de
urobilinógeno. El área reactiva puede reaccionar con sustancias que interfieran que son
conocidas por reaccionar con el reactivo de Ehrlich, como el ácido p-aminosalicìlico y
sulfamidas.Si existe presencia de formalina se pueden obtener resultados falsos negativos. La
prueba no debe utilizarse para detectar porfobilinógeno.
Nitritos: La prueba es específica para nitritos y no reaccionará con ninguna otra sustancia
normalmente excretada en la orina. Cualquier grado de color uniforme entre rosado y rojo debe
ser interpretado como un resultado positivo, implicando la presencia de nitritos. La intensidad de
color no es proporcional al número de bacterias presentes en la muestra de orina. Manchas
rosadas o bordes rosados no deben interpretarse como un resultado positivo. La comparación del
área de reacción en un fondo blanco puede ayudar en la detección de niveles bajos de nitrito, que
de otra forma no se podría hacer. Un ácido ascórbico mayor a 30 mg/dl puede causar resultados
negativos en orina conteniendo menos de 0,05 mg/dl de iones de nitrito. La sensibilidad del
examen se reduce en las muestras de orina con orina alcalina con elevados contenidos de tampón
o con gravedad específica alta. Un resultado negativo, de ninguna manera descarta la presencia
de bacteriuria. Se pueden dar resultados negativos cuando hay infecciones del tracto urinario de
organismos que no contienen el reductor para convertir nitrato a nitrito, cuando la orina no ha
sido retenida en la vejiga por un tiempo suficientemente largo (al menos 4 horas) para que se
realice la reducción del nitrato a nitrito, al recibir terapia de antibióticos o cuando el nitrato
dietético está ausente.
Leucocitos: Los resultados deben leerse entre 60-120 segundos para permitir que el color se
desarrolle completamente. La intensidad del color desarrollado es proporcional al número de
leucocitos presentes en la muestra de orina. Niveles altos de gravedad específica o de
concentración de glucosa (≥ 500 mg/dl) pueden ser la causa de que los resultados de la prueba
sean bajos. La presencia de cefalexina, cefalotina, o altas concentraciones de ácido oxalico
también pueden ser responsables de que los resultados de la prueba sean artificialmente bajos.
La tetraciclina puede causar una reacción decreciente, y altos niveles de droga pueden causar
falsos negativos. Altos niveles de proteina urinaria (≥ 500 mg/dl) podrían disminuir la
concentración de color. Esta prueba no reaccionará con eritrocitos o bacterias comunes en orina.
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SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: [email protected]
Urinalysis Reagent Strips (Urine)
Package Insert
URIN-1
URIN-2
URIN-3
URIN-5
URIN-10
URIN-11
For rapid detection of multiple analytes in human urine.
For in vitro diagnostic use only.
INTENDED USE
The Urinalysis Reagent Strips (Urine) are firm plastic strips onto which several separate
reagent areas are affixed. The test is for the detection of one or more of the following
analytes in urine: Ascorbic acid, Glucose, Bilirubin, Ketone (Acetoacetic acid), Specific
Gravity, Blood, pH, Protein, Urobilinogen, Nitrite and Leukocytes.
SUMMARY
Urine undergoes many changes during states of disease or body dysfunction before
blood composition is altered to a significant extent. Urinalysis is a useful procedure as
an indicator of health or disease, and as such, is a part of routine health screening. The
Urinalysis Reagent Strips (Urine) can be used in general evaluation of health, and aids
in the diagnosis and monitoring of metabolic or systemic diseases that affect
kidney
1,2
function, endocrine disorders and diseases or disorders of the urinary tract.
PRINCIPLE AND EXPECTED VALUES
Ascorbic acid: This test involves decolorization of Tillmann’s reagent. The presence of
ascorbic acid causes the color of the test field to change from blue-green to orange.
Glucose: This test is based on the enzymatic reaction that occurs between glucose
oxidase, peroxidase and chromogen. Glucose if first oxidized to produce gluconic acid
and hydrogen peroxide in the presence of glucose oxidase. The hydrogen peroxide
reacts with potassium iodide chromogen in the presence of peroxidase. The extent to
which the chromogen is oxidized determines the color which is produced, ranging from
green to brown. Low amounts of glucose are normally excreted in urine.3 Glucose
concentrations as low as 100 mg/dL, read at either 10 or 30 seconds, may be
considered abnormal if results are consistent. At 10 seconds, results should be
interpreted qualitatively. For semi-quantitative results, read at 30 seconds only.
