1. INTRODUCCIÓN El Golfo de Guayaquil se encuentra situado en la Costa Sudamericana. Se extiende desde la Península de Santa Elena (Ecuador), hasta Mancora (Perú). Este se introduce en el Litoral Ecuatoriano hasta aproximadamente un distancia de 120 kilómetros. Presenta dos ecosistemas bien definidos: El Estero Salado, de unos 60 kilómetros de longitud y una profundidad promedio de 9.5 metros; y el Rio Guayas con una longitud de 90 kilómetros. Ambos ecosistemas se comunican al sur de la ciudad de Guayaquil, en el canal Cascajal. Uno de los asentamientos más importantes localizados en el Golfo de Guayaquil, es la ciudad del mismo nombre, la cual se encuentra limitada por dos cuerpos de agua, por el oeste el Estero Salado (agua salada) y por el este el Rio Guayas (agua dulce), la ciudad de Guayaquil es la que ejerce la mayor cantidad de desechos sólidos, un porcentaje de las cuales llega a los dos sistemas de alcantarillado: el pluvial y el sanitario (Ordoñez, 2007). La contaminación microbiana se ha convertido en un tema de gran interés, debido a que la presencia de bacterias patógenas en el agua tiene una relación directa con la salud pública, por consiguiente, existe la necesidad de incrementar la investigación sobre fuentes y niveles de esta forma de contaminación (Barrera y Wong, 1996). Más del 50% de la población mundial reside dentro de los 200 kilómetros de la zona costera. Para el año 2025 ese porcentaje ha sido proyectado incrementarse hasta en un 70 % (Hinrichsen, 1998). De tal manera que, ésta tendencia ha conducido a problemas como incremento de desechos municipales e industriales, ejerciendo aun mayor presión en los sistemas costeros conllevando a problemas y forzando aun más la capacidad límite de las plantas de tratamiento de aguas servidas. En este sentido, en el Ecuador y específicamente en Guayaquil, el gran desarrollo poblacional de la ciudad, producido durante las décadas del sesenta y setenta, estableció un gran desequilibrio entre el crecimiento de la urbe y el de sus servicios de infraestructura, especialmente el de alcantarillado sanitario, y así las aguas residuales de las áreas en desarrollo se dejaron correr libremente hacia el Estero Salado , rompiendo el balance pre-existente e 1 iniciando el proceso de creciente acumulación de materia contaminante que lleva día a día el ritmo de contaminación de sus aguas. En forma notable a contribuido a la contaminación, el inconsulto sistema de disposición final de basuras de la ciudad, denominada erróneamente relleno sanitario, mediante el uso de botaderos a cielo abierto en las riberas del estero, o en lugares, donde los líquidos percolados provenientes de lluvias, capa freática o mareas, después de atravesar los mantos de basura en descomposición, finalmente alcanzaron al estero salado con su alta carga de contaminantes. Éstos líquidos tienen un poder contaminante del orden de ciento cincuenta veces mayor que los residuos domésticos y son difícilmente degradables (Empresa Municipal de Alcantarillado de Guayaquil, 1978). En Ecuador, el 69% de las industrias registradas se encuentran en la zona costera, con mayor concentración en la Provincia del Guayas. De ellas, la industria de productos alimenticios representa, el 68% del número total de plantas industriales en la costa. Se estima un vertimiento anual de 55.2 millones m3/año con un total de las descargas ubicadas en la Provincia del Guayas. La industria de aceites y grasas aportan 5 millones m3/año especialmente en Guayaquil y la industria metalmecánica contribuye con un vertimiento de 15 millones m3/año (Comisión Permanente del Pacifico Sur, 2000). En Guayaquil hay siete zonas donde se ubican las industrias: en las riberas de los esteros Cobina y del Muerto, al Sur; en las riberas del rio Guayas, Sur y Centro; Avenida Juan Tanca Marengo, Mapasingue-Prosperina, Inmoconsa, Pascuales y vía a la costa. Guayaquil evacua alrededor de 0.75 m3/s de aguas servidas. El 10% va directo al Guayas, un 66% lo recibe uno de sus afluentes, el Daule. Al estero salado llega el 24% de las aguas del alcantarillado (http://www.explored.com.ec/noticias-ecuador/el-guayasy-el-salado-reciben-60-toneladas-de-toxicos-diarios-105000-105000.html,1999). La municipalidad del Cantón Guayaquil, considera como una de sus más caras aspiraciones la calidad de las aguas del Estero Salado, aguas que han venido deteriorándose en razón de las descargas contaminantes que reciben, tanto de las 2 industrias como de los asentamientos humanos que año a año incrementan el área poblada de la ciudad. Área que la Municipalidad no está en capacidad de dotar de servicio de alcantarillado sanitario con la misma celeridad con que se desarrolla (Empresa Municipal de Alcantarillado de Guayaquil, 1978). Debido a las descargas de aguas negras domesticas e industriales al Estero Salado, se ha ocasionado en las zonas aledañas y en el cuerpo de agua una alarmante contaminación con repercusiones para la ciudad; caracterizado por el mal olor de sus aguas, un color negruzco y falta de oxigeno disuelto; todo lo cual repercute de manera especial sobre la existencia de vida superior en sus aguas (Lahmeyer-Cimentaciones, 2000). En la actualidad, según datos municipales, los más grandes problemas de contaminación en el Estero Salado se encuentran en las inmediaciones de las ciudadelas Bellavista, Los Ceibos, Miraflores, entre otras. En áreas como Urdesa Norte, el ramal que forma parte del Bosque Salado Norte presenta un tono grisáceo y a ratos transporta basura. El director de Ambiente del Cabildo, Mauricio Velásquez reconoce que todavía hay industrias que evaden los controles, pero asegura que intentara contrarrestar esa situación con el trabajo de vigilancia que efectúan las lanchas a motor. La decisión de preservar el estero implica también el control de los asentamientos informales e incluso el posible desalojo de quienes no cuentan con los documentos que avalen su presencia en las márgenes de este cuerpo de agua (http://archivo.el universo.com/2007/12/23/0001/1064). De acuerdo a Solórzano (1989), las aguas del Estero Salado sufren una contaminación severa de desechos domésticos e industriales debido a la descarga de la ciudad de Guayaquil y de la terminal de operaciones petrolera. En estos ecosistemas se han determinado puntos críticos de contaminación como por ejemplo en el Estero Salado, la zona cercana a los puentes Miraflores, Perimetral, Isla Trinitaria y en el rio Guayas en el área de Puerto Marítimo, donde la calidad del agua de acuerdo a las características físico-químicas se las cataloga como zonas fuertemente intervenidas, con aguas anoxicas o altamente deficitarias de oxigeno, alta demanda bioquímica de oxigeno como resultado de la presencia de sustancias 3 reductoras, aguas fuertemente eutrofizadas por el aporte de sustancias orgánicas e inorgánicas; evidente contaminación por hidrocarburos de petróleo debido tanto a los efluentes de origen industrial y domestico como también a la evacuación de las sentinas de las embarcaciones que navegan por sus aguas y, una evidente contaminación por microorganismos patógenos. Ocasionando serios daños a la calidad del aire, agua, sedimentos, flora, fauna y sobre las actividades socio económicas de la población asentada en los sectores (Ordoñez, 2007). El Estero Salado en cuanto a su configuración física, a su régimen hidráulico, y al grado de contaminación que actualmente presenta su cuerpo de agua, se lo ha dividido en las siguientes zonas: Zona I: formado por los tramos A,B,C y D, en cuyas márgenes se asientan urbanizaciones antiguas, planificadas y construidas por inmobiliarias privadas, que disponen de todos los servicios básicos y ocupadas por personas de ingresos económicos medio a alto. Muchos de sus moradores han ocupado metros del estero donde han construido una infraestructura resistente, conformando un malecón de tipo privado sin acceso al público. El tramo A, situado entre las ciudadelas Urdesa y Kennedy con una longitud de aproximadamente 3.600 metros. El tramo B, comprendido entre el parque deportivo Miraflores y el brazo represado, antes del puente 5 de junio con una longitud aproximada de 4.400 metros. El tramo C, es la sección comprendida entre la confluencia de los tramos A y B y el puente cinco de junio con una longitud de 1.100 metros. El tramo D, es la sección comprendida entre el puente Cinco de junio y la calle 17, tiene una longitud de 1.800 metros. Zona II: Esta zona está formada por los tramos E, F, G, H e I. Cubre la parte central y sur de la ciudad, es la más populosa. Hay grupos de viviendas precarias que se han desarrollado informalmente en muchos casos. Está conformada en su mayoría por 4 asentamientos no planificados que, conforme ha pasado el tiempo, han sido débilmente atendidos por los organismos correspondientes con los servicios básicos, en la actualidad no toda la zona goza de ellos y son muchos los sectores que no disponen de alcantarillado sanitario y pluvial, así como de agua potable. Esta población se ha posesionado de la orilla y aun ha entrado al estero, para construir escuálidas viviendas habitacionales empobreciendo más la zona. El estándar de vida de los moradores es de nivel socio-económico apreciablemente menor que la zona I. El tramo E, es la sección comprendida entre la calle 17 y el puente Portete, con una longitud de 3.100 metros. El tramo F, es la sección comprendida entre el puente Portete y Estero Palanqueado, con una longitud de 6.000 metros. El tramo G, es la sección comprendida entre el estero Palanqueado y Puerto Marítimo, con una longitud de 6.000 metros. El tramo H, desde el Estero Puerto Liza hasta Cuatro Bocas y Puerto Marítimo, con una longitud de 3.000 metros. El tramo I, es la sección comprendida entre Cuatros Bocas y Puerto Marítimo, con una longitud 6.500 metros. El tramo B del Estero Salado es el más contaminado, el cual comienza al norte del Puente Miraflores y desemboca en el tramo C, a la altura del puente UrdesaKennedy. En la parte superior del tramo, la sección del flujo es relativamente estrecha y se seca durante las horas de marea baja, en cambio en la parte inferior tiene un ancho aproximado de 62 metros y una profundidad promedio de 4 metros (Lahmeyer Cimentaciones, 2000). Por consiguiente, la investigación realizada se enfoco en este ramal del Estero Salado (tramo B) permitió disponer de información básica para la cuantificación de bacterias que tienen las cualidades necesarias para ser utilizadas como indicadores de contaminación microbiológica. Estos organismos encontrados en el agua y sedimento están asociados con los aportes de aguas residuales y su importancia se relaciona con los riesgos que para la salud representa la propagación de enfermedades 5 infecciosas. Los resultados obtenidos en la presente investigación permitieron tener una idea de los niveles de contaminación en otros lugares próximos o distantes al presente sitio de estudio. 