1 Fuente: Memorias del XXXII Convención Nacional de la Asociación Nacional de Especialistas en Ciencias Avícolas, 25 al 28 de abril de 2007, Acapulco Guerrero. COMPATIBILIDAD DEL USO DE DYNAMUTILIN®1 Y COCCIDIOSTATOS IONOFOROS EN POLLOS DE ENGORDA. José Arce Menocal*, Carlos López Coello*, Ernesto Ávila*, Fernando VázquezRojas**, Javier Venosa**, Eusebio González** *UMSNH-FMVZ, ** UNAM-FMVZ, ***Novartis Animal Health S.A. de CV. 1 DYNAMUTILIN® Y Y DYNAMUTILIN CTC SON MARCAS REGISTRADAS POR NOVARTIS RESUMEN Se realizo un trabajo de investigación con el objeto de corroborar la compatibilidad de la medicación con Tiamulina-Clortetraciclina (Dynamutilin CTC) + clortetraciclinas + salinomicina, de manera simultanea en la alimentación de pollo de engorda. Se utilizaron 2100 pollitos sexados (negativos a Ms y Mg), los cuales se mantuvieron en produccion hasta los 42 dias de edad. Las aves fueron distribuidas bajo un diseño completamente al azar en 3 tratamientos con 7 replicas de 100 aves. Los tratamientos consistieron en: 1) Adicion en el alimento durante los primeros 21 días de edad de Tiamulina- Clortetraciclina (Dynamutilin CTC) a 33 ppm + clortetraciclinas 100 ppm + salinomicina 60 ppm. 2) Adicion en el alimento durante los primeros 21 días de edad de Tiamulina- Clortetraciclina (Dynamutilin CTC) a 50 ppm + clortetraciclinas 150 ppm + salinomicina 60 ppm. 3) Testigo, utilizando unicamente Salinomicina 60 ppm. La combinación de Tiamulina (33.3 y 50 ppm) + Clortetraciclina (100 y 150ppm) con Salinomicina ( 60 ppm) se mostraron compatibles sin signos de toxicidad y sin alterar los parámetros fisiológicos. El índice de productividad de los grupos tratados con Tamulina+Clortetraciclina y control, no mostraron diferencias. Este estudio confirma la posibilidad de utilizar esta combinación en alimentos medicados para pollos. La combinación puede ser útil en el alimento en forma temprana en parvadas con antecedentes de Mycoplasmosis, clostridiasis, espiroquetal y bacterias asociadas a la enfermedad complicada. diarrea crónica respiratoria 2 ANTECEDENTES. La Mycoplasmosis es una enfermedad respiratoria importante en pollos de engorda. La Tiamulina (Dynamutilin®, Denagard®) ha demostrado ser el antimicoplásmico por excelencia dada su alta potencia que se manifiesta con las más bajas concentraciones mínimas inhibitorias (MIC) en las cepas de mycoplasmas aisladas en campo (Hannan, et al.,1997). Dicha potencia se ha mostrado en estudios comparativos (ver cuadro 1,1a) que han evaluado: Tiamulina (MIC 90% 0.001 µg/ml), tilosina (2.5 µg ug/ml), oxitetraciclina (0.5 µg/ml) y quinolonas (0.1 µg/ml) para cepas de Mycoplasma gallisepticum y MIC 90% de 0.25 µg/ml para tiamulina, 0.5 µg/ml para quinolonas, 50µg/ml para tilosina y 100 µg/ml para oxitetraciclina con cepas de synoviae (Gautier-Bouchardon,AV., et al, 2002., Mycoplasma Hannan, et al 1997). Dynamutilin® (tiamulina) se ha utilizado en programas integrales de prevención, control y erradicación de mycoplasmas en aves y cerdos (Diao Youxiang, et al., 2003, Hun-hi Choi, et al., 2004). Por otra parte, los ionóforos monovalentes que se emplean para la prevención de la Coccidiosis en las dietas de los pollos, no son compatibles con tiamulina a dosis mayores de 100 ppm, ya que los dos compuestos compiten en su metabolismo y esto puede inducir la toxicidad en las aves caracterizada por debilidad y signos nerviosos. La compatibilidad de la medicación está documentada a dosis de 30 a 50 ppm de tiamulina en presencia de 60 – 100 ppm de coccidiostatos ionóforos en pollo de engorda con excelentes resultados (Stipkovits, L., et al., 1999, Diao Youxiang, et al., 2003). Un programa de prevención compatible, constituye una herramienta valiosa para control de la enfermedad respiratoria crónica complicada en pollos de engorda. Se ha reportado también en pruebas de laboratorio y de campo que la tiamulina es eficaz contra Pasteurella multocida y Haemophilus paragallinarum (Valks, M., 2002) bacterias que se asocian a la infección con mycoplasma así como también contra (Davriese, .A.,t.al.,2001), S. aureus, Ornitobacteiurm Streptococcus sp., rhinotracheale