importancia de conocer el contenido de ácido oleico en

IMPORTANCIA DE CONOCER EL CONTENIDO DE ÁCIDO OLEICO EN
SEMILLAS PREVIO A LA DETERMINACIÓN DE ACEITE POR RMN
Dumón, A. (1), Cerioni, L. (1), (2), Albert, G. (1), (2), Pusiol, D. (1), (2), Izquierdo, N (3),
Quiroz, F (3), Alvarez, D (4)
(1) SpinLock SRL, C. de Arenales 1020, (X5000GZU) Córdoba, Argentina, Tel/Fax:
+54-351-4607289, e-mail: [email protected]
(2) FaMAF, UNC y CONICET Ciudad Universitaria, Medina Allende S/N,
(X5016LAE), Córdoba, Argentina, Tel: +54-351-4334051/52
(3) Unidad Integrada Balcarce FCA UNMP EEA INTA Balcarce, Ruta 226 Km 73
(7620) Balcarce, Argentina,
(4) INTA EEA Manfredi, Córdoba, Argentina, Tel: +54-3572-493053/58/61,
El porcentaje de aceite de las semillas de girasol influye de manera importante en el
precio del producto comercializado, ya que se aplican el 2% de bonificación y/o rebaja
por cada punto o fracción que el mismo supere o disminuya con respecto a la base de
comercialización (42%). La resonancia magnética nuclear pulsada es usada como una
manera rápida y no destructiva de medir el contenido de aceite en semillas de girasol. La
variante más ampliamente usada es la secuencia de pulsos conocida como Eco de Espín1
y la más recientemente publicada Presesión Libre de Onda Continua2. El método de eco
de espín ha sido criticado porque depende de que el tiempo de relajación espín-espín del
aceite sea constante, lo cual no siempre ocurre. Sin embargo ajustando algunos
parámetros se logró que con una variación del 10% en el valor de T2 (tiempo de
relajación espín-espín), la variación en el contenido de aceite no sea mayor al 0.1%3,4. Lo
mismo ocurre con el método de presesión libre de onda continua, el cual también
depende del valor de T2 del aceite presente en las semillas. En muchos casos estas
consideraciones no son válidas porque las distintas variedades de semillas presentan
diferentes contenidos de oleico, e incluso las condiciones climáticas hacen que el
contenido de ácido oleico en algunos casos no sea el valor esperado para una determinada
variedad. Si esto sucede las diferencias en el tiempo de relajación espín-espín son
mayores al 10%, lo que ocasiona mayores diferencias en el contenido total de aceite
medido mediante RMN. Para demostrar esto se realizaron mediciones sobre semillas de
girasol tradicional, medio y alto oleico, con un importante rango de variación del
porcentaje de aceite, proporcionadas por la Unidad Integrada Balcarce. Las mediciones se
realizaron con un espectrómetro SpinLock, y se repitieron en un espectrómetro Newport
Analyser MkIII de Newport Oxford Instruments en la EEA INTA Manfredi, obteniendo una
muy buena correlación entre ambos. En la Figura 1 se presenta como evidencia las
diferentes intensidades de señal que existen según el contenido de ácido oleico de las
muestras utilizadas. Los datos graficados corresponden al promedio de dos repeticiones
para cada muestra. Se observa, por ejemplo, que si la curva de calibración fue construida
con muestras de girasol tradicional y se pretende medir el contenido total de aceite de
semillas que contengan aproximadamente 60% o 70% de ácido oleico la medición podría
tener un error promedio de 1.5 puntos por defecto (error que impactaría de manera
importante en el precio). En este trabajo también se muestra la existencia de una relación
lineal entre los valores de T2 del aceite en las semillas y el contenido de ácido oleico de
las mismas, a mayor contenido de ácido oleico menor es el tiempo de relajación (T2) del
aceite como se aprecia en la Figura 2. De esta manera, con el fin de eliminar los errores
causados por utilizar la misma calibración para muestras de diferente contenido de oleico,
se ha desarrollado un método basado en la relación lineal de la variación de los valores de
T2 en función del contenido de ácido oleico, para poder estimar los valores de ácido
oleico de cada muestra. El método consiste en aplicar la secuencia de pulsos CPMG (Carr
Purcell Meiboom Gill) y posteriormente ajustar mediante una exponencial el decaimiento
de la componente con mayor valor de T2. El decaimiento de esta componente es el que
presenta variaciones de acuerdo al contenido de ácido oleico de las muestras. Para
determinar el contenido de ácido oleico se utiliza el mismo espectrómetro empleado para
medir el contenido total de aceite (sólo es necesario incorporar este software al
espectrómetro), no siendo necesario realizar mediciones por el método analítico
convencional (cromatografía gaseosa). Si bien el análisis puede realizarse utilizando el
mismo espectrómetro, el ensayo es independiente de la determinación de aceite. Este
análisis es muy útil cuando no se conoce el contenido de ácido oleico de alguna muestra o
cuando se tenga dudas de que realmente sea el valor esperado para un determinado
híbrido. Actualmente se están realizando calibraciones para aceites de híbridos
tradicionales que poseen diferente contenido de oleico por haber sido producidos bajo
diferentes temperaturas (ej. NEA vs. otras regiones del país).
Intensidad de Señal de Aceite
6.0
señal / peso
5.5
5.0
4.5
Tradicional
Medio Oleico
Alto Oleico
4.0
3.5
30
35
40
45
% aceite
Figura 1
50
55
Curva de Calibración de Ácido Oleico
90
80
y= -1.07579x+256.6
% Ácido Oleico
70
r2= 0.96
60
50
40
30
20
10
140
150
160
170
180
190
200
210
220
230
240
T2
Figura 2
Bibliografía
1) E.L. Hahn, “Spin Echo”, Physical Review 80, 580 (1950).
2) R.B.V.Azeredo, L.A.Colnago, A.A.Souza, M.Engelsberg, “Continuous wave free
presession: Practical analytical tool for low-resolution nuclear magnetic resonance
measurement”, Analytica Chímica Acta 478, 313 (2003).
3) P.N.Tiwari, Bruker minispec applications note Nº 9 (2000).
4) S.A.Jones, Bruker minispec applications note Nº 17 (2001).