1.1 Objetivo General Determinar la población y distribución espacial de los coliformes totales, coliformes fecales, Escherichia coli y enterococos en el agua y sedimento de los tramos B, D, E y G del Estero Salado. 1.2 Objetivos Específicos. 1) Determinar los niveles de densidad de población presentes en el agua y sedimentos. 2) Determinar las variables que inciden en la cuantificación mediante el empleo de métodos estadísticos. 1.3 Hipótesis Existen altas densidades de población de coliformes totales, coliformes fecales, Escherichia coli y enterococos en el agua y sedimentos en los tramos B, D, E y G del Estero Salado provenientes de las descargas de aguas residuales no tratadas y de las escorrentías de la ciudad de Guayaquil? 6 2. REVISION DE LITERATURA Diversos factores están involucrados en la desaparición de los organismos contaminantes en el medio ambiente acuático, los dos más importantes vienen siendo la dilución física y la inactividad microbiana. Ambos procesos dependen de varios factores físico-químicos y biológicos, tales como la temperatura, los procesos de adsorción y la sedimentación, la acción de la luz solar, la depredación por bacterias o protozoos, la carencia de nutrientes, la competencia con la microbiota local. No obstante, hay un considerable desacuerdo entre las observaciones realizadas por varios investigadores. También, la aplicabilidad de los estudios de agua de mar y agua dulce para aguas estuarinas es dudosa debido a la probable efectos sobre la inactivación microbiana de las diferentes característica ópticas, la salinidad y la microbiota local (Chandran y Hatha, 2005). Los miembros de los dos grupos de bacterias: coliformes y estreptococos fecales, son usados como indicadores microbiológicos universales de la calidad del agua (Neill, 2004) debido a que ellos están comúnmente establecidos tanto en las heces humanas como en las heces de los animales. Aunque no son generalmente dañinos por sí mismos, esto implicaría la potencial presencia de bacterias patógenas, virus y protozoarios que también viven en el sistema digestivo de humanos y animales. Por consiguiente, su determinación en los cuerpos de agua sugiere que microorganismos patógenos pueden también estar presentes y es un riesgo para la salud de los bañistas y de aquellas personas que consumen moluscos. El estudio de una gran variedad de patógenos en un ecosistema dado es difícil, debido a los costos asociados y al tiempo empleado en la determinación de los mismos, usualmente es mejor emplear coliformes y estreptococos para determinar la contaminación en el agua. Las Fuentes de contaminación de las aguas superficiales incluyen plantas de tratamiento de aguas servidas, pozos sépticos, estiércol de animales domésticos y salvajes y escorrentía superficial. Las bacterias indicadoras de contaminación fecal más comúnmente usadas son: coliformes totales, coliformes fecales, Escherichia coli, estreptococos fecales y 7 enterococos. Pero la E. coli está compuesta de un numero de especies de bacterias que comparten características comunes tales como la forma, el hábitat o comportamiento y la misma es una especie del grupo de coliformes fecales. Los Coliformes Totales, son un grupo de bacterias que están extendidas en la naturaleza. Todos los miembros del grupo de coliformes totales pueden estar en las heces humanas, pero también algunas pueden estar presentes en los desechos de los animales, en el suelo, en la madera sumergida y en otros lugares fuera del cuerpo humano. Para las aguas recreacionales, los coliformes totales no son recomendables como indicador. Para el agua potable, son aun la prueba estándar debido a que su presencia indica contaminación del suministro de agua debido a una fuente externa (USEPA, 1997). La evaluación de la calidad del agua ha sido tradicionalmente basada en la detección de organismos indicadores fecales, particularmente de coliformes totales, coliformes fecales y estreptococos fecales. Sin embargo, estos grupos de microorganismos no necesariamente están bien correlacionados con la presencia de organismos patógenos. Algunos investigadores (Davies et al., 1977) sugieren que el grupo de coliformes totales no constituye una fuente confiable de información como el contenido de contaminación o la condición de una fuente de agua. Mientras que otros investigadores (Sayler et al., 1975) concluyen que la dependencia sobre el grupo de coliforme crea serios problemas tanto en la medición de la calidad del medio ambiente como en el cálculo del riesgo de la salud pública (Ferguson et al., 1996). Las aguas superficiales juegan un rol muy importante en la transmisión de agentes patógenos descargados a través de las heces. Estos agentes llegan vía aguas servidas domesticas y pueden retornar a los humanos por varias vías, tales como el uso de estas aguas para la recreación o deportes (natación o pesca), por la irrigación de campos agrícolas, y también como agua potable. Por consiguiente, la contaminación de los ríos, es debido al incremento indiscriminado de contaminación que ha hecho insuficiente la capacidad natural de purificación de las agua, en los actuales momentos toma una particular importancia en los estudios (Pianetti et al., 1998). 8 A pesar de que esta claro , que quienes usan aguas marinas contaminadas para la recreación tienen un alto riesgo para desarrollar enfermedades microbianas que aquellas persona que no utilizan estas aguas, todavía no hay nada definido para una medida de contaminación universal para el medio ambiente marino que refleje el riesgo para la salud pública . Por 50 años el método ha sido de análisis microbiano de muestras de agua usando el término de indicador. El indicador histórico, originalmente definido para asegurar la calidad del agua potable, está basado en la presencia o ausencia de bacteria o grupos de bacterias en un dado cuerpo de agua. Estas bacterias indicadoras están típicamente establecidas en los intestinos de animales y seres humanos y son liberados en los desechos sólidos. El indicador mismo no es un patógeno, pero su presencia indica la probable presencia de organismos patógenos (Salas, 1989). En la siguiente lista y figura 1, se mencionan los grupos de bacteria que son comúnmente usados como indicadores de contaminación en los Estados unidos y las relaciones entre ellos. Coliformes totales (bacterias en forma de bacilos, aerobias o anaerobias facultativas, Gram negativas no esporuladas que fermentan la lactosa con producción de gas a 35°C en 48 horas) Escherichia spp. Klebsiella spp. Shigella spp. Salmonella spp. Yersinia spp. Coliformes fecales o termotolerantes (bacterias en forma de bacilos, aerobias o anaerobias facultativa, no esporuladas que fermentan la lactosa con producción de gas a 45 °C después de 48 horas). Bacteria dentro del grupo coliforme total, tales como la Escherichia coli, la cual está adaptada para crecer a la temperatura intestinal. Enterococcus (coco gram positivo, crecen a 41 °C después de 48 horas). Especies de bacteria tales como Enterococcus faecalis Clostridium perfringens (bacteria anaeróbica formando espora que crece a 45 °C después de 24 horas). 