C. perfringens y espiroquetas intestinales. (Valks M., 2002.) Las experiencias de campo con el empleo de tiamulina en diversos países (Velásquez, SE., et al., 2005) en la prevención de la Mycoplasmosis (M. gallisepticum y M. synoviae) y la enfermedad crónica respiratoria gallinas de y crónica complicada en reproductoras, posturas comerciales y en pollo de engorda ha redituado en 3 mejorías económicas y abre la posibilidad de implementar esquemas integrales de erradicación principalmente contra mycoplasmas. La combinación de Tiamulina con Clortetraciclina muestra no solo una complementación de su espectro sino también efectos sinérgicos (ver cuadro 3). Dynamutilin tiene registro en numerosos países para su uso en la avicultura en combinación con cocidiostatos ionóforos monovalentes como la monensina, la salinomicina y la narasina. El presente estudio se realizó para demostrar en México la seguridad de la medicación con Tiamulina- Clortetraciclina (Dynamutilin CTC) a 33 y 50 ppm + clortetraciclinas 100 y 150 ppm respectivamente + salinomicina 60 ppm, de manera simultanea en la alimentación de pollo de engorda. MATERIALES Y MÉTODOS. El ensayo se desarrolló del 29 de mayo al 10 de julio de 2006, en una granja experimental situada en Charo, Michoacán, México (Integración y Desarrollo Agropecuario S.A. de CV.); a una altura de 1940 msnm, con una temperatura media anual de 17.7°C. Se emplearon dos mil cien pollos de engorda sexados ( mitad hembras y mitad machos) de un día de edad (Ross x Ross) obtenidos de una incubadora comercial. Los pollitos fueron distribuidos aleatoriamente en 21 corrales con piso de de cemento y cama de paja de trigo. Se emplearon 3 tratamientos con siete réplicas de 100 pollos cada una hasta los 42 días de edad. Los pollitos al día de edad fueron negativos a Ms y Mg. Los pollos de engorda se alimentaron con dietas en harina, las cuales cubrieron las necesidades de nutrientes del ave. Las dietas fueron en tres fases de alimentación: Iniciación 1-21 días; crecimiento 22-37 días; y finalización 38-42 días de edad. Las dietas no tuvieron antibiótico promotor del crecimiento en todos los tratamientos y fases. Las aves fueron vacunadas contra la enfermedad de Marek en la incubadora, a los 8 y 25 días de edad fueron vacunados vía el agua de bebida contra la enfermedad de Newcastle. La caseta donde estuvo el pollo de engorda alojado fue de ambiente natural y la ventilación controlada con cortinas. La densidad de población empleada fue de 10 aves por m2, empleando solo luz natural. El alimento y el agua se ofrecieron ad libitum durante todo el ensayo. Se llevaron datos de temperatura, a una distancia de 20 cm. por encima de la cama. 4 Los tratamientos experimentales se muestran en el Cuadro 4. Se llevaron registros de peso corporal, consumo de alimento, conversión alimenticia y mortalidad general y por síndrome ascítico total. Los pesos corporales fueron registrados en los días 1, 7, 14, 21 y 42 de edad. Previo al inicio del estudio y a la administración del alimento, se constató que tuvieran las cantidades de antibióticos y coccidiostato de acuerdo a las establecidas en diseño experimental. En los días 1, 14, 28 y 42, se tomaron muestras de tráquea, sacos aéreos, pulmones y articulaciones, de un pool de 5 aves por tratamiento para análisis por PCR de Mg y Ms. Además se realizaron cultivos en Agar para micoplasma para monitorear el crecimiento semanal durante 3 semanas. Se tomaron muestras de sangre para diagnóstico de Bronquitis Infecciosa y Enfermedad de Gumboro (con la prueba de ELISA) y la Enfermedad de Newcastle con IH a los 3 y 28 días en 10 aves de cada tratamiento. También fueron tomadas muestras de sangre para diagnóstico por ELISA para Mg y Ms semanalmente a 10 aves de cada tratamiento. A los datos obtenidos de las variables en estudio, se les realizaron análisis de varianza conforme a un diseño completamente al azar. El porcentaje de mortalidad para su análisis fue transformado a la proporción Arco Seno raíz cuadrada de la proporción RESULTADOS Durante las tres semanas en las que se administró tiamulina + clortetraciclina + salinomicina, no