Bilirubin: This test is based on azo-coupling reaction of bilirubin with diazotized
dichloroaniline in a strongly acidic medium. Varying bilirubin levels will produce a
pinkish-tan color proportional to its concentration in urine. In normal urine, no bilirubin is
detectable by even the most sensitive methods. Even trace amounts of bilirubin require
further investigation. Atypical results (colors different from the negative or positive color
blocks shown on the color chart) may indicate that bilirubin-derived bile pigments are
present in the urine specimen, and are possibly masking the bilirubin reaction.
Ketone: This test is based on ketones reacting with nitroprusside and acetoacetic acid
to produce a color change ranging from light pink for negative results to a darker pink or
purple color for positive results. Ketones are normally not present in urine. Detectable
ketone levels may occur in urine during physiological stress conditions such as fasting,
pregnancy and frequent strenuous exercise.4-6 In starvation diets, or in other abnormal
carbohydrate metabolism situations, ketones appear in the urine in excessively high
concentration before serum ketones are elevated.7
Specific Gravity: This test is based on the apparent pKa change of certain pretreated
polyelectrolytes in relation to ionic concentration. In the presence of an indicator, colors
range from deep blue-green in urine of low ionic concentration to green and
yellow-green in urine of increasing ionic concentration. Randomly collected urine may
vary in specific gravity from 1.003-1.040 . Twenty-four hour urine from healthy adults
8
with normal diets and fluid intake will have a specific gravity of 1.016-1.022 In cases of
severe renal damage, the specific gravity is fixed at 1.010, the value of the glomerular
filtrate.
Blood: This test is based on the peroxidase-like activity of hemoglobin which catalyzes
the reaction of cumene-hydroperoxide and 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine. The resulting
color ranges from orange to green to dark blue. Any green spots or green color
development on the reagent area within 60 seconds is significant and the urine
specimen should be examined further. Blood is often, but not invariably, found in the
urine of menstruating females.
pH: This test is based on a double indicator system which gives a broad range of colors
covering the entire urinary pH range. Colors range from orange to yellow and green to
blue. The expected range for normal urine specimens from newborns is pH 5–7. The
expected range for other normal urine specimens is pH 4.5–8, with an average result of
pH 6.
Protein: This reaction is based on the phenomenon known as the "protein error” of pH
indicators where an indicator that is highly buffered will change color in the presence of
proteins (anions) as the indicator releases hydrogen ions to the protein. At a constant
pH, the development of any green color is due to the presence of protein. Colors range
from yellow to yellow-green for negative results and green to green-blue for positive
results. 1-14 mg/dL of protein may be excreted by a normal kidney.9 A color matching
any block greater than trace indicates significant proteinuria. For urine with high specific
gravity, the test area may most closely match the trace color block even though only
normal concentrations of protein are present. Clinical judgment is required to evaluate
the significance of trace results.
Urobilinogen: This test is based on a modified Enhrlich reaction between
p-diethylaminobenzaldehyde and urobobilinogen acid in strongly acidic medium to
produce a pink color. Urobilinogen is one of the major compounds produced in heme
OSIS22-I
28/06/11
synthesis and is a normal substance in urine. The expected range for normal urine with
this test is 0.2-1.0 mg/dL (3.5-17 mol/L). A result of 2.0 mg/dL (35 mol/L) may be of
clinical significance, and the patient specimen should be further evaluated.
Nitrite: This test depends upon the conversion of nitrate to nitrite by the action of Gram
negative bacteria in the urine. In an acidic medium, nitrite in the urine reacts with
p-arsanilic acid to form a diazonium compound. The diazonium compound in turn
couples with 1 N-(1-naphthyl)- ethylenediamine to produce a pink color. Nitrite is not
detectable in normal urine.3 The nitrite area will be positive in some cases of infection,
depending on how long the urine specimens were retained in the bladder prior to
collection. Retrieval of positive cases with the nitrite test ranges from as low as 40% in
cases where little bladder incubation occurred, to as high as approximately 80% in
cases where bladder incubation took place for at least 4 hours.