9 ORGANISMOS INDICADORES Estreptococos fecales Coliformes Totales Coliformes Fecales Escherichia coli Enterococos Enterococos faecalis Estreptococos Bovis Estreptococos equinus Estreptococos aviun Enterococos faecium Figura 1. Relaciones de los grupo Coliformes Originalmente, el número de coliformes totales y fecales fueron empleados para determinar la calidad de agua, con grupos de bacterias intestinales tales como los enterococos y especies de Clostridium adoptado en años recientes como indicadores alternos. Sin embargo, ningún indicador microbiano ha sido identificado todavía que pueda ser utilizado efectivamente en todas las regiones; por ejemplo, en los trópicos, los coliformes que son depositados en el suelo pueden sobrevivir en sustratos, y además que su presencia no puede significar que las aguas servidas fecales están continuamente entrando en las áreas examinadas. Un consenso a nivel nacional entre oficiales de la salud pública y los investigadores sobre cual bacteria indicadora se debe utilizar para la calidad de las aguas recreacionales todavía no ha sido determinado (Griffin et al., 2001). Los Coliformes Fecales, es un subgrupo de los coliformes totales, son mas especifico de origen fecal. Para las aguas recreacionales, este grupo fue el indicador primario hasta un par de años atrás, cuando la Agencia de Protección del Medio Ambiente de los Estados Unidos de Norteamérica (EPA) recomendó E.coli y 10 enterococos como los mejores indicadores de riesgo para la salud a partir de contacto con el agua. No obstante, los coliformes fecales todavía están siendo utilizados en muchos Estados de los Estados Unidos como indicadores de bacterias patógenas. Los estudios de la sobrevivencia de coliformes fecales (CF) son numerosos (Davies et al. 1995; Wcislo y Chrost, 2000; Bordalo et al., 2002). Muchas de las investigaciones han involucrado tanto en el suelo como en ambientes marinos y se han concentrados solamente en la reducción del número de bacteria a través del tiempo. Estudios efectuados en años recientes han revelado frecuentemente números más altos de indicadores y bacterias patógenos en los sedimentos que en el agua. Aparentemente, estas altas concentraciones de indicadores y bacteria patógena en los sedimentos son debido a la combinación de la sedimentación, adsorción (el cual le provee protección de bacteriófagos y sustancias toxicas microbianas) y el fenómeno de sobrevivencia prolongada en el sedimento. Una asunción fundamental para el concepto de indicador es la semejanza en la sobrevivencia del indicador y los patógenos entéricos sobre un rango de ambientes acuosos y variadas condiciones físico-químicas (Rhodes y Kator, 1988). Los coliformes fecales (CF) y los enterococos fecales (EF) están siendo ampliamente usados como indicadores de contaminación de agua por humanos y otros animales de sangre caliente, los cuales están siendo incluidos en los estándares de la calidad de agua en diferentes partes del mundo. Particular atención está siendo dedicada a la sobrevivencia de la bacteria indicadora fecal (BIF) por razones sanitarias. Por otro lado, es conocido que EF puede sobrevivir más tiempo en condiciones adversas que el CF debido a la naturaleza de su membrana bacterial. La luz (particularmente la radiación ultravioleta), temperatura, salinidad, metales pesados, depredación y la competencia tienen un efecto de eliminación sobre la integridad del CF y EF. Sin embargo hay poca información acerca del comportamiento de BIF en medios ambientes tropicales, particularmente en estuarios, ya que muchos de los estudios están siendo llevados a cabo en aguas templadas (Bordalo, et al., 2002). 11 Varias bacterias están establecidas en el tracto digestivo y en las heces de animales salvajes y domésticos y también en lo seres humanos. Algunas de estas bacterias, por ejemplo los coliformes fecales, E.coli (el miembro predominante del grupo de coliforme fecal), y Enterococos spp. , son usados como indicadores de contaminación fecal de aguas naturales. Las relaciones entre la densidad del indicador y el uso de la tierra pueden implicar fuente potencial de contaminación fecal en algunos casos. La identificación de fuente específica de contaminación fecal podría ayudar en el futuro un adecuado manejo de cuencas así como también proveer más pruebas de campo para el análisis de resistencia antibiótica (Whitlock, et al., 2002). El efecto de la radiación solar sobre la supervivencia de las bacterias en agua salada ha recibido una considerable atención en años recientes y es considerado por algunos investigadores a ser el factor más importante en la disminución de las bacterias. La mayoría de estos trabajos, solo ha involucrado las bacterias coliformes y no se ha considerado la relación entre los depredadores microbianos y la radiación solar, aunque esta última relación está siendo sugerida. La utilización de las bacterias coliformes, tales como E. coli como indicadores de la presencia de patógenos y otros organismos fecales depende del grado de sobrevivencia similar de estos organismos en sistemas de aguas naturales. (J. McCambridge y T. A. McMeekin, 1981). En muchos investigaciones de sobrevivencia, E. coli fue el único organismo estudiado. El uso de este como un indicador de contaminación fecal para todos los ecosistemas está siendo cuestionado. Algunos estudios han indicado que el E. coli se muere mucho más rápido que la Salmonella spp., y por consiguiente no es un indicador adecuado para la presencia de este patógeno (Burton et al., 1987). El microorganismo E.coli reside en el intestino de los animales de sangre caliente, un medio ambiente que provee un suministro amplio de nutrientes para el crecimiento bacteriano. El tiempo de duplicación del E. coli en este hábitat primario es estimado en dos días. Esto sugiere que la mitad de la población total reside en el hábitat primario del huésped y la otra mitad en el medio ambiente externo (hábitat secundario). 12 De acuerdo con la población microbiana crece y se divide en el hábitat primario, pero este tiene una tasa negativa neta de crecimiento en el hábitat secundario, con una vida media de aproximadamente un día en el agua, 1, 5 días en el sedimento, y 3 días en el suelo. Estas estimaciones implica que E. coli no vive en ningún huésped del medio ambiente pero los continuos volúmenes de transferencia de la fuente humana y de los animales mantienen una población estable fuera de los huéspedes animales. La sobrevivencia de E.coli en el hábitat secundario requiere de la habilidad para superar la baja disponibilidad de nutrientes y las fluctuaciones amplias de temperatura. Las poblaciones declinan rápidamente en el microcosmos de las aguas dulces. Sin embargo, la dependencia de que puede usar fácilmente las fuentes de carbono, tan bien como la remoción de la microflora competidora, permite el crecimiento, sugiriendo que E. coli es incapaz para adquirir y competir por los nutrientes bajo condiciones de inanición. Las poblaciones de E.coli establecidas en el hábitat secundario están aparentemente mantenidas por el constante arribo de microorganismos a partir del hábitat primario, con una carencia de nutrientes y condiciones ecológicas severas evita que se mantenga fuera del huésped animal. Este modelo implica que el E.coli no vive en ningún huésped del medio ambiente y para que este se encuentre en tales lugares es el resultado de la excreción de los desechos de los animales. Esta es la lógica detrás del uso del E.coli como un organismo indicador para la contaminación fecal del medio ambiente, ya que se asume que no es un residente permanente del suelo y agua ((Mollie D.Winfield y Eduardo A. Groiman, 2003). Como en el medio ambiente del huésped de los mamíferos, los nutrientes en los ecosistemas tropicales son mantenidos en altas concentraciones, y junto con un constante aire cálido, el suelo, las temperaturas del agua, estos proveen un hábitat ideal para la sobrevivencia, crecimiento y proliferación del E.coli. Realmente, las altas concentraciones están establecidos en numerosas regiones tropicales en la ausencia de fuentes fecales conocidas (Mollie D. Winfield y Eduardo A. Groisman, 2003). El número de bacteria E.coli es un indicador específico de contaminación originado a través de los intestinos de los animales y de los humanos y está directamente relacionada con las descargas de aguas servidas municipales o desechos de 13 animales. Por consiguiente, el numero de bacteria de E. coli es un importante indicador de la calidad de agua, especialmente en aguas donde las aguas servidas son descargadas. Los estándares microbiológicos están disponibles para aguas dulces, aguas de recreación (Ministerio del Ambiente, 2002) y para el cultivo de moluscos. Sin embargo, no hay actualmente estándares microbiológicos generales o criterios disponibles para coliformes totales o para E. coli en aguas estuarinas que cubran un rango total de salinidad, desde aguas dulce hasta agua de mar. El numero de bacterias para coliforme total y E. coli en aguas, son normalmente del orden de magnitud más alto al final del agua dulce que al final de la entrada de un estuario. Este número puede también variar grandemente a través de un estuario principalmente debido a la dilución del agua dulce con el agua de mar que está continuamente cambiando debido a las fluctuaciones de marea. Esto puede crear dificultades en la evaluación o estimación de los coliformes totales o el impacto de la E.coli especialmente en estuarios donde las aguas servidas son descargadas directamente, por ejemplo, hay dificultades en decidir si el numero de bacterias para aguas estuarinas están dentro de un rango aceptable o si el numero es alto o bajo en relación a la salinidad (Neill, 2004). Los Enterococos, otro indicador, son un subgrupo dentro del grupo de los estreptococos fecales, estos se distinguen por su habilidad para sobrevivir en agua salada, y en este aspecto ellos encierran muchos mucho más patógenos que otros indicadores. Los enterococos son típicamente más específicos en humanos que el grupo de estreptococos. La EPA recomienda los enterococos como el mejor indicador para el riesgo de la salud en aguas saladas usadas para la recreación y también como un indicador de agua dulce. (USEPA, 1997). En los estuarios, como en otro sistema natural acuático, los niveles de bacteria indicadora fecal y patógenos entéricos, principalmente son influenciados por fuentes puntuales (tales como la descarga de efluentes de aguas servidas de