se observaron en los pollos tratados signos de problemas neurológicos, respiratorios, digestivos o locomotores indicativos de toxicidad. Los estudios en laboratorio no evidenciaron la exposición a mycoplasma, bacterias o virus que pudiesen enfermar a las aves. En cuanto a los datos acumulados de la mortalidad general y por síndrome ascítico tampoco existieron diferencias entre tratamientos aun cuando se muestran tendencias de mejoría en los grupos tratados con Tiamulina-Clortetraciclina. Los resultados finales de peso, consumo de alimento y conversión alimenticia al día 42 se observan en el cuadro 5. La integración de las variables medidas por el índice de productividad europeo se muestra en el cuadro 6, que no muestra diferencias. 5 DISCUSIÓN. Los resultados corroboran la información de compatibilidad sin toxicidad de la medicación simultanea de tiamulina y salinomicina. Los índices de productividad calculados para cada grupo no muestran diferencias significativas, esto refuerza aún más que las medicaciones utilizadas no inducen efectos negativos en las aves. Se observa un pequeña diferencia numérica en el porcentaje de mortalidad total, siendo el grupo control el mas alto y el grupo con 50 ppm de tiamulina con la más baja mortalidad. Las evaluaciones publicadas que informan de la compatibilidad de esta medicación, artificialmente las han realizado en parvadas de pollos infectados natural o y en ellos los efectos benéficos han quedado claramente demostrados (Diao Youxiang, et al., 2003., Velásquez, SE., et al., 2005., Schumacher A, et al., 2006). Por lo anterior, el objetivo de esta prueba era el corroborar la compatibilidad de la tiamulina + clortetracicliona ® (Dynamutilin CTC) y un antibiótico ionóforo (Salinomocina) bajo las condiciones comunes en México. No se observa diferencia estadística en los índices productivos, dado que los pollos no padecieron ninguna enfermedad durante el estudio, ni hubo diferencias significativas en cuanto a la conversión de alimento, el consumo final de alimento, la mortalidad general y la causada por ascitis. CONCLUSIONES Las combinaciones de tiamulina en el alimento de pollo de engorda a dosis de 33 y 50 ppm mas clortetraciclina a 100 y 150 ppm respectivamente, con salinomicina a dosis de 60 ppm, se mostraron compatibles sin signos de toxicidad y sin alterar los parámetros fisiológicos y productivos en las aves. El índice de productividad de los grupos tratados y control, no mostraron diferencias. Este estudio confirma la posibilidad de utilizar esta medicación en parvadas de pollos con afecciones causadas por gérmenes sensibles a la combinación sinérgica de tiamulina + clotetraciclina (Dynamutilin® CTC*). Dicha combinación es particularmente útil en parvadas con antecedentes de Mycoplasmosis en las que un tratamiento en el alimento en forma temprana reduce las secuelas de enfermedad crónica respiratoria así como también las afecciones por 6 clostridias como en la enteritis necrótica de las aves y las causadas por cocos gram positivos. *Dynamutilin y Denagard son marcas registradas por Novartis.. 7 CUADROS Y FIGURAS CUADRO 1: Comparación de las concentraciones mínimas inhibitorias de diferentes antibióticos frente a Mycoplasma gallisepticum CMI de agentes antimicrobiales contra cepas de campo y cepas de Mycoplasma gallisepticum (20 aislamientos), CMI (µg/ml) Antimicrobial Cepa tipo Cepas de Campo Antibiotico NCTC10115 Rango CMI 50% CMI 90% Enrofloxacina 0.01 0.025-1.0 0.05 0.1 Danofloxacina 0.005 0.01-0.5 0.05 0.1 Tilosina 0.01 0.0025-10.0 0.01 2.5 Oxytetracicline 0.1 0.05-0.5 0.25 0.5 Tiamutin® (tiamulina) 0.0025 0.0005-0.25 0.001 0.025 Hannan and others (1997) where 20 isolates were tested from the UK, Germany, Denmark, USA and Japan. CUADRO 1a: Comparación de las concentraciones mínimas inhibitorias de diferentes antibióticos frente a Mycoplasma synoviae CMI de agentes antimicrobiales contra cepas tipo y de campo de Mycoplasma synoviae (28 aislamientos) µg/ml. Antimicrobial Cepa tipo Cepas de campo NCTC10124 Rango CMI 50% CMI 90% Enrofloxacina 0.5 0.05-0.5 0.25 0.5 Danofloxacina 0.5 0.1-0.5 0.25 0.5 Tilosina 0.025 