Leukocytes: This test reveals the presence of granulocyte esterases. The esterases
cleave a derivatized pyrazole amino acid ester to liberate derivatized hydroxy pyrazole.
This pyrazole then reacts with a diazonium salt to produce a beige-pink to purple color.
Normal urine specimens generally yield negative results. Trace results may be of
questionable clinical significance. When trace results occur, it is recommended to retest
using a fresh specimen from the same patient. Repeated trace and positive results are
of clinical significance.
REAGENTS AND PERFORMANCE CHARACTERISTICS
Based on the dry weight at the time of impregnation, the concentrations given may vary
within manufacturing tolerances. The following table below indicates read times and
performance characteristics for each parameter.
Reagent
Read
Time
Ascorbic
Acid
(ASC)
2,6-dichlorophenolindophen Detects ascorbic acid as low
30
5-10 mg/dL
seconds ol; buffer and non-reactive as
(0.28-0.56 mmol/L).
ingredients
glucose
oxidase;
30
peroxidase;
potassium Detects glucose as low as
seconds iodide; buffer; non-reactive 50-100 mg/dL (2.5-5 mmol/L)..
ingredients
2, 4-dichloroaniline
Detects bilirubin as low as
30
diazonium salt;
0.4-0.8 mg/dL
seconds buffer and non-reactive (6.8-13.6 mol/L).
ingredients
Detects acetoacetic acid as
40
sodium nitroprusside;
low
as
2.5-5 mg/dL
seconds buffer
(0.25-0.5 mmol/L).
bromthymol blue indicator; Determines urine specific
buffer and non-reactive gravity between 1.000 and
45
ingredients;
55%
poly 1.030. Results correlate with
seconds (methyl vinyl ether/maleic values obtained by refractive
anhydride); 25% sodium index method within ±0.005.
hydroxide
3,3’,5,5’Detects free hemoglobin as
tetramethylbenzidine
low as 0.015-0.062 mg/dL or
60
(TMB);
cumene 5-10
Ery/µL
in
urine
seconds hydroperoxide;
specimens with ascorbic acid
buffer and non-reactive content of <50 mg/dL.
ingredients
methyl red sodium salt;
Permits
the
quantitative
60
bromthymol
blue; differentiation of pH values
seconds non-reactive ingredients
within the range of 5-9.
tetrabromophenol
blue;
60
buffer and non-reactive Detects albumin as low as
seconds ingredients
7.5-20 mg/dL (0.075-0.2 g/L).
Glucose
(GLU)
Bilirubin
(BIL)
Ketone
(KET)
Specific
Gravity
(SG)
Blood
(BLO)
pH
Protein
(PRO)
Urobilinogen
(URO)
Nitrite
(NIT)
Leukocytes
(LEU)
Composition
Description
p-diethylaminobenzaldehyd Detects urobilinogen as low
60
e; buffer and non-reactive as 0.2-1.0 mg/dL
seconds ingredients
(3.5-17 mol/L).
Detects sodium nitrite as low
as 0.05-0.1 mg/dL in urine
60
p-arsanilic
acid; with a low specific gravity and
seconds non-reactive ingredients
less than 30 mg/dL ascorbic
acid.
derivatized pyrrole amino
120
acid ester; diazonium salt; Detects leukocytes as low as
blood
cells
seconds 32%
w/w
buffer; 10-25 white
Leu/ L in clinical urine.
non-reactive ingredients
The performance characteristics of the Urinalysis Reagent Strips (Urine) have been
determined in both laboratory and clinical tests. Parameters of importance to the user
are sensitivity, specificity, accuracy and precision. Generally, this test has been
developed to be specific for the parameters to be measured with the exceptions of the
interferences listed. Please refer to the Limitations section in this package insert.
Interpretation of visual results is dependent on several factors: the variability of color
perception, the presence or absence of inhibitory factors, and the lighting conditions
when the strip is read. Each color block on the chart corresponds to a range of analyte
concentrations.
PRECAUTIONS
For in vitro diagnostic use only. Do not use after the expiration date.