plantas de tratamiento), y la naturaleza de la cuenca. La permeabilidad de los suelos y la escorrentía también contribuyen sustancialmente a la contaminación fecal del agua 14 especialmente en las áreas rurales. En los estuarios, la sobrevivencia de microorganismos fecales está influenciada por su asociación con partículas, las cuales tienen un complejo comportamiento hidrodinámico afectado por los ciclos de marea y el flujo del rio, y por la presencia de un continuo gradiente de salinidad no favorable para la sobrevivencia de bacterias fecales( Touron et al., 2007). Varios estudios (Hendricks, 1971; Grimes, 1975 y Erkenbrecher, 1981) destacan la importancia de los sedimentos como un reservorio potencial de microorganismos en el ambiente acuático. La prolongada sobrevivencia de los coliformes con otras bacterias fecales en el sedimento , la posibilidad de que sea removida por dilución y además la re-suspensión indican que los sedimentos tan bien como las aguas superficiales deberían ser examinados cuando se evalúa riesgos potenciales para la salud (Ferguson et al., 1996). Los criterios de prueba para la calidad del agua no toman en consideracion los sedimentos como un reservorio potencial de patógenos. Los números altos de estos que ocurren en los sedimentos, junto con el incremento del uso de aguas recreacionales, crea un peligro potencial para la salud debido a la re-suspensión y subsecuente ingestión. Por lo tanto, hay la necesidad de obtener información adicional sobre la sobrevivencia del indicador y bacteria patógena en el sedimento y los factores por los cuales contribuye a su sobrevivencia (Burton et al., 1987). Los estudios bajo condiciones tanto del medio ambiente como en laboratorio, han demostrado que un gran número de bacterias están unidas al sedimento o en partículas suspendidas que se encuentran libres en las aguas superficiales. Hay también varios estudios que han demostrado que las bacterias tienden a sobrevivir más largamente en el sedimento que en el medio ambiente acuático. En las aguas costeras y en la cercanía de los estuarios, esto podría indicar un incremento potencial en los riegos de infección para los humanos, debido a la resuspension de las bacterias patógenas que se encuentra en la superficie de la capa sedimentaria durante las actividades recreacionales. 15 Numerosos factores pueden influir en la sobrevivencia de las bacterias en el medio ambiente acuático, tales como las algas toxicas, metales tóxicos, temperatura, nutrientes y oxigeno disuelto. En los sedimentos, la disponibilidad de los nutrientes y la alta concentración de materia orgánica también están siendo probadas para incrementar la sobrevivencia de las bacterias (Jeng et al., 2005). Uno de los rasgos característicos de los sistemas estuarinos es la constante contaminación de diversas fuentes (humanas y no humanas). La explosión poblacional y la rápida industrialización han dado como resultado un incremento de carga de aguas servidas dentro del ecosistema. Gran número de bacterias patógenas entran al sistema principalmente a través de las aguas servidas. Los ríos son los principales contribuyentes de los estuarios, los cuales transportan un gran volumen de material telúrico y arrojan estos al estuario. Sin embargo todos los sistemas naturales tienen una capacidad de autopurificacion por ellos mismos, debido a los parámetros fisicoquímicos y biológicos. Muchos organismos llevados por el agua, son bacterias cuyo medio ambiente natural esta en el intestino del hombre y en los animales de sangre caliente. Cuando son descargados a través de las heces, estos microorganismos entran en el cuerpo de agua. Una vez que estas bacterias son depositadas dentro del agua, ellas están en un medio ambiente que no es favorable para el mantenimiento de las mismas. La sobrevivencia de la bacteria entérica en los ecosistemas acuático natural está siendo estudiada debido al interés para la salud pública y la ecología microbiana. Estudios medio ambientales son necesarios para comprender y documentar la ocurrencia y distribución de indicadores de contaminación y bacteria patógena humana. Para cuantificar y comprender su relación con los relevantes factores medio ambientales, varios investigadores (Ramaiah, 2003; Ruiz et al., 2000) están examinando la distribución de estos grupos de bacterias y ciertos virus en las aguas costeras. La mortalidad y las tasas de sobrevivencia de los indicadores de contaminación fecal como el E. coli en los regímenes marinos están siendo estudiadas. Encontrándose de estos estudios la afirmación persistente de microflora local en el medio ambiente marino. Además, diferentes especies de bacterias incluyendo algunos patógenos sobreviven en 16 agua de mar por una a varias semanas. Una vez introducida dentro del medio ambiente marino estos pueden dispersarse lejos y ampliarse a otras regiones. El drenaje de las cuencas, las aguas servidas domesticas, y otras descargas alteran la abundancia y tipo de población microbiana en el medio ambiente costero. Un conocimiento de la incidencia y la distribución de las especies bacterianas, sus características fisiológicas incluyendo su patogenicidad es importante para adquirir conocimiento sobre la presencia de comunidades microbianas perjudiciales. Para evaluar la importancia de los patógenos microbianos en el medio ambiente marino, la información sobre la carga microbiana en un dado ecosistema es importante. Por otro lado, tales datos pueden ser usados para desarrollar consultas sobre el control o regular su abundancia en cualquier situación ecológica. Estos aspectos están siendo ampliamente investigados y, la importante vigilancia de la contaminación costera no necesita ser sobredimensionada. Sin embargo, estudios sobre abundancia y tipos de indicadores de contaminación de poblaciones bacterianas de los estuarios tropicales son escasos (Nagvenkar y Ramaiah, 2008). Debido a estos vacios en la investigación, el presente estudio evaluó la contaminación microbiana en una zona estuarina tropical altamente afectada(o alterada) por actividades antropogenicas que pueden ser perjudiciales para la salud pública y el balance del ecosistema. 17 3. MATERIALES Y METODOS 3.1 Área de estudio. El estero salado forma parte del ecosistema del estuario del rio Guayas. Se ubica al oeste del referido rio, configurando el borde occidental del delta del estuario (Figura 2). El salado es un sistema estuarino compuesto por una compleja red de drenajes, mientras que desde el punto de vista geomorfológico y oceanográfico es un brazo de mar. Este estero ha sido ampliamente intervenido por asentamientos humanos desde los orígenes mismos de la ciudad. Tiene un comportamiento atípico en sus tramos interiores en comparación con otros estuarios del país, por lo que se considera un lago estancado, con muy poca renovación de agua en sus tramos interiores (Hidroestudios, 2003). Figura 2. Ubicación del área de estudio. La precipitación anual es del 80% en la estación lluviosa (diciembre a abril) y del 20% en la estación seca (mayo a diciembre). La temperatura promedio oscila entre los 20 y 27 °C, una temperatura cálida durante casi todo el año. 18 Se seleccionaron nueve estaciones para el muestreo cuyas ubicaciones se relacionaron con la posible influencia de aportes de agua residual, seis estaciones en el tramo B, y una estación en los tramos, D, E y G (Figura 3, Tabla1). Figura 3. Ubicación de la estaciones de muestreos en el Estero Salado. Tabla 1. Ubicación de la estaciones en el Estero Salado. Estación 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Sitio Puente Av. Linderos Puente Miraflores Puente Alban Borja Puente Las Monjas Dos Tubos La “Y” Puente 5 de junio Puente Portete Boya M2 Coordenadas Geográficas Latitud Longitud 02 09 41.18”S 79 55 15.03”W 02 09 45.12” S 79 55 8.17”W 02 10 00.37” S 79 54 58.97” W 02 10 20.41”S 79 54 45.94” W 02 10 35.31” S 79 54 36.72” W 02 10 41.74”S 79 54 13.57” W 02 11 10.50” S 79 53 54.58” W 02 11 45.06” S 79 56 11.54” W 02 14 31.95” S 79 54 44.04” W 19 Tramo B B B B B B D E G 3.2 Metodología. Se realizaron dos muestreos en marea baja, uno en diciembre del 2009 y otro en enero del 2010, tomando muestras de agua superficial (más o menos a 10 centímetros) y sedimento. Se analizaron 18 muestras (nueve de agua y nueve de sedimento). Las muestras de agua fueron tomadas con frascos estériles con capacidad de 500 ml., y luego en hielo para posterior análisis en el laboratorio. El sedimento se colectó con una draga tipo Van Veen de tres litros de capacidad, la cual fue colocada en fundas de polietileno y después en hielo para su transporte al laboratorio. Para la muestras de agua y sedimento se determino el numero más probable (NMP) de bacterias por la técnica de tubos múltiples, con tres diluciones y tres replicas, los resultados como NMP, lo cual está basado en tablas de probabilidad estadística. Este método permite conocer la densidad bacteriana en la muestra. Para el posicionamiento de las estaciones se utilizo un GPS (marca Garmin 76CSX). 