0.0025-50 0.025 50 Oxytetracyclina 0.11 0.025->100 0.1 100 Tiamutin® (tiamulina) 0.1 0.05-0.5 0.1 0.25 8 CUADRO 2: Concentraciones mínimas inhibitorias (µg/ml) de tiamulina comparada con tilosina contra diversos patógenos. tiamulina tilosina 100 10 1 0.1 Staph Strep Ecoli C. perfr CUADRO 3: Sinergismo in vitro entre tiamulina y clortetraciclina (CMI en µg / ml ) contra patógenos respiratorios (Miller and Stipkovits, 1991, Burch et al. 1986, Jones, 1984) Tiamulina+clortetraciclina Organismo Tiamulina Clortetraciclina Tiamulina CTC Factor de sinergia (x) Tiamulina CTC M.hyopneumoniae 0.13 2.0 0.016 1.0 8x 2x A. pleuropneumoniae(9) 3.9 0.9 1.1 0.22 3.6x 4x P.multocida (8) 15.8 12.8 2.9 3.2 5.4x 4x H. parasuis (1) 0.9 1.9 0.45 0.45 2x B. bronchiseptica (1) 250 0.45 0.45 0.22 555x 4.2x 2x 9 CUADRO 4: TRATAMIENTOS EXPERIMENTALES Tratamiento 1 Del día 1 al 21: Tiamulina * 33.3 ppm + clortetraciclina* 100 ppm + Salinomicina 60 ppm Del día 22 al 37: Salinomicina 60 ppm Tratamiento 2 Del día 1 al 21: Tiamulina* 50 ppm + clortetraciclina* 150 ppm + Salinomicina 60 ppm Del día 22 al 37: Salinomicina 60 ppm Tratamiento 3 Del día 1 al 37: Salinomicina 60 ppm (tratamiento testigo) * Dinamutilin y Diclortec proporcionados por Novartis CUADRO 5: Resultados a los 42 días de edad Peso corporal Consumo de alimento Conversión alimenticia (g) (g) (kg/kg) 1 2 2240 ± 41 ab 3931 ± 58 a 1.78 ± .03 a 2216 ± 29 b 3875 ± 95 a 1.78 ± .05 a 3 2269 ± 35 a 3962 ± 89 a 1.77 ± .03 a (P<0.01) NS NS Tratamiento a, b. Valores con distinta letra son diferentes estadísticamente. Medias y desviaciones estándar NS. Efecto no significativo (P>0.05) CUADRO 6: Índice europeo de productividad por grupo. Tratamiento 1 2 3 Índice de productividad Mortalidad general % Mortalidad por ascitis % 279 a 6.71 ± 2.0 a 1.28 ± 1.1 a 278 a 6.14 ± 2.3 a 0.71 ± 0.9 a 284 a 6.85 ± 2.5 a 0.57 ± 0.9 a NS NS NS a. Valores con la misma letra no son diferentes estadísticamente. Medias y desviaciones estándar NS. Efecto no significativo (P>0.05) 10 REFERENCIAS. Davriese, L.A. De herdt.P. & Haesebrouck, F.: Antibiotic sensitivity and resistance in Ornithobacterium rhinotracheale strain from Belgian broiler Chickens. Aviam Pathology (2001) 30, 197-200 Diao Youxiang, Shandong, Danny Yu, Martin Valks, David Burch.: Evaluation of tiamulin and chlortetracycline in feed in the control of CRD in broilers. XIII Congress of the World Veterinary Poultry Association, July 19-23, 2003. pg 189. Gautier-Bouchardon A.V. et al.: In vitro development of resistence to enrofloxacin, erythromycin, tylosin, tiamulin and oxytetracicline in Mycoplasma gallisepticum, Mycoplasma iowae, and Mycoplasma synoviae. Veterinary Microbiology, 88(2002) 47-58 Hannan et al.: Mycoplasma gallisepticum Minimun inhibitory concentration MICs Techical Information., Novartis Animal Health (1997) Hun-hi Choi1, Kyoung-rok Oh2 , Man-ha Yoo3 .:Effect of Tiamutin on the performance of broiler breeders in South Korea1 .Novartis Korea Ltd. Seoul, 2 Namduck Sanitec, Seoul, South Korea. 3 Kangnam Breeder Farm, South Korea. TiamutinbroilerbreedersAbstarct_SK2.doc 11.10.2004 Schuhmacher A, Bafundo KW, Islam KM, Aupperle H, Glaser R, Schoon HA, Gropp M.: Tiamulin and semduramicin: effects of simultaneous administration on performance and health of growing broiler chickens. Poult Sci. 2006 Mar;85(3):441-5. Soeripto, M., Andriani, J. Raharjo , H.Bantoro and M.Valks.: Field trial on the use of Tiamutin premix in feed to control CRD complex in broilers. Novartis Animal Health, Technical information, 2006 Stipkovits, L., Salyi, G., Glavits, R. and Burch, D.G.S. (1999) Testing the compatibility of a combination of tiamulin/chlortetracycline 1:3 premix given in feed at different levels with salinomycin in chickens. Avian Pathology, 28, 579586 Valks, M.: Core Marketing Document for Tiamutin in poultry. Novartis Animal Health Inc. February 2002. Velásquez, SE., Valks, M.: Comparison of Tetramutin and Lincospectin for the improvement of production and control of mycoplasma infections in broilers from Columbia. Field trial report. Novartis Animal Health,Colombia. Technical information, 2005.