EVALUACIÓN PRESELLOS Y SELLOS

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EVALUACIÓN PRESELLOS Y SELLOS
Demostración de la eficiencia del uso de pre sello y sello como
auxiliares en el manejo de la higiene, en la preparación de la ubre de la
vaca, antes y después de cada ordeño.
Dirección Técnica, Cytalabs.
Diciembre 2009.
Antecedentes.
En las últimas cuatro décadas y establecidas las organizaciones de
explotación del ganado lechero confinado, el uso de desinfectantes como
preparación del pezón antes y después de cada ordeña, a probado a
satisfacción del productor, las bondades de aplicar las medidas básicas de
la higiene pre y post ordeña. La disminución de casos de mastitis clínica en
el establo y el costo beneficio que ello implica representan los indicadores
que todo productor quisiera tener, dado el alto costo de cada caso de
mastitis.
En el mercado actual en México, están presentes pre sellos y sellos de
fabricación nacional y extranjera. Las autoridades nacionales de regulación
(SAGARPA) comprometidas con el registro de los productos, aseguran
sobre las condiciones que el productor refirió con sus respectivas
demostraciones. Sin embargo, en lo general la vigilancia de la autoridad es
relativa. Algunas empresas trasnacionales importan productos cuyas
etiquetas no exhiben las autorizaciones de ley de SAGARPA. Estos
factores en conjunto, limitan al usuario productor de leche, del
conocimiento sobre la eficiencia del producto que está empleando.
Daríamos por descartados todos aquellos productos que no cumplen
siquiera con las normas de registro y distribución reglamentarias, con el
agravante que nuestras autoridades no cuentan con la definición para la
regulación de estos productos.
Las variables para la correcta evaluación de un producto determinado son
muchas y por ello se complica el definir el costo beneficio del mismo.
Entre las variables relacionadas con la infraestructura del establo es posible
citar; clima y precipitación pluvial, niveles y declives, suelos, camas y/o
lugares donde las vacas descansan, materiales y composición de suelos y
camas, tipos de sala y equipo de ordeño, el mantenimiento en lo general de
todo lo arriba mencionado, el sobre ordeño y defectos del vacío de las
pezoneras, materiales y reemplazos, las lesiones a la punta del pezón por
sobre ordeño y la persistencia de hiperqueratosis, etc.
Entre las variables relacionadas con los animales y al personal que los
manejan, se citan; factores genéticos que predisponen al contagio como
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tipo y conformación de ubre y pezones, la edad de la vaca y número de
lactancias, el tiempo de la lactancia en lo particular (días en leche), el
tiempo programado para limpieza, desinfección y acción del desinfectante,
el despunte en recipientes y la inspección de las características de la leche,
el despunte sobre el piso, la correcta estimulación para la bajada de la
leche, la aplicación de sellos y su permanencia en el pezón, el
conocimiento de la presencia de patógenos infecciosos en el hato de
mediano y grande impacto, su control y medidas de
eliminación/erradicación.
Objetivo general.
Evaluar el presello y sello empleado en la preparación de la ubre y
cuantificar la frecuencia y tipo de mastitis.
Objetivos particulares presello.
Identificar las propiedades de un presello respecto a su potencia bactericida
de amplio espectro.
Identificar las propiedades respecto a tiempo de contacto, de un presello a
su capacidad bactericida de amplio espectro.
Analizar la carga bacteriana residente en la piel de los pezones antes y
después de la aplicación del presello.
Objetivos particulares sello.
Analizar la adherencia a la piel de los pezones del sello y volumen
empleado por pezón.
Analizar y calificar la integridad de la piel de los pezones.
Identificar las propiedades de un sello respecto a su potencia bactericida de
amplio espectro.
Identificar las propiedades de un sello respecto a su capacidad bactericida
de amplio espectro respecto a tiempo de contacto.
Criterios de selección del ganado
Entre todo el universo mencionado, las condiciones de cada establo serán
particulares y por ello, las de evaluación también. Dadas las condiciones de
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un establo, se sugiere que para realizar la demostración de las bondades de
un producto, se seleccione un corral con número suficiente de vacas para en
su caso emplear análisis estadístico (entre 25 como mínimo y 200 como
máximo). Las vacas del corral seleccionado para la demostración en vivo
del producto, permanecerán por el tiempo de la prueba. Se sugiere 15 días.
Existirá un corral con el mismo número de vacas edades y lactancias
similares, que servirá como testigo de comparación con el o los productos
empleados en el establo.
Criterios de evaluación del ganado
Los datos del establo relacionados con el número de casos de mastitis
clínicas y subclínicas de las vacas de los corrales, prueba y testigo, servirán
como dato de comparación al terminar la demostración.
La inspección y calificación de las condiciones de la piel del pezón serán
referidas por un médico veterinario, antes y después de la prueba como;
buenas, regulares, malas en por lo menos 25 animales.
Criterios de evaluación del efecto bactericida sobre la piel del pezón
Materiales
Copas limpias, pre sello, hisopos, tubos estériles, asa calibrada 100 X, cajas
de Petri con agar enriquecido.
Equipo;
Estufa incubadora calibrada a 37 Co
Autoclave.
Animales y condiciones de aplicación
Un corral de vacas en cualquier etapa de lactación. Ubres rasuradas de
preferencia.