3.2.1 Procesamiento de las muestras (agua y sedimento). Las muestras para enterococos se procesaron de acuerdo al “Stándar Methods for the examination of wáter and wastewater”, 21 st edition USA. Las concentraciones de coliformes totales, coliformes fecales y E.coli se determinaron siguiendo la metodología estándar de tubos múltiples con cinco replicas (NMP), propuesto por Bacteriological Analytical Manual, Food and Drug Administration 2002.Cap. 4 lit. A –F,-USA. Casi todos los métodos usados para detectar coliformes totales, coliformes fecales y E.coli son de enumeración que están basados en la fermentación de la lactosa. El método consta de tres etapas: prueba presuntiva, prueba confirmativa y prueba complementaria. La prueba presuntiva consiste en colocar volúmenes determinados de muestra en una serie de tubos conteniendo caldo de lauril triptosa y son incubados a 35 20 °C durante 24 -40 horas. En esta prueba la actividad metabólica de las bacterias es estimulada vigorosamente y ocurre una selección inicial de organismos que fermentan la lactosa con producción de gas. La formación de gas, constituye una prueba presuntiva positiva para la presencia de bacterias del grupo coliforme. La prueba confirmativa consiste en transferir todos los tubos positivos de la prueba presuntiva a tubos conteniendo caldo lactosado bilis verde brillante 2% y son incubados durante 24 – 48 horas a 35 °C. Esta prueba reduce la posibilidad de resultados falsos gran – positivos que pueden ocurrir por la actividad metabólica de los organismos formadores de esporas. La producción de gas a 35 °C después de las 24 – 48 horas constituye una prueba confirmativa positiva. La prueba complementaria consiste en transferir por inoculación en estrías, las bacterias a partir de los tubos de caldo lactosado bilis verde brillante positivo a placas de agar endo o agar eosina azul de metileno y luego son incubados a 35 °C durante 24 horas. Las colonias típicas y atípicas son transferibles a tubos con caldo lauril triptosa y tubo con agar inclinado. Sera positiva cuando haya producción de gas a partir de la fermentación de la lactosa y por el examen microscópico sea demostrada la presencia de bacilos gran-negativos no esporulados en las bacterias desarrolladas en el agar inclinado. Las muestras de agua y suelo para la determinación de bacterias fueron analizadas en el laboratorio de la compañía Inspectorate del Ecuador S.A. en la ciudad de Guayaquil. Los datos de los parámetros físicos-químicos, se determinaron simultáneamente a la colecta de la bacterias, estos incluyen: temperatura y pH, con un equipo multiparametrico portátil, marca Extrech Instruments (medidor de pH y conductividad con temperatura, rango del pH de 1 a 14 con una resolución de 0.02 y el rango de la temperatura de 0 a 50 °C y una resolución de 0.1 C); la salinidad mediante un refractómetro, marca Acuafauna (Bio-Marine Inc.USA con un rango de 0 a 100 %o y una resolución de 1%o) y el oxigeno disuelto se lo determino mediante el método yodometrico, que es un procedimiento titulometrico basado en la propiedad oxidante del oxigeno disuelto. 21 3.3 Análisis estadístico. 3.3.1 Análisis de regresión múltiple. Para cada grupo bacteriano (coliformes totales, coliformes fecales, Escherichia coli y enterococos) se realizo un análisis de regresión múltiple para determinar cuál de las variables independientes (pH, temperatura, salinidad y oxigeno) influían en la variable dependiente, para ello se utilizo un software estadístico (QED Statistics 1.1, Pisces Conservation Ltda. England, 2007). El método que se aplico fue el de Selección hacia Adelante (Forward), debido a que se inicia sin variables independientes y agrega una variable independiente a la ecuación de regresión en cada iteración. 3.3.2 Análisis de conglomerados (cluster analysis). El análisis de conglomerados (cluster) es una técnica multivariante que busca agrupar elementos(o variables) tratando de lograr la máxima homogeneidad en cada grupo (en este caso las estaciones) y la mayor diferencias entre los grupos. Para representar la estructura jerárquica de la formación de los conglomerados se utiliza el dendrograma, que es una representación grafica que mejor ayuda a interpretar el resultado de un análisis cluster. Se utilizo el software estadístico InfoStat, versión 2008( Di Rienzo et al.). Las estaciones individuales fueron agrupadas tomando en cuenta los valores de los coliformes totales, coliformes fecales, E.coli y enterococos junto con los parámetros físicos-químicos tanto en el agua como en el sedimento. 22 4. RESULTADOS Los datos obtenidos en este estudio fueron evaluados en función de las condiciones que prevalecieron en las nueve estaciones muestreadas en el Estero Salado (Tabla 18 y 19). 4.1 Parámetros físico-químicos. Temperatura (T°C). Los valores fueron constantes en los dos muestreos con una temperatura promedio en diciembre de 27.3°C y en enero de 28.6°C (Figura 4). Dic Ene 40 Temperatura °C 35 30 25 20 15 10 5 0 Puente Av. Puente Linderos Miraflores Puente Alban Borja Puente Dos Tubos Las Monjas La "Y" Puente 5 de Junio Puente Portete Boya (M2) Estaciones de Muestreo Figura 4. Temperaturas (°C) reportadas en las estaciones de muestreo en el Estero Salado, durante diciembre (2009) y enero (2010). Oxigeno Disuelto (OD). Concentraciones bajas de OD, menores a 1 mg/L, se registraron en las primeras estaciones desde el Puente Av. Linderos hasta La “Y” en los dos meses de muestreos, para luego incrementarse a partir del Puente 5 de Junio. En el mes de diciembre las concentraciones más altas de oxigeno (1.56 mg/L) se presentaron en la Boya (M2) y en enero en el Puente Portete (4.42 mg/L) (Figura 5). 23 Es importante mencionar que en algunas estaciones de muestreos se encuentran tuberías que descargan aguas no tratadas o por industrias que vierten directamente sus desechos al estero. Diciembre 2009 Enero 2010 Oxigeno (mg/l) 5 4 3 2 1 0 Puente Av. Puente Puente Puente Las Dos Tubos Linderos Miraflores Alban Borja Monjas La "Y" Puente 5 de Junio Puente Portete Boya (M2) Estaciones de Muestreo Figura 5. Valores de Oxigeno Disuelto (mg/L) reportados en las estaciones de muestreo en el Estero Salado, durante diciembre (2009) y enero (2010). Potencial de Hidrogeno (pH). El pH en diciembre registro un valor promedio de 7.19 y en enero de 7.31, manteniéndose constante en todas las estaciones muestreadas. 9 Diciembre 2009 8 Enero 2010 7 pH 6 5 4 3 2 1 0 Puente Av. Puente Linderos Miraflores Puente Puente Las Dos Tubos Alban Monjas Borja La "Y" Puente 5 de Junio Puente Portete Boya (M2) Estaciones de Muestreo Figura 6. Valores del Potencial de Hidrogeno (pH) reportados en las estaciones de muestreo en el Estero Salado, durante diciembre (2009) y enero (2010). 24 Salinidad (S%o). La salinidad promedio en diciembre fue de 16.8%o, presentando valores bajos (0.0%o) en las estaciones Puente Av. Linderos y Puente Miraflores y el valor más alto se registro en el Puente Portete con 32.0%o. En el segundo muestreo realizado en enero las salinidades disminuyeron con respecto a diciembre, registrando un valor promedio de 12.0%o. Se encontraron valores de cero salinidad en los Puentes de Av. Linderos, Miraflores y Alban Borja y un valor máximo en la estación Boya (M2) de 25%o. 40 Dic Ene Salinidad (‰) 35 30 25 20 15 10 5 0 Puente Av. Puente Puente Puente Las Dos Tubos Linderos Miraflores Alban Borja Monjas La "Y" Puente 5 de Junio Puente Portete Boya (M2) Estaciones de Muestreo Figura 7. Valores del salinidad reportados en las estaciones de muestreo en el Estero Salado, durante diciembre (2009) y enero (2010). 4.2 Parámetros Bacteriológicos. Coliformes totales (agua y sedimento.) La presencia de bacterias coliformes totales en agua fueron muy representativas en el mes de diciembre (2009), registrando valores desde < 180 a >160000 NMP/100mL. Las mayores concentraciones se encontraron en los puentes: Av. Linderos, Miraflores y Alban Borja; mientras que menores concentraciones se presentaron en el resto de estaciones. En cambio el mes de enero (2010) las concentraciones fueron muy bajas desde 84 a 7000 NMP/100g (Figura 8). 25 Coliformes totales (NMP/100ml) 180000 160000 Diciembre 2009 Enero 2010 140000 120000 100000 80000 60000 40000 20000 0 Puente Puente Puente Las Dos Tubos Miraflores Alban Borja Monjas La "Y" Puente 5 de Junio Puente Portete Boya (M2) Estaciones de Muestreo Figura 8. Coliformes totales en agua (NMP/100ml), diciembre (2009) y enero (2010). En lo referente a sedimentos, en diciembre (2009) se evidencio valores altos por contaminación bacteriana, comprendidos entre 1500 a >110000 NMP/100g. Estos valores se encontraron en las estaciones: Puente Av. Linderos, Puente Miraflores, Puente Alban Borja, Puente Las Monjas, Dos tubos y la “Y”. En cambio, en enero dichos valores fueron bajos con rangos de 2800 a 110000 NMP/100g, registrando el valor más alto en el Puente Miraflores (110000 NMP/100g) (Figura 9). Coliformes totales (NPM/100g) 120000 Diciembre 2009 Enero 2010 100000 80000 60000 40000 20000 0 Puente Av. Linderos Puente Alban Borja Dos Tubos Puente 5 de Junio Boya (M2) Estaciones de Muestreo Figura 9. Coliformes totales en sedimento (NMP/100g), diciembre (2009) y enero (2010). 