The strip should remain in the closed canister until use.
Do not touch the reagent areas of the strip.
Discard any discolored strips that may have deteriorated.
All specimens should be considered potentially hazardous and handled in the same
manner as an infectious agent.
The used strip should be discarded according to local regulations after testing.
STORAGE AND STABILITY
Store as packaged in the closed canister either at room temperature or refrigerated
(2-30°C). Keep out of direct sunlight. The strip is stable through the expiration date
printed on the canister label. Do not remove the desiccant. Remove only enough strips
for immediate use. Replace cap immediately and tightly. DO NOT FREEZE. Do not use
beyond the expiration date.
Note: Once the canister has been opened, the remaining strips are stable for up to 3
months. Stability may be reduced in high humidity conditions.
SPECIMEN COLLECTIONS AND PREPARATION
A urine specimen must be collected in a clean and dry container and tested as soon as
possible. Do not centrifuge. The use of urine preservatives is not recommended. If
testing cannot be done within an hour after voiding, refrigerate the specimen
immediately and let it return to room temperature before testing.
Prolonged storage of unpreserved urine at room temperature may result in microbial
proliferation with resultant changes in pH. A shift to alkaline pH may cause false positive
results with the protein test area. Urine containing glucose may decrease in pH as
organisms metabolize the glucose.
Contamination of the urine specimen with skin cleansers containing chlorhexidine may
affect protein (and to a lesser extent, specific gravity and bilirubin) test results.
MATERIALS
Materials Provided
Strips
Package insert
Materials Required but not provided
Specimen collection container
Timer
DIRECTIONS FOR USE
Allow the strip, urine specimen, and/or controls to reach room temperature
(15-30ºC) prior to testing.
1. Remove the strip from the closed canister and use it as soon as possible.
Immediately close the canister tightly after removing the required number of strip(s).
Completely immerse the reagent areas of the strip in fresh, well-mixed urine and
immediately remove the strip to avoid dissolving the reagents. See illustration 1
below.
2. While removing the strip from the urine, run the edge of the strip against the rim of
the urine container to remove excess urine. Hold the strip in a horizontal position
and bring the edge of the strip into contact with an absorbent material (e.g. a paper
towel) to avoid mixing chemicals from adjacent reagent areas and/or soiling hands
with urine. See illustration 2 below.
3. Compare the reagent areas to the corresponding color blocks on the canister label
at the specified times. Hold the strip close to the color blocks and match carefully.
See illustration 3 below.
Note: Results may be read up to 2 minutes after the specified times.
1
2
3
INTERPRETATION OF RESULTS
Results are obtained by direct comparison of the color blocks printed on the canister
label. The color blocks represent nominal values; actual values will vary close to the
nominal values. In the event of unexpected or questionable results, the following steps
are recommended; confirm that the specimens have been tested within the expiration
date printed on the canister label, compare results with known positive and negative
controls and repeat the test using a new strip. If the problem persists, discontinue using
the strip immediately and contact your local distributor.
QUALITY CONTROL
For best results, performance of reagent strips should be confirmed by testing known
positive and negative specimens/controls whenever a new test is performed, or
whenever a new canister is first opened. Each laboratory should establish its own goals
for adequate standards of performance.
LIMITATIONS
Note: The Urinalysis Reagent Strips (Urine) may be affected by substances that cause
®
abnormal urine color such as drugs containing azo dyes (e.g. Pyridium , Azo
®
®
®
®
Gantrisin , Azo Gantanol ), nitrofurantoin (Microdantin , Furadantin ), and
8
riboflavin. The color development on the test pad may be masked or a color reaction
may be produced that could be interpreted as false results.
Ascorbic acid: No interference is known.
Glucose: This test is highly specific for glucose. No substance excreted in urine other
than glucose is known to give a positive result. The reagent area does not react with
ketones, lactose, galactose, fructose or other metabolic substances, nor with reducing
metabolites of drugs (e.g. salicylates and nalidixic acid). Sensitivity may be decreased
in specimens with high specific gravity (>1.025) and with ascorbic acid concentrations
of ≥10 mg/dL.