Aplicación del pre-sello por inmersión con copa hasta la base del pezón.
Permitir el tiempo de acción del producto a probar durante 15 segundos al
menos.
Obtener por lo menos una muestras al asar por 25 vacas durante la ordeña,
resultado de pasar un hisopo estéril humedecido en medio de cultivo, sobre
la superficie de la piel de un pezón, antes de la aplicación del presello y 15
o mas segundos después de su aplicación. Preservar los hisopos
identificados como antes y después, dentro de un tubo de vidrio estéril con
medio de cultivo.
Determinación de gérmenes en el laboratorio
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Las muestras serán sembradas usando asa calibrada 100X en cajas de Petri
con agar soya tripticaseina, e incubados por 24 h a 35-37 Co
Evaluación de crecimiento bacteriano
Los cultivos de las respectivas siembras, identificados por el grupo en el
tratamiento, se evaluarán para crecimiento de unidades formadoras de
colonias (UFC).
Determinación del tiempo de lisis bacteriana in Vitro
Cada presello podrá ser evaluado en su potencia bactericida midiendo el
halo de inhibición así como el crecimiento contra tiempo de acción del
producto en prueba.
Procedimiento para determinar la potencia bactericida en selladores.
Prueba para determinar la difusión del sellador en Agar y el halo de
inhibición del producto en prueba hacia el crecimiento bacteriano
sobre el Agar.
Materiales;
Placa de Petri con Agar enriquecido (Soya Tripticaseina o Müller Hinton).
Caldo de cultivo bacteriano de la suspensión bacteriana entre 10 3 a 104
UFC.
Hisopos de algodón estériles.
Cilindros de acero inoxidable estériles.
Cilindros de plástico estériles (parte superior de puntas azules para micro pipeta
de 1000 microlitros).
Procedimientos
El inóculo (Gram positivos y/o negativos) se homogeniza en la placa
mediante la aplicación con un hisopo estéril.
Por la parte superior del cilindro se depositan 100 µl del producto a probar.
Para los productos de alta densidad se emplea los cilindros de plástico para
permitir su difusión.
Se permite la interacción durante 12 horas incubando a 37 ° C. Se procede
a la lectura del halo de inhibición del crecimiento bacteriano con una regla,
midiendo el diámetro del mismo.
Procedimiento para determinar reto bacteriano contra tiempo.
1. Preparar suspensión de bacterias (E.coli y Staph.aureus), a una densidad
de 0.5 según nefelómetro de Macfarland.
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2. Colocar en tubo de vidrio estéril 1 ml de producto de prueba.
3. Marcar una caja de Petri con Agar en secciones de manera que se tenga
espacio suficiente para sembrar los desafíos en sus diferentes tiempos.
4. Comenzar el reto (Producto-Bacteria), agregando 100 µl de la
suspensión bacteriana al mililitro de producto prueba moviendo el
producto con pipeteo continuo durante 15 segundos.
5. Tome una muestra de 100 µl y deposite en la placa en el espacio predeterminado para los 15 segundos de contacto, y en forma sucesiva para
los tiempos 30, 45 y 60 segundos.
6. La placa sembrada se incuba por 18 – 24 horas a 37 C°.
7. Se lee el resultado;
a. Presencia de colonias significa no inhibición a ese tiempo.
b. Ausencia de colonias significa inhibición completa.
Procedimiento para determinar la potencia bactericida en selladores.
Materiales;
Placa de Petri con Agar enriquecido (Soya Tripticaseina o Müller Hinton).
Caldo de cultivo bacteriano de la suspensión bacteriana entre 10 3 a 104
UFC.
Hisopos de algodón estériles.
Cilindros de acero inoxidable estériles.
Cilindros de plástico estériles (parte superior de puntas azules para micro pipeta
de 1000 microlitros).
Procedimientos
El inóculo (Gram positivos y/o negativos) se homogeniza en la placa
mediante la aplicación con un hisopo estéril.
Por la parte superior del cilindro se depositan 100 µl del producto a probar.
Para los productos de alta densidad se emplea los cilindros de plástico para
permitir su difusión.
Se permite la interacción durante 12 horas incubando a 37 ° C. Se procede
a la lectura del halo de inhibición del crecimiento bacteriano con una regla,
midiendo el diámetro del mismo.
Procedimiento para determinar reto bacteriano contra tiempo.
8. Preparar suspensión de bacterias (E.coli y Staph.aureus), a una densidad
de 0.5 según nefelómetro de Macfarland.
9. Colocar en tubo de vidrio estéril 1 ml de producto de prueba.
10. Marcar una caja de Petri con Agar en secciones de manera que se tenga
espacio suficiente para sembrar los desafíos en sus diferentes tiempos.
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11.Comenzar el reto (Producto-Bacteria), agregando 100 µl de la
suspensión bacteriana al mililitro de producto prueba moviendo el
producto con pipeteo continuo durante 15 segundos.
12. Tome una muestra de 100 µl y deposite en la placa en el espacio predeterminado para los 15 segundos de contacto, y en forma sucesiva para
los tiempos 30, 45 y 60 segundos.
13.La placa sembrada se incuba por 18 a 24 horas a 37 C°.
14.Se lee los resultados;
15.Presencia de colonias significa no inhibición a ese tiempo.
a. Ausencia de colonias significa inhibición completa.