26 Coliformes fecales (agua y sedimento). La concentración de coliformes fecales en agua es similar a la encontrada para coliformes totales para las mismas estaciones y época del año, con un rango de <180 a >160000 NMP/100ml. Mientras que enero (2010) las concentraciones fueron muy bajas Coliformes fecales (NMP/100ml) con valores de 4 a 450 NMP/100ml (Figura 10). Diciembre 2009 Enero 2010 180000 160000 140000 120000 100000 80000 60000 40000 20000 0 Puente Av. Puente Linderos Miraflores Puente Puente Las Dos Tubos Alban Monjas Borja La "Y" Puente 5 de Junio Puente Portete Boya (M2) Estaciones de Muestreo Figura 10. Coliformes fecales en agua (NMP/100g), diciembre (2009) y enero (2010). En el sedimento, las concentraciones de coliformes fecales fueron muy similares a las encontradas para coliformes totales en el mismo mes y estaciones (Av. Linderos, Miraflores, Las Monjas, Dos Tubos y la “Y”), con valores que oscilaron entre <3 a >110000 NMP/100g; concentraciones menores se registraron en la estación Puente Alban Borja (210 NMP/100g) y Puente 5 de Junio (210 NMP/100g). En tanto que en enero los valores fueron bajos con rangos de <300 a 4300 NMP/100g. 27 Coliformes Fecales (NPM/100g) 120000 110000 100000 90000 80000 70000 60000 50000 40000 30000 20000 10000 0 Diciembre 2009 Enero 2010 Puente Av. Linderos Puente Alban Borja Dos Tubos Puente 5 de Junio Boya (M2) Estaciones de Muestreo Figura 11. Coliformes fecales en sedimento (NMP/100g), diciembre (2009) y enero (2010). Escherichia coli (agua y sedimento). La bacteria Escherichia coli, en el agua presenta la misma tendencia en su concentración, registrando los valores más altos en las primeras estaciones (Puente Av. Linderos, Puente Miraflores y Puente Alban Borja) con concentraciones que van de <180 a >160000 NMP/100ml. En el resto de estaciones fueron pocas representativas. Para el siguiente muestreo en enero, las concentraciones fueron bajas con valores de Echerichia coli (NMP/100ml) <1,8 a <180 NMP/100ml (Figura 12). 180000 160000 140000 120000 100000 80000 60000 40000 20000 0 Dic Puente Av. Puente Linderos Miraflores Puente Puente Las Dos Tubos Alban Monjas Borja La "Y" Puente 5 de Junio Puente Portete Ene Boya (M2) Estaciones de Muestreo Figura 12. Escherichia coli en agua en el Estero Salado, durante diciembre 2009 y enero 2010. 28 En sedimento, durante el mes de diciembre (2009), se encontraron concentraciones de Escherichia coli en un rango de <300 a >110000 NMP/100g. Las estaciones fueron las mismas que han registrado las concentraciones más elevadas con el resto de bacterias. En enero (2010), la tendencia fue baja con valores de <180 a <300 Echerichia coli (NPM/100g) NMP/100g (Figura 13). 120000 100000 Diciembre 80000 enero 60000 40000 20000 0 Puente Av. Linderos Puente Alban Borja Dos Tubos Puente 5 de Junio Boya (M2) Estaciones de Muestreo Figura 13. Escherichia coli en sedimento en el Estero Salado, durante diciembre 2009 y enero 2010. Enterococos (agua y sedimento). En el análisis de agua realizado el mes de diciembre del 2009, se encontró presencia de enterococos en todas las estaciones muestreadas en un rango de <180 a 7900NMP/100ml. La estación ubicada en el Puente Miraflores fue la que registro la concentración más elevada (7900 NMP/100ml) y el valor más bajo en la estación Boya (M2) con <180 NMP/100ml. Mientras que en enero de 2010, se encontraron valores muy bajos, de 6 NMP/100ml en la “Y” y 610 NMP/100ml en la estación Boya (M2) (Figura 14). En cambio, en las muestras de sedimentos analizadas en diciembre (2009), mayor cantidad de esta bacteria se observo en la mayoría de estaciones entre un rango de <300 a 29000 NMP/100g. La concentración más elevada se presento en Puente Las Monjas (2900 NMP/100g) y la más baja en la Boya (M2. En enero, menores concentraciones de enterococos se observaron en los sedimentos, con valores que 29 oscilaron entre <300 a 3800 NMP/100g. Los valores más bajos fueron encontrados en los puentes: 5 de junio y Portete (<300 NMP/100g) y el valor más alto en el Puente Miraflores (3800 NMP/100g) (Figura15). 9000 Dic Enterococos (NMP/100ml) 8000 Ene 7000 6000 5000 4000 3000 2000 1000 0 Puente Av. Puente Puente Puente Las Dos Tubos Linderos Miraflores Alban Borja Monjas Estaciones de Muestreo La "Y" Puente 5 de Junio Puente Portete Boya (M2) Figura 14. Valores estimados de enterococos en agua en el Estero Salado, durante diciembre 2009 y enero 2010. 35000 Enterococos (NPM/100g) 30000 25000 Diciembre Enero 20000 15000 10000 5000 0 Puente Av. Puente Puente Puente Las Dos Tubos Linderos Miraflores Alban Borja Monjas La "Y" Puente 5 de Junio Puente Portete Boya (M2) Estaciones de Muestreo Figura 15. Valores estimados de enterococos en sedimento en el Estero Salado, durante diciembre 2009 y enero 2010. 30 Se realizó un análisis de regresión múltiple donde se determino que la salinidad y la temperatura fueron los parámetros que más influyeron en concentración de las bacterias en el agua (diciembre 2009). Se encontraron valores significativos entre la salinidad y coliformes totales (R = 0,916, p = 001), coliformes fecales (R = 0.915, p = 0.001), E.coli (R = 0.915, p = 0.001); y la temperatura con enterococos (R = 0.736, p = 0.024) (Figuras 16, 17, 18 y 19). 1800 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 0 35 Coliformes 30 25 20 15 10 salinidad Salinidad ‰ Coliformes totales (NMP/ml) Coliformes totales vs Salinidad /Agua /Diciembre 5 0 Puente Av. Puente Puente Puente Las Dos Tubos Linderos Miraflores Alban Borja Monjas La "Y" Puente 5 de Junio Puente Portete Boya (M2) Coliformes totales (agua /diciembre 2009) = 1576.017- 57.55 ‰ (p = 0.001) Figura 16. Coliformes totales vs Salinidad /Agua (diciembre 2009). 1800 C. Fecales 30 1600 Salinidad 1400 25 1200 20 1000 15 800 600 10 400 5 Salinidad ‰ Coliformes fecales (NMP/ml) Coliformes fecales vs salinidad /Agua /Diciembre 35 200 0 0 Puente Puente Puente Av. Miraflores Alban Linderos Borja Puente Dos Tubos La "Y" Las Monjas Puente 5 Puente Boya (M2) de Junio Portete Coliformes fecales (agua /diciembre 2009) = 1567.18 - 60.85 ‰ (p = 0.001) Figura 17. Coliformes fecales vs salinidad /Agua (diciembre 2009). 31 E. coli vs Salinidad /Agua /Diciembre 35 E.coli 30 25 20 15 10 Salinidad Salinidad ‰ E. coli (NMP/ml) 1800 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 0 5 0 Puente Puente Puente Av. Miraflores Alban Linderos Borja Puente Dos Tubos Las Monjas La "Y" Puente 5 de Junio Puente Boya (M2) Portete E. coli (agua /diciembre 2009) = 1567.08 - 60.87 ‰ (p = 0.001) Figura 18. E. coli vs Salinidad /Agua (diciembre 2009). 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 30 Enterococos 29 28 27 26 25 Temperatura °C Enterococos (NMP/ml) Enterococos vs Temperatura /Agua /Diciembre Temperatura 24 23 Puente Puente Puente Av. Miraflores Alban Linderos Borja Puente Dos Tubos Las Monjas La "Y" Puente 5 de Junio Puente Boya (M2) Portete Enterococos (agua /diciembre 2009) = -317.35+12.27 (p = 0.024) Figura 19. Enterococos vs Temperatura /Agua (diciembre 2009). En las muestras de sedimentos en diciembre (2009), el parámetro que mas influyo fue el oxigeno, obteniéndose las siguientes correlaciones: oxigeno y coliformes totales (R = 0.928, p = 0.000), coliformes fecales (R = 0.921, p = 0.000), E.coli (R = 0.916 p = 0.0001) y enterococos (R = 0.838, p = 0.005) (Figuras 20, 21, 22, y 23). 32 Coliformes totales vs Oxigeno /Sedimento /Diciembre 1.8 C. totales 1.6 1000 1.4 800 1.2 1 600 0.8 400 0.6 0.4 200 Oxigeno (mg/l) Oxigeno (mg/l) Coliformes totales (NMP/g) 1200 0.2 0 0 Puente Puente Puente Av. Miraflores Alban Linderos Borja Puente Dos Tubos La "Y" Las Monjas Puente 5 Puente Boya (M2) de Junio Portete Coliformes totales (sed /diciembre 2009) = 1239.18-886.48 OD (p = 0.000) Figura 20. Coliformes totales vs Oxigeno /Sedimento (diciembre 2009). 1200 1.8 1.6 1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 1000 800 600 400 200 0 Puente Puente Puente Av. Miraflores Alban Linderos Borja Puente Dos Tubos La "Y" Las Monjas C. Fecales Oxigeno (mg/l) Coliformes fecales (NMP/g) Coliformes fecales vs Oxigeno /Sedimento /Diciembre Puente 5 Puente Boya (M2) de Junio Portete Coliformes fecales (sed /diciembre 2009) = 1238.45-909.55 OD (p = 0.000) Figura 21. Coliformes fecales vs Oxigeno /Sedimento (diciembre 2009). 33 Oxigeno (mg/l) E. coli vs Oxigeno /Sedimento /Diciembre 1200 1.6 1000 Oxigeno (mg/l) 1.4 800 1.2 1 600 0.8 400 0.6 Oxigeno (mg/l) E. coli (NMP/g) E.coli 1.8 0.4 200 0.2 0 0 Puente Puente Puente Av. Miraflores Alban Linderos Borja Puente Dos Tubos La "Y" Las Monjas Puente 5 Puente Boya (M2) de Junio Portete E. coli (sed /diciembre 2009) = 1238.45-909.55 OD (p = 0.000) Figura 22. E. coli vs Oxigeno /Sedimento (diciembre 2009). Enterococos vs Oxigeno/ Sedimento/ Diciembre 1.8 1.6 1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 300 250 200 150 100 50 0 Puente Puente Puente Av. Miraflores Alban Linderos Borja Puente Dos Tubos La "Y" Las Monjas Enterococo Oxigeno (mg/l) Enterococo (NPM/g) 350 Oxigeno (mg/l) Puente 5 Puente Boya (M2) de Junio Portete Enterococos (sed /diciembre 2009) = 228.99-165.33 OD (p = 0.005) Figura 23. Enterococos vs Oxigeno/ Sedimento (diciembre 2009). En el muestro realizado en enero (2010), en agua, el parámetro que mas influyo fue el Oxigeno de forma significativa. Las correlaciones observadas entre el oxigeno y coliformes totales fueron: (R = 0.911, p = 0.002), con coliformes fecales (R = 0.979, p = 0.000), E.coli (R = 0.961, p = 0.000) y enterococos (R = 0.928, p = 0.001) (Figuras 24, 25, 26 y 27). 34 Coliformes totales vs Oxigeno/ Agua/ Enero 5 4.5 4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 C. totales (NMP/ml) 70 60 50 40 30 20 10 0 Puente Puente Puente Av. Miraflores Alban Linderos Borja Puente Dos Tubos Las Monjas La "Y" Puente 5 de Junio Coliformes Oxigeno (mg/l) 80 Oxigeno (mg/l) Puente Boya (M2) Portete Coliformes totales (agua /enero 2010) = -0.198+12.13 OD (p = 0.002) Figura 24. Coliformes totales vs Oxigeno/ Agua (enero 2010). 5 4.5 4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 Puente Puente Puente Av. Miraflores Alban Linderos Borja Puente Dos Tubos La "Y" Las Monjas Coliformes Oxigeno (Mg/l) C. fecales (NMP/ml) Coliformes fecales vs Oxigeno/ Agua/ Enero 5 4.5 4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 Puente 5 Puente Boya (M2) de Junio Portete Coliformes fecales (agua /enero 2010) = -0.076+0.913 OD (p = 0.000) Figura 25. Coliformes fecales vs Oxigeno/ Agua (enero 2010). 