Bilirubin: Bilirubin is absent in normal urine, so any positive result, including a trace
positive, indicates an underlying pathological condition and requires further
investigation. Reactions may occur with urine containing large doses of chlorpromazine
or rifampen that might be mistaken for positive bilirubin. The presence of
bilirubin-derived bile pigments may mask the bilirubin reaction. This phenomenon is
characterized by color development on the test patch that does not correlate with the
colors on the color chart. Large concentrations of ascorbic acid may decrease
sensitivity.
Ketone: The test does not react with acetone or β-hydroxybutyrate. Urine specimens of
high pigment and other substances containing sulfhydryl groups occasionally give
reactions up to and including trace (+).
Specific Gravity: Ketoacidosis or protein higher more than 300 mg/dL may cause
elevated results. Results are not affected by non-ionic urine components such as
glucose. If the urine has a pH of 7 or greater, add 0.005 to the specific gravity reading
indicated on the color chart.
Blood: A uniform blue color indicates the presence of myoglobin, hemoglobin or
hemolyzed erythrocytes. Scattered or compacted blue spots indicate intact erythrocytes.
To enhance accuracy, separate color scales are provided for hemoglobin and for
erythrocytes. Positive results with this test are often seen with urine from menstruating
females. It has been reported that urine of high pH reduces sensitivity, while moderate
to high concentration of ascorbic acid may inhibit color formation. Microbial peroxidase,
associated with urinary tract infection, may cause a false positive reaction. The test is
slightly more sensitive to free hemoglobin and myoglobin than to intact erythrocytes.
pH: If the procedure is not followed and excess urine remains on the strip, a
phenomenon known as “runover” may occur, in which the acid buffer from the protein
reagent will run onto the pH area, causing the pH result to appear artificially low. pH
readings are not affected by variations in urinary buffer concentration.
Protein: Any green color indicates the presence of protein in the urine. This test is
highly sensitive for albumin, and less sensitive to hemoglobin, globulin and m ucoprotein.
A negative result does not rule out the presence of these other proteins. False positive
results may be obtained with highly buffered or alkaline urine. Contamination of urine
specimens with quaternary ammonium compounds or skin cleansers containing
chlorhexidine produce false positive results. The urine specimens with high specific
gravity may give false negative results.
Urobilinogen: All results lower than 1 mg/dL urobilinogen should be interpreted as
normal. A negative result does not at any time preclude the absence of urobilinogen.
The reagent area may react with interfering substances known to react with Ehrlich’s
reagent, such as p-aminosalicylic acid and sulfonamides. False negative results may be
obtained if formalin is present. The test cannot be used to detect porphobilinogen.
Nitrite: The test is specific for nitrite and will not react with any other substance
normally excreted in urine. Any degree of uniform pink to red color should be interpreted
as a positive result, suggesting the presence of nitrite. Color intensity is not proportional
to the number of bacteria present in the urine specimen. Pink spots or pink edges
should not be interpreted as a positive result. Comparing the reacted reagent area on a
white background may aid in the detection of low nitrite levels, which might otherwise be
missed. Ascorbic acid above 30 mg/dL may cause false negatives in urine containing
less than 0.05 mg/dL nitrite ions. The sensitivity of this test is reduced for urine
specimens with highly buffered alkaline urine. For accurate results, antibiotics should be
discontinued for at least 3 days before the test is performed. A negative result does not
at any time preclude the possibility of bacteruria. Negative results may occur in urinary
tract infections from organisms that do not contain reductase to convert nitrate to nitrite;
when urine has not been retained in the bladder for a sufficient length of time (at least 4
hours) for reduction of nitrate to nitrite to occur; or when dietary nitrate is absent.
Leukocytes: The result should be read between 60-120 seconds to allow for complete
color development. The intensity of the color that develops is proportional to the number
of leukocytes present in the urine specimen. High specific gravity or elevated glucose
concentrations (≥500 mg/dL) may cause test results to be artificially low. The
presence of cephalexin, cephalothin, or high concentrations of oxalic acid may also
cause test results to be artificially low. Tetracycline may cause decreased reactivity,
and high levels of the drug may cause a false negative reaction. High urinary protein
(≥500 mg/dL) may diminish the intensity of the reaction color. This test will not react with
erythrocytes or bacteria common in urine.
BIBLIOGRAPHY
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