35 Oxigeno (mg/l) 2 1.8 1.6 1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 5 4.5 4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 Puente Av. Puente Puente Puente Las Dos Tubos Linderos Miraflores Alban Monjas Borja La "Y" Puente 5 de Junio E. coli Oxigeno (mg/l) E. coli(NMP/ml) E. coli vsOxigeno/ Agua/ Enero Oxigeno (mg/l) Puente Boya (M2) Portete E. coli( agua /enero 2010) = -0.015+0.45 OD (p = 0.000) Figura 26. E. coli vs Oxigeno/ Agua (enero 2010). Enterococos vs Oxigeno/ Agua/ Enero 5 4.5 4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 6 5 4 3 2 1 0 Puente Av. Puente Linderos Miraflores Puente Alban Borja Puente Las Dos Tubos Monjas La "Y" Puente 5 de Junio Puente Portete Enterococos Oxigeno (mg/l) Enterococos (NMP/ml) 7 Boya (M2) Enterococos ( agua /enero 2010) = -0.145+ 1.06 OD (p = 0.001) Figura 27. Enterococos vs Oxigeno/ Agua (enero 2010). Los parámetros que influyeron significativamente en el sedimento fueron el pH y la temperatura, cuyas correlaciones fueron: pH y coliformes totales (R = 0.839, p = 0.009); temperatura y coliformes fecales (R = 0, 904, p = 0.002), temperatura y enterococos (R = 0.920, p = 0.001). Con E.coli ninguna variable fue seleccionada para incluirla en el modelo (Figura 28, 29 y 30). 36 Oxigeno (mg/l) 1200 7.8 1000 7.6 800 7.4 600 7.2 400 7 200 6.8 Coliformes p.H 0 pH C. totales (NMP/g) Coliformes totales vs pH/ Sedimento/ Enero 6.6 Puente Av. Puente Puente Puente Las Dos Tubos Linderos Miraflores Alban Monjas Borja La "Y" Puente 5 de Junio Puente Boya (M2) Portete Coliformes totales (sed /Enero 2010) = -10296.42+1438.92 pH (p = 0.009) Figura 28. Coliformes totales vs pH/ Sedimento (enero 2010). 32 Coliformes 31 30 29 28 27 26 25 24 Puente Av. Puente Puente Puente Las Dos Tubos Linderos Miraflores Alban Monjas Borja La "Y" Puente 5 de Junio Puente Boya (M2) Portete Coliformes fecales (sed /Enero 2010) = 243.38- 7.87°C (p = 0.002) Figura 29. Coliformes fecales vs Temperatura/ Sedimento (enero 2010). 37 Temperatura °C C. totales (NMP/g) Coliformes fecales vs Temperatura/ Sedimento/ Enero 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 Temperatura 40 32 35 31 30 30 25 29 20 28 15 27 10 26 5 25 0 Enterococos Temperatura Temperatura °C Enterococos (NMP/g) Enterococos vs Temperatura/ Sedimento/ Enero 24 Puente Av. Puente Puente Puente Las Dos Tubos Linderos Miraflores Alban Borja Monjas La "Y" Puente 5 de Junio Puente Portete Boya (M2) Enterococos (sed /Enero 2010) = 234.23 - 7.59 °C (p = 0.001) Figura 30. Enterococos vs Temperatura/ Sedimento (enero 2010). Del análisis del clúster, en agua y sedimento, se identificaron cinco grupos similares en el mes diciembre del 2009. Dentro de los primeros grupos se encuentran las estaciones de mayor contaminación, encontrándose estaciones las más representativas en el Tramo B (Av. Linderos, Puente Miraflores y Puente Alban Borja). Mientras que en más baja concentración se encuentran las estaciones localizadas en los Tramos D, E y G (Figuras 31 – 38, Tablas 2 – 9) Tabla 2. Análisis de conglomerados Coliformes totales en agua diciembre 2009 Cluster 1 Figura 31. Análisis de conglomerados Coliformes totales en agua diciembre 2009. 38 Observaciones Miraflores, Linderos 2 Portete, 5 de Junio 3 Las monjas, La Y, Dos tubos 4 5 Alban Borja Boya Tabla 3. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en agua diciembre 2009 Cluster 1 Observaciones Miraflores, Linderos 2 Portete, 5 de Junio 3 Las monjas, La Y, Dos tubos 4 5 Alban Borja Boya Figura 32. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en agua diciembre 2009. Tabla 4. Análisis de conglomerados Escherichia coli en agua diciembre 2009 Figura 33. Análisis de conglomerados Escherichia coli en agua diciembre 2009 39 Cluster 1 Observaciones Miraflores, Linderos 2 Portete, 5 de Junio 3 Las monjas, La Y, Dos tubos 4 5 Alban Borja Boya Tabla 5. Análisis de conglomerados Enterococos en agua diciembre 2009 Cluster 1 Observaciones Portete, 5 de Junio 2 Las Monjas, Alban Borja 3 4 5 6 La y, Dos tubos Boya Miraflores Linderos Figura 34. Análisis de conglomerados Enterococos en agua diciembre 2009 Tabla 6. Análisis de conglomerados Coliformes totales fecales en sedimento diciembre 2009. Cluster Figura 35. Análisis de conglomerados Coliformes totales fecales en sedimento diciembre 2009. 40 Observaciones 1 Miraflores, Linderos 2 Las monjas, Alban Borja 3 La Y, Dos tubos 4 Portete, 5 de Junio 5 Boya Tabla 7. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en sedimento diciembre 2009. Cluster 1 Observaciones Miraflores, Linderos 2 La y, Dos tubos, Monjas 3 Portete, 5 de Junio 4 5 Alban Borja Boya Figura 36. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en sedimento diciembre 2009. Tabla 8. Análisis de conglomerados Escherichia coli en sedimento diciembre 2009 Figura 37. Análisis de conglomerados Escherichia coli en sedimento diciembre 2009. 41 Cluster 1 Observaciones Miraflores, Linderos 2 La y, Dos tubos, Monjas 3 Portete, 5 de Junio 4 5 Alban Borja Boya Tabla 9. Análisis de conglomerados Enterococos en sedimento diciembre 2009 . Cluster 1 Observaciones Miraflores, Linderos 2 Monjas, Alban Borja 3 La Y, Dos tubos Portete, 5 de Junio 4 5 Boya Figura 38. Análisis de conglomerados Enterococos en sedimento diciembre 2009. En el mes enero 2010, en agua y sedimento, se encontraron valores menores en comparación con el mes de diciembre, identificándose tres y cuatro grupos similares. (Figuras 39 – 46, Tablas 10 – 17). Tabla 10. Análisis de conglomerados Coliformes totales en agua enero 2010. Cluster 1 Figura 39. Análisis de conglomerados Coliformes totales en agua enero 2010. 42 Observaciones Miraflores, Linderos, Alban Borja 2 Monjas, La Y, Dos tubos 3 Porte, 5 de Junio, Boya Tabla 11. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en agua enero 2010. Cluster 1 Observaciones Miraflores, Linderos, Alban Borja 2 Monjas, La Y, Dos tubos 3 Porte, 5 de Junio, Boya Figura 40. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en agua enero 2010. Tabla 12. Análisis de conglomerados Escherichia coli en agua enero 2010 Cluster 1 Figura 41. Análisis de conglomerados Escherichia coli en agua enero 2010 43 Observaciones Miraflores, Linderos, Alban Borja 2 Monjas, La Y, Dos tubos 3 Porte, 5 de Junio, Boya Tabla 13. Análisis de conglomerados Enterococos en agua enero 2010 Cluster 1 Observaciones Miraflores, Linderos, Alban Borja 2 Monjas, La Y, Dos tubos 3 Porte, 5 de Junio, Boya Figura 42. Análisis de conglomerados enterococos en agua enero 2010 Tabla 14. Análisis de conglomerados Coliformes totales en sedimento enero 2010. Figura 43. Análisis de conglomerados Coliformes totales en sedimento enero 2010 44 Cluster 1 Observaciones Linderos, Alban Borja, Las Monjas, La Y, Dos Tubos 2 5 de Junio, Portete, Boya 3 Miraflores Tabla 15. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en sedimento enero 2010. Cluster 1 Observaciones Linderos, Las Monjas 2 Miraflores, Alban Borja 3 La Y, Dos tubos 5 de Junio, Portete, Boya 4 Figura 44. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en sedimento enero 2010 Tabla 16. Análisis de conglomerados Escherichia coli en sedimento enero 2010 Cluster 1 Figura 45. Análisis de conglomerados Escherichia coli en sedimento enero 2010. 45 Observaciones Miraflores, Lindero, Alban Borja 2 Portete, 5 de Junio 3 Las Monjas, La Y, Dos Tubos 4 Boya Tabla 17. Análisis de conglomerados Enterococos en sedimento enero 2010 Cluster 1 2 3 4 Figura 46. Análisis de conglomerados Enterococos en sedimento enero 2010. 46 Observaciones Las Monjas, Linderos, Alban Borja La Y, Dos Tubos 5 de Junio, Portete, Boya Miraflores 5. DISCUSION El presente estudio indica que la contaminación microbiana en el Estero Salado es el resultado de contribuciones de fuentes de contaminación, aunque posiblemente la principal sea el tratamiento inadecuado de aguas residuales (urbanas e industrializadas) y su vertido a través de tuberías a lo largo del estero. Sin embargo este estudio no toma en cuenta la contribución de la escorrentía durante el periodo de precipitación, el cual puede causar entrada local de bacteria fecal. Los niveles elevados de contaminación pueden presentar riego en la salud pública asociados con actividades recreacionales (botes y natación) a través del estero. Estos niveles de indicadores fecales permitirán a ayudar a las autoridades a determinar los riegos en las aguas del estero y cuáles son las prioridades en el manejo sanitario. Sobre la base de estos resultados, se pueden definir áreas de alta y baja contaminación usando los indicadores de contaminación y tomando en cuenta la ocurrencia de coliformes totales, coliformes fecales, E.coli y enterococos. Dependiendo sobre los tramos del estero salado es posible caracterizar aquellos factores que determinan la calidad microbiana del agua: en el Tramo B del estero, la más contaminada por bacterias fecales y a medida que se va hacia la desembocadura los niveles de contaminación son más bajos. La calidad del agua y sedimento fue significativamente afectado por la precipitación, ya que los niveles de contaminación fueron menores, a diferencia de otros estudios que afirman lo contrario (Ferguson et al., 1996). En lo que se refiere al sedimento, los valores altos sugieren que ellos actúan como reservorios, los cuales pueden ser relanzados al agua circundante debido a las fuertes precipitaciones y a las corrientes de marea. Los resultados obtenidos en el Estero Salado en los meses de diciembre (2009) y enero (2010) demostraron que existe una fuerte contaminación microbiana tanto en agua como en el sedimento, cuyos valores sobrepasan los límites permisibles de acuerdo a la legislación ecuatoriana (Ministerio del Ambiente, 2002) y a las normas internacionales 47 de APHA. Los parámetros físicos-químicos analizados (pH, Temperatura) se encontraron dentro de los límites máximos permitidos para aguas estuarinas de acuerdo a las normas de calidad ambiental. En cuanto al oxigeno se determino valores por debajo del límite máximo permisible (6 mg/L). Estos valores fueron similares a los encontrados por Cárdenas (2009) y por Medina et al. (2007) en las inmediaciones de la Reserva de Producción Faunística Manglar el Salado cuyos valores fueron de 0.99 mg/L y de 6.65 mg/L. Los valores de salinidad y oxigeno a lo largo del tramo B del Estero Salado fueron muy fluctuantes. Estas variaron desde cero en las estaciones Puente Av. Linderos, Puente Miraflores y Puente Alban Borja, donde hay poca renovación de marea; así como por la aportación de aguas provenientes de las alcantarillas que son vertidas al Estero, por aportación de aguas lluvias y de agua dulce desde el rio que se lo realiza a través del Canal de Cascajal, cuyos valores están entre 12%o y 23%o y se debe a que las corrientes de marea empujan aguas de las dos cargas fluviales del Guayas hacia el estero (Pesantes 1998). Luego estos valores fueron incrementándose paulatinamente en las demás estaciones hasta llegar a tener salinidades de 27%o y oxigeno de 4.35 mg/L. debido a que en estos tramos hay mayor renovación de agua por efecto de la marea. Los valores estimados de coliformes totales, coliformes fecales, E coli y enterococos en los datos muestreados en diciembre(2009) en agua y sedimento no cumplen con las normas establecidas, debido a que si se comparan con los estándares internacionales que establecen un máximo de 1000NMP/100 ml para coliformes totales, 200NMP/100mL para coliformes fecales, para enterococos 35NMP/100mL, para E coli no hay valor para el agua marina de acuerdo a la Agencia de Protección del Medio Ambiente(USEPA,1986). A excepción de la Boya M2 que presento un valor de <180NMP/100mL para coliformes totales y para coliformes fecales valores también menores de <180NMP/100mL para la estaciones de Boya M2 y Puente Portete. 48 En muchas investigaciones de sobrevivencia, E. coli fue el único organismo estudiado y el uso de este como un indicador de contaminación fecal para todos los ecosistemas está siendo cuestionado. Algunos estudios han indicado que el E. coli se muere mucho más rápido que la Salmonella spp., y por consiguiente no es un indicador adecuado para la presencia de este patógeno (Burton et al., 1987). Las altas concentraciones de bacterias coliformes encontradas en el Estero Salado concuerdan por lo manifestado por Winfield (2003) que afirma que existen altas concentraciones en numerosas regiones tropicales. El análisis de regresión múltiple sugiere que la salinidad, temperatura y oxigeno influyen las concentraciones bacterianas. Las estaciones caracterizadas por baja salinidad, en general, también están caracterizadas por altos niveles de indicadores bacterianos, igualmente sucede con el oxigeno disuelto y la temperatura, estos resultados son sostenidos por los análisis de correlación encontrados en otros estudios similares (Solo-Gabriele et.al., 2008). La significancia de la salinidad puede ser debido a que las bacterias mueren más rápidamente dentro de un rango de agua salina o posiblemente está asociada con una fuente grande de contribución dentro del estero. Este parámetro solo nos indica elevados niveles de coliformes en la presencia de baja salinidad. El presente estudio también muestran una elevada concentración de contaminación bacteriana en el sedimento y el parámetro asociado en la correlación nos muestran que es el oxigeno, esta alta concentración de bacterias coliformes puede indicar la gran capacidad de supervivencia en el sedimento, estos patógeno pueden sobrevivir en los sedimentos por meses, que concuerda con los estudios efectuados por Burton en 1987 en los sedimentos de agua dulce. 49 Tabla 18. Parámetros abióticos y bacteriológicos en las estaciones muestreadas en el Estero Salado en diciembre de 2009. Coliformes Totales Estación pH o C So/oo Agua (NMP/100ml) Puente Av. Linderos Puente Miraflores Puente Alban Borja Puente Las Monjas Coliformes Fecales E. coli Enterococos O. D. mg/l Sed. (NMP/100gr) Agua (NMP/100ml) Sed. (NMP/100gr) Agua (NMP/100ml) Sed. (NMP/100gr) Agua (NMP/100ml) Sed. (NMP/100gr) 7.35 29.5 0 0 >160000 >110000 160000 >110000 160000 >110000 1700 16000 7.27 29.7 0 0 >160000 >110000 >160000 >110000 >160000 >110000 7900 21000 7.13 27.4 7 0.24 >160000 >110000 160000 21000 160000 21000 2000 6400 7.06 27.1 15 0.27 18000 >110000 2100 >110000 2100 >110000 1400 29000 Dos Tubos 7.23 26.9 22 0.41 4700 >110000 1700 >110000 1400 >110000 450 21000 La "Y" 7.3 26.7 24 0.37 1700 >110000 450 >110000 450 >110000 680 15000 Puente 5 de Junio 6.96 25.8 25 0.85 28000 29000 <830 21000 830 15000 830 3800 Puente Portete 7.06 25.7 32 1.06 11000 2800 <180 <300 <180 <300 610 <300 Boya (M2) 7.32 26.6 27 1.56 <180 1500 <180 360 <180 <360 180 <300 50 Tabla 19. Parámetros abióticos y bacteriologicos en las estaciones muestreadas en el Estero Salado en enero de 2010. Estación pH o C So/oo O. D. mg/l Coliformes Totales Coliformes Fecales Agua (NMP/100ml) Sed. (NMP/100gr) Agua (NMP/100ml) Sed. (NMP/100gr) E. coli Agua (NMP/100ml) Enterococos Sed. (NMP/100gr) Agua (NMP/100ml) Sed. (NMP/100gr) Puente Av. Linderos 7.37 26.8 0 0 220 24000 24 2100 <1.8 <300 20 2100 Puente Miraflores 7.72 26.7 0 0 140 110000 9.3 3500 <1.8 <300 9.2 3800 Puente Alban Borja 7.46 26.9 0 0 84 21000 11 4300 <1.8 <300 10 3600 Puente Las Monjas 7.21 27.4 9 0.2 97 15150 9 3300 <1.8 <300 10 2900 Dos Tubos 7.05 28.1 17 0.4 110 9300 7.8 2300 <1.8 <300 9.1 2100 La "Y" 7.13 28.7 17 0.53 94 7500 4 1400 <1.8 <300 6 1100 Puente 5 de Junio 7.22 30.9 15 2.75 4000 3600 200 300 <180 <300 180 <300 Puente Portete 7.34 30.1 22 4.42 3300 3800 370 360 <180 <300 360 <300 Boya (M2) 7.22 30.5 25 4.35 7000 2800 450 360 <180 >180 610 360 51 Las bajas concentraciones de estos microorganismos que fueron detectados, tanto en el agua como en el sedimento se podría relacionar con la alta velocidad de la corriente de marea, consumo de oxigeno, acumulación de materia orgánica, precipitaciones, la estrechez del canal y la inestabilidad de los sedimentos de fondo. Estos resultados se correlacionan con los encontrados por Ferguson et al. en sistemas estuarinos y también por Becerra-Tapia en 1995. La distribución espacial de los microorganismos, tanto agua como sedimento parece estar bien correlacionado con fuentes de contaminación fecal cerca de las estaciones Av. Linderos, Puente Miraflores y Puente Alban Borja. La mayoría de los estudios microbiológicos realizados en ambientes costeros coinciden en reportar que las concentraciones más altas se localizan en los sedimentos y las menores en agua superficial y esto depende en gran medida de los aportes fluviales, precipitaciones y las corrientes de marea que juegan un papel importante dentro de los ecosistemas costeros (Becerra-Tapia, 1995). 52 6. CONCLUSIONES Los resultados muestran que la calidad del Estero Salado está fuertemente relacionada con la actividad humana. Los valores altos se encontraron en el Tramo B (diciembre), y en los Tramos D, E y G (enero). La salinidad, la temperatura y el oxigeno ejercen un efecto inhibitorio sobre la viabilidad de los organismos indicadores. En el análisis de conglomerados en muestras de agua (2009) las estaciones más contaminadas fueron: Puente Miraflores, Av. Linderos: coliformes totales, coliformes fecales y E. coli. Puente Portete y Puente 5 de junio: Enterocos. En las muestras de sedimento (2009) las estaciones más contaminadas fueron: Puente Miraflores, Av. Linderos: coliformes totales, Coliformes fecales y E. coli. En muestras de agua (2010) las estaciones más contaminadas fueron: Puente Miraflores, Av. Linderos y Alban Borja: Coliformes totales, Coliformes fecales, E. coli y enterococos En las muestras de sedimento (2010) las estaciones más contaminadas fueron: Av. Linderos, Alban Borja, las Monjas, la “Y” y Dos Tubos: Coliformes totales. Puente Lindero y las Monjas: Coliformes fecales Puente Miraflores, Av. Linderos y Alban Borja: E. coli. Puentes Las monjas, Av. Linderos y Puente Alban Borja: enterococos 53 7. RECOMENDACIONES En base a los resultados de este estudio se recomienda: -Tratamiento de las aguas servidas antes de ser vertidas al Estero Salado. -Reasentamiento a programas habitacionales -Realizar Campañas de educación ambiental a los pobladores que se encuentran asentados a lo largo de las orillas del Estero Salado. -Recuperar las orillas para planes de reforestación Han pasado años de destrucción, discusión, controversia y desinformación, ahora es necesario tomar decisiones en lo referente a la protección (Gobierno), restauración (Municipio) e investigación (Universidades) en un marco de cooperación entre ellas para la recuperación definitiva del Estero Salado. 54 8. LITERATURA CITADA American Public Health Association (APHA), 2005. Standard methods for the examination of water and wastewater, 21th ed.American public Health Association, Washington, D.C. Barrera Escorcia, G., y I.Wong